UV法蛋白质定量分析简述

这种方法是在280 nm波长,直接测试蛋白。选择 Warburg公式,光度计可以直接显示出样品的浓度,或者是选择相应的换算方法,将吸光值转换为样品浓度。 蛋白质测定过程非常简单,先测试空白液,然后直接测试蛋白质。由于缓冲液中存在一些杂质,一般要消除 320 nm的“背景”信息,设定此功能“开”。与测试核酸类似,要求 A 280 的吸光值至少大于 0.1A,最佳的线性范围在 1.0-1.5 之间。实验中选择 Warburg 公式显示样品浓度时,发现读数“漂移”。这是一个正常的现象。事实上,只要观察A 280 的吸光值的变化范围不超过 1%,表明结果非常稳定。 漂移的原因是因为 Warburg 公式吸光值换算成浓度,乘以一定的系数,只要吸光值有少许改变,浓度就会被放大,从而显得结果很不稳定。 蛋白质直接定量方法,适合测试较纯净、成分相对单一的蛋白质。紫外直接定量法相对于比色法来说,速度快,操作简单;但是容易受到平行物质的干......阅读全文

UV法蛋白质定量分析简述

  这种方法是在280 nm波长,直接测试蛋白。选择 Warburg公式,光度计可以直接显示出样品的浓度,或者是选择相应的换算方法,将吸光值转换为样品浓度。  蛋白质测定过程非常简单,先测试空白液,然后直接测试蛋白质。由于缓冲液中存在一些杂质,一般要消除 320 nm的“背景”信息,设定此功能“开”

蛋白质的直接定量(UV法)

蛋白质的直接定量(UV法)    分光光度计原理说明的这种方法是在280nm波长,直接测试蛋白。选择Warburg公式,光度计可以直接显示出样品的浓度,或者是选择相应的换算方法,将吸光值转换为样品浓度。蛋白质测定过程非常简单,先测试空白液,然后直接测试蛋白质。由于缓冲液中存在一些杂质,一般要消除

蛋白质的直接定量(UV法)简述

这种方法是在280 nm波长,直接测试蛋白。选择 Warburg公式,光度计可以直接显示出样品的浓度,或者是选择相应的换算方法,将吸光值转换为样品浓度。蛋白质测定过程非常简单,先测试空白液,然后直接测试蛋白质。由于缓冲液中存在一些杂质,一般要消除 320 nm的“背景”信息,设定此功能“开”。与

COD测量中的UV法

   UV法在线COD监测仪可以实现快速、准确、经济的COD在线监控。仪器的基本测量原理是基于污水中的有机物对紫外线的吸收。含有共轭双键或多环芳烃的有机物溶解在水中时,对紫外光有吸收作用。因此,通过测量这些有机物对254nm紫外光的吸收程度,我们就可以评估水体被这些有机物污染的程度。应用领域包括饮用

COD测量中的UV法

 UV法在线COD监测仪可以实现快速、准确、经济的COD在线监控。仪器的基本测量原理是基于污水中的有机物对紫外线的吸收。含有共轭双键或多环芳烃的有机物溶解在水中时,对紫外光有吸收作用。因此,通过测量这些有机物对254nm紫外光的吸收程度,我们就可以评估水体被这些有机物污染的程度。应用领域包括饮用水、

分光光度计用于蛋白质的直接定量(UV法)应用

这种方法是在280nm波长,直接测试蛋白。选择Warburg 公式,光度计可以直接显示出样品的浓度,或者是选择相应的换算方法,将吸光值转换为样品浓度。蛋白质测定过程非常简单,先测试空白液,然后直接测试蛋白质。由于缓冲液中存在一些杂质,一般要消除320nm 的“背景”信息,设定此功能“开”。与测试核酸

分光光度计应用蛋白质的直接定量(UV法)介绍

这种方法是在280nm波长,直接测试蛋白。选择Warburg 公式,光度计可以直接显示出样品的浓度,或者是选择相应的换算方法,将吸光值转换为样品浓度。蛋白质测定过程非常简单,先测试空白液,然后直接测试蛋白质。由于缓冲液中存在一些杂质,一般要消除320nm 的“背景”信息,设定此功能“开”。与测试核酸

RRLCUV/MS中药质控法

本文介绍了将高分离度快速液相色谱法紫外-可见检测器和四极杆质谱联用,分析各种中药(TCM)及中药制剂的方法,对不同中药用UV和MS检测所得到的色谱图进行了比较,将UV和MS图谱结合进行目标化合物的鉴定,该方法较传统控制单一组分的方法更为可靠。 我国拥有长期使用中药和中药制剂的历史,但由于缺

