浅谈常见比色法蛋白质定量分析方法

比色法蛋白质定量 蛋白质通常是多种蛋白质的化合物,比色法测定的基础是蛋白质构成成分:氨基酸(如酪氨酸,丝氨酸)与外加的显色基团或者染料反应,产生有色物质。有色物质的浓度与蛋白质反应的氨基酸数目直接相关,从而反应蛋白质浓度。 比色方法一般有BCA,Bradford,Lowry 等几种方法。 Lowry 法:以最早期的Biuret 反应为基础,并有所改进。蛋白质与Cu2 反应,产生蓝色的反应物。但是与Biuret 相比,Lowry 法敏感性更高。缺点是需要顺序加入几种不同的反应试剂;反应需要的时间较长;容易受到非蛋白物质的影响;含EDTA,Triton x-100,ammonia sulfate 等物质的蛋白不适合此种方法。 BCA(Bicinchoninine acid assay)法:这是一种较新的、更敏感的蛋白测试法。要分析的蛋白在碱性溶液里与Cu2 反应产生Cu ,后者与BCA形成螯合物,形......阅读全文

浅谈常见比色法蛋白质定量分析方法

  比色法蛋白质定量    蛋白质通常是多种蛋白质的化合物,比色法测定的基础是蛋白质构成成分:氨基酸(如酪氨酸,丝氨酸)与外加的显色基团或者染料反应,产生有色物质。有色物质的浓度与蛋白质反应的氨基酸数目直接相关,从而反应蛋白质浓度。   比色方法一般有BCA,Bradford,Lowry 等几种

比色法蛋白质定量

比色法蛋白质定量    蛋白质通常是多种蛋白质的化合物,比色法测定的基础是蛋白质构成成分:氨基酸(如酪氨酸,丝氨酸)与外加的显色基团或者染料反应,产生有色物质。有色物质的浓度与蛋白质反应的氨基酸数目直接相关,从而反应蛋白质浓度。    比色方法一般有BCA,Bradford,Lowry 等几种方法。

常见药品定量分析方法外标法

外标法是《中国药典》(2010版)采用色谱法进行含量测定时最常用的方法。按各品种项下的规定,精密称(量)取对照品和供试品,配制成溶液,分别精密取一定量,注入仪器,记录色谱图,测量对照品和供试品待测成分的峰面积(或峰高),按下式计算含量:【例1】HPLC外标法测定阿司匹林泡腾片含量。色谱条件与系统适用

测量蛋白质的方法水杨酸比色法

样品中的蛋白质经硫酸消化而转化成铵盐溶液后,在一定的温度和酸度条件下可与水杨酸钠和次氯酸钠作用生成蓝色化合物,可以在波长660nm处比色测定,求出样品含氮量,进而计算出蛋白质含量。

蛋白质的测定方法之水扬酸比色法

1       原理: 样品中的pro经H2SO4消化转化为铵盐溶液后,在一定的酸度和温度下与水扬酸钠和次氯酸钠作用生成有颜色的化合物,可以在波长660nm处比色测定,求出样品含氮量,计算蛋白质含量。2       方法   (1)标准曲线的绘制取6个25ml容量瓶编号  0   1   2   3

常见药品定量分析方法间接滴定法

原因不宜采用直接酸碱滴定法时,可采用间接酸碱滴定法测定,如磷酸可待因糖浆的含量测定方法、复方对乙酰氨基酚片中咖啡因含量的测定等。在药品检验中应用较多的是间接碘量法。具体方法是先加入过量的滴定液A,使其与供试品溶液中的被测药物进行反应,待反应完全后,再用另一种滴定液B回滴反应后剩余的滴定液A。本法一般

常见药品定量分析方法吸收系数法

吸收系数法测定药物含量的方法是测定所配供试品溶液在规定波长的吸光度,根据被测成分的吸收系数()计算其含量。特点是对仪器要求高,使用该法时,应注意仪器波长、空白吸收的校正,吸光度准确度的检定和杂散光的检查;无需对照品,方法简便。一、原料药含量计算用本法测定时,以规定条件下的吸收系数计算含量,吸收系数通

常见药品定量分析方法滴定度及计算

一、滴定度及计算在容量分析(又称滴定分析法)过程中,标准溶液的量正好为被测物质按化学计量关系定量反应为止时(即滴定终点),根据滴加的已知准确浓度的标准溶液(滴定液)的浓度和体积、计算出的被测物质的量。因此在计算时,需要引入滴定度的概念,并掌握滴定度的计算方法。滴定度即1mL规定浓度的滴定液相当于被测

比色法蛋白质定量介绍

蛋白质通常是多种蛋白质的化合物,比色法测定的基础是蛋白质构成成分:氨基酸(如酪氨酸,丝氨酸)与外加的显色基团或者染料反应,产生有色物质。有色物质的浓度与蛋白质反应的氨基酸数目直接相关,从而反应蛋白质浓度。比色方法一般有 BCA,Bradford,Lowry 等几种方法。Lowry 法:以最早期的 B

浅谈PCR方法中常见的污染问题及对策

浅谈RT-PCR实验方法中常见污染问题及对策 河南出入境检验检疫局技术中心 李轲 反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)是一种体外核酸扩增技术,它具有特异、敏感、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点,能在几个小时内完成从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量的目的产物供分析研究和检测鉴定,所以

浅谈临床常见步态异常

步态是评估骨骼肌肉系统检查的重要项目,如果发生步态异常可能与神经功能障碍或骨骼肌肉系统功能障碍的代偿表现有关,临床诊疗中对步态的评估也是十分重要,某些具有特征性的异常步态可以提示疾病病位,具有临床诊断性价值。在进行步态评估时,注意以下几点: 1.须与正常步态进行对比; 2.比较两侧动作

常见药品定量分析方法对照品比较法

一、原料药含量计算紫外-可见分光光度法适用于具有共轭结构药物含量的测定。通常用于被测组分含量在1%以下样品(如药物制剂等)的测定,其相对误差一般为2%~5%。由于此法操作简便快速、灵敏度较高,仪器普及,因此是药品检验中常用的分析方法之一。常用方法及其计算如下。单按药典或药品标准规定配制一定浓度的供试

浅谈地磅司秤系统常见故障及处理方法

1. 概述目前由于地磅司秤系统拥有使用简单、称重速度快、计量准确等诸多优点,在对外贸易、企业内部物流周转等方面得到了广泛的应用。但是由于地磅通常安装在户外,在露天环境下使用,很容易受到雨雪腐蚀、粉尘干扰、外力冲击、雷电干扰等恶劣环境的影响,同时由于使用频率高、维护不及时等原因,导致地磅出故障的概率很

浅谈食品中蛋白质测定方法的研究进展

蛋白质是构成生物体细胞组织的重要成分。食物中的蛋白质是人体中氮的惟一来源, 具有糖类和脂肪不可替代的作用。蛋白质与营养代谢、细胞结构、酶、激素、病毒、免疫、物质运转和遗传等密切相关, 其分离与定性、定量分析是生物化学和其他生物学科、食品检验、临床检验、诊断疾病、生物药物分离提纯和质量检验中最重要的工

常见药品定量分析方法内标法加校正因子

按药典或药品标准规定,精密称(量)取药物对照品和内标物质,分别配成溶液,精密量取各适量,混合配成校正因子测定用对照品溶液,取一定量注入色谱仪,记录色谱图,测量对照品和内标物质的峰面积或峰高,按下式计算校正因子:式中    AS——内标物质的峰面积或峰高           AR——对照品的峰面积或峰

水扬酸比色法测定蛋白质

  1 原理: 样品中的pro经H2SO4消化转化为铵盐溶液后,在一定的酸度和温度下与水扬酸钠和次氯酸钠作用生成有颜色的化合物,可以在波长660nm处比色测定,求出样品含氮量,计算蛋白质含量。  2 方法 (1)标准曲线的绘制  取6个25ml容量瓶编号 0 1 2 3 4 5 6  分别加空白酸液

浅谈真空滤油机常见故障及解决方法

真空滤油机又称真空滤油机,滤油机,真空净油机,其具有体积小、比例重量轻、移动方便、噪音低、连续工作时间长、性能稳定、操作方便等特点。是各电厂、电站、变电所、电器制造厂、炼油厂、石油化工等工矿企业过滤变压器油、透平油、40#以下机油、液压油等油液中的水分、气体和杂质微粒的理想设备。常见故障及解决方法:

蛋白质定量分析(Protein-determination)

Bradford 的dye-binding method 是利用Coomassie brilliant blue G-250 (CBG) 可与蛋白质结合而变色的特性来定量 (Bradford, 1976);若试样中的蛋白质量较多,则结合到蛋白质而变色的CBG 也多,因而呈色较深。下例是以一组

蛋白质定量分析(Protein-determination)