蛋白质定量分析(Protein-determination)

Bradford 的dye-binding method 是利用Coomassie brilliant blue G-250 (CBG) 可与蛋白质结合而变色的特性来定量 (Bradford, 1976);若试样中的蛋白质量较多,则结合到蛋白质而变色的CBG 也多,因而呈色较深。下例是以一组

蛋白质定量分析(Protein-determination)

实验概要本文介绍了蛋白质定量分析(Protein determination) Bradford 的dye-binding method的原理、样品配制及操作步骤等。实验原理Bradford  的dye-binding method 是利用Coomassie brilliant blue G-250

UV法COD在线监测仪测量原理

UV法COD在线监测仪测量原理:   测量原理是基于紫外吸收法,流通池中的水路被氙灯的紫外光照射。紫外光的某些组份通过流通池而被吸收,从而检测和分析出来。然后,根据比尔-朗伯(Beer-Lambert)定律,以不饱和有机分子在(COD在UV254nm,NO3是在UV220nm,色度在UV35

蛋白质的定量测定——紫外(UV)吸收测定法

实验原理蛋白质分子中所含酪氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,使蛋白质在280nm波长处有最大吸收值。在一定浓度范围内,蛋白质溶液的光吸收值(A280)与其含量成正比关系,可用作定量测定。紫外线吸收法测定蛋白质含量的优点是迅速,简便,不消耗样品,低浓度盐类不干扰测定。因此,广泛应用在柱层析分离中蛋白

色谱法的定量分析

定量分析色谱峰的大小由峰的高度或峰的面积确定。可用手工的方法测量峰高,和以峰高h与峰高一半处的峰宽ω┩的乘积表示峰面积。A=hω┩。新型的色谱仪都有积分仪或微处理机给出更精确的色谱峰高或面积。应该注意,组分进入检测器产生的相应的色谱信号大小(峰高或峰面积)随所用检测器类别和载气的不同而异,有时甚至受

什么是定量分析法

定量分析法是化学分析中用得最多的方法.这是对已知成分的物质的量进行测定的分析,通常用的是容量分析法.定量分析由于要精确地确定所分析的成分的含量,因此添加试剂都要有量的控制,特别是参与反应的成分都是通过容量滴定管加入并计量的,因此定量分析也叫化学滴定法.同时,根据分析所依据的化学反应的原理而有络合物滴

色谱定量分析之内标法

  内标法是色谱定量分析中是一种重要技术。使用内标法时,在样品中加入一定量的标准物质,它可被色谱拄所分离,又不受试样中其它组分峰的干扰,只要测定内标物和待测组分的峰面积与相对响应值,即可求出待测组分在样品中的百分含量。   内标物的选择   采用内标法定量时,内标物的选择是一项十分重要的工作

UV-Shadowing

UV shadowing is a technique for visualizing nucleic acids separated on acrylamide/urea gels. The technique utilizes shortwave UV light (254 nm) and a

色谱定量分析中-选内标法or外标法?

  色谱分析的重要作用之一是对样品定量。而色谱法定量的依据是:组分的重量或在载气中的浓度与检测器的响应信号成正比。常见定量分析方法分为面积归一化法、内标法、外标法、标准曲线法等。大家常常容易傻傻分不清楚的莫过于内标法、外标法了。   以内标法为例,选一与欲测组分相近但能完全分离的组分做内标物(当

可以用紫外分光光度法对蛋白质进行定量分析吗

可以,而且实际上也是这么干的。不过用紫外分光光度法来分析有两种,一种是直接把蛋白质或氨基酸溶液在OD280下看峰,高级一点的如nanodrop这种机器就可以直接给出蛋白浓度,但这种方法极易受到抽提蛋白时去污剂的影响而出现严重偏差,所以如果是在缓冲液中的纯蛋白是可以这么检测定量的,比如买来的抗体就会提

定量分析中怎样选择内标法或外标法

选一与欲测组分相近但能完全分离的组分做内标物(当然是样品中没有的组分),然后配制欲测组分和内标物的混合标准溶液,进样得相对校正因子。再将内标物加入欲测组分的样品中,进样后测得欲测组分和内标物的定量参数。用内标法公式计算即可。内标法是将一定量的纯物质作内标物,加入到准确称量的试样中,根据被测试样和内标

氨基酸与蛋白质的定量分析

都是含量的检测,不一样就是蛋白质与氨基酸的含量检测都是含氮量检测,因此蛋白质含氮量肯定比氨基酸的含氮量要低,蛋白质的中含有其他的化学基,但作为含氮量的检测,他们属于同一事.

标准曲线法的定量分析方法介绍

  标准曲线法,也称外标法或直接比较法,是一种简便、快速的定量方法。与分光光度分析中的标准曲线法相似,首先用欲测组分的标准样品绘制标准曲线。  用标准样品配制成不同浓度的标准系列,在与待测组分相同的色谱条件下,等体积准确进样,测量各峰的峰面积或峰高,用峰面积或峰高对样品浓度绘制标准曲线,此标准曲线应

色谱仪定量分析之内标法

色谱仪定量分析的内标法是利用被测组分与内标物的的相对校正因子的比值不变进行定量的方法。一、计算方法:        mi/ms =(fi′Ai)/(fs′As)        Ci% =(mi/m)×100% =(fi′Aims)/(fs′Asm)×100% =(fi′/fs′)×(Ai/As)×(

常见药品定量分析方法外标法

外标法是《中国药典》(2010版)采用色谱法进行含量测定时最常用的方法。按各品种项下的规定,精密称(量)取对照品和供试品,配制成溶液,分别精密取一定量,注入仪器,记录色谱图,测量对照品和供试品待测成分的峰面积(或峰高),按下式计算含量:【例1】HPLC外标法测定阿司匹林泡腾片含量。色谱条件与系统适用

色谱定量分析中怎样选择内标法或外标法?

选一与欲测组分相近但能完全分离的组分做内标物(当然是样品中没有的组分),然后配制欲测组分和内标物的混合标准溶液,进样得相对校正因子。再将内标物加入欲测组分的样品中,进样后测得欲测组分和内标物的定量参数。用内标法公式计算即可。 内标法是将一定量的纯物质作内标物,加入到准确称量的试样中,根据被

何谓内标法,光谱定量分析时为何要采用内标法

什么是内标法内标法是将一定重量的纯物质作为内标物加到一定量的被分析的样品混合物中,然后,对含有内标物的样品进行色谱分析,分别测定内标物和待测组分的峰面积或是峰高及相对的校正因子,按照公式和方法就可以求出被测组分在样品中的百分含量。为什么要采用内标法内标法可以克服样品中一些基质的干扰,使测定更准确,因

色谱定量分析归一化法、内标法、外标法及标准加入法比较

  归一化法  把所有出峰的组分含量之和按100%计的定量方法,称为归一化法。  各成分校正因子一致时可用该法,该法简便、准确,特别是进样量不容易准确控制时,进样浓度及进样量的变化的影响很小。  其他操作条件,如流速、柱温等变化对定量结果的影响也很小。GC应用广于HPLC。  外标法(标准曲线法、直

色谱定性与定量分析(归一化法、内标法和外标法)

色谱法是根据色谱峰的面积或高度进行定量分析的。色谱定量计算方法很多,目前比较广泛应用的有归一化法、内标法和外标法。1. 归一化法如果试样中所有组分均能流出色谱柱并显示色谱峰,则可用此法计算组分含量。设试样中共有n个组分,各组分的量分别为m1,m2,……,mn,则i种组分的百分含量为: 归一化法的

浅谈常见比色法蛋白质定量分析方法

  比色法蛋白质定量    蛋白质通常是多种蛋白质的化合物,比色法测定的基础是蛋白质构成成分:氨基酸(如酪氨酸,丝氨酸)与外加的显色基团或者染料反应,产生有色物质。有色物质的浓度与蛋白质反应的氨基酸数目直接相关,从而反应蛋白质浓度。   比色方法一般有BCA,Bradford,Lowry 等几种

蛋白质转印法检定蛋白质

蛋白质转印法检定蛋白质     蛋白质经SDS-PAGE后,胶片浸入转印缓冲液,蛋白质可被转印到硝化纤维纸(nitrocellulose) 上,先经?素洗去SDS,并使蛋白质回?原态抗原性,可使用抗体进?免疫染色 (Towbin et al, 1979)。仪器用具:电泳转印槽 (Hoefer Tra

蛋白质印迹法

蛋白质印迹法(免疫印迹试验)即Western Blot。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。蛋白质印迹法是由瑞士米歇尔弗雷德里