实验概要本文介绍了蛋白质定量分析(Protein determination) Bradford 的dye-binding method的原理、样品配制及操作步骤等。实验原理Bradford  的dye-binding method 是利用Coomassie brilliant blue G-250

蛋白质常见的四种测定方法

  蛋白质是生命的物质基础,没有蛋白质就没有生命。奶牛的蛋白质需要主要用于维持、生长、妊娠和泌乳等需要。为了科学的为奶牛提供日粮,日粮中各种饲料蛋白质含量的检测成为一项日常性且必需性的工作。  蛋白质含量测定的几种方法  1紫外分光光度法  蛋白质分子中存在含有共轭双键的酪氨酸和色氨酸,使蛋白质对2

蛋白质常见的四种测定方法

   蛋白质含量测定的几种方法  1紫外分光光度法  蛋白质分子中存在含有共轭双键的酪氨酸和色氨酸,使蛋白质对280nm的光波具有最大吸收值,在一定的范围内,蛋白质溶液的吸光值与其浓度成正比,可作定量测定。该法操作简单、快捷,并且测定的样品可以回收,低浓度盐类不干扰测定结果,故在蛋白质和酶的生化制备

蛋白质常见的四种测定方法

  蛋白质是由氨基酸以“脱水缩合”的方式组成的多肽链经过盘曲折叠形成的具有一定空间结构的物质。蛋白质中一定含有碳、氢、氧、氮元素,常见的蛋白质检测方法很多。蛋白质含量测定是指通过物理或化学方法对蛋白质含量进行测定,主要有以下4种。  1.凯氏定氮法  准备4个50mL凯氏烧瓶并标号,像1、2号烧瓶中

蛋白质常见的四种测定方法

  1、凯氏定氮法  准备4个50mL凯氏烧瓶并标号,想1、2号烧瓶中加入定量的蛋白质样品,另外两个烧瓶作为对照,在每个烧瓶中加入硫酸钾-硫酸铜混合物,再加入浓硫酸,将4个烧瓶放到消化架上进行消化。  消化完毕后进行蒸馏,全部蒸馏完毕后用标准盐酸滴定各烧瓶中收集的氨量,直至指示剂混合液由绿色变回淡紫

浅谈RTPCR实验方法中常见污染问题及对策

李轲反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)是一种体外核酸扩增技术,它具有特异、敏感、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点,能在几个小时内完成从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量的目的产物供分析研究和检测鉴定,所以近年来RT-PCR技术被广泛应用于人和动物的多种传染病早期诊断。笔者一直从事实

浅谈RTPCR实验方法中常见污染问题及对策

李轲反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)是一种体外核酸扩增技术,它具有特异、敏感、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点,能在几个小时内完成从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量的目的产物供分析研究和检测鉴定,所以近年来RT-PCR技术被广泛应用于人和动物的多种传染病早期诊断。 笔者一直

UV法蛋白质定量分析简述

  这种方法是在280 nm波长,直接测试蛋白。选择 Warburg公式,光度计可以直接显示出样品的浓度,或者是选择相应的换算方法,将吸光值转换为样品浓度。  蛋白质测定过程非常简单,先测试空白液,然后直接测试蛋白质。由于缓冲液中存在一些杂质,一般要消除 320 nm的“背景”信息,设定此功能“开”

定量分析方法

  一. 标准曲线法   配制与试样溶液相同或相近基体的含有不同浓度的待测元素的标准溶液,分别测定 A样,作 A-c 曲线,测定试样溶液的A,从标准曲线上查得 c样。   适用于组成简单、干扰较少的试样。  二. 直接比较法:样品数量不多,浓度范围小  三. 标准加入法   当试样基体影响较大,且又

定量分析方法

  一. 标准曲线法    配制与试样溶液相同或相近基体的含有不同浓度的待测元素的标准溶液,分别测定 A样,作 A-c 曲线,测定试样溶液的A,从标准曲线上查得 c样。    适用于组成简单、干扰较少的试样。   二. 直接比较法:样品数量不多,浓度范围小   三. 标准加入法    当试

浅谈微量热仪的常见问题

   (一)氧弹漏气 橡胶密封圈老化或磨损,更换密封圈   (二)点火失败 线路不通或接触不良 1.检查连线是否连接好,氧弹头与点火帽是否接触好,氧弹内筒是否放好 2.试样潮湿 充氧过快溅湿试样 3.点火丝或棉线与试样接触不良 重新装样 4.两电极过脏 用砂纸打磨电极 5.点火帽氧化 用砂纸打磨点火