关于反相色谱技术的影响因素的介绍
(1)柱长 有机小分子和肽类的分辨率随柱长的增加而增加．但是柱长增加并不能使蛋白质和核酸等生物大分子的分辨率显著增加．它们在较短的柱子上往往也有很好的分离效果。 (2)流动相的流速。 有机小分子和肽类的分辨率对流动相流速非常敏感。而蛋白质和核酸等生物大分子的分辨率则不然。流速越小,柱子越长,色谱峰的宽度就越大,分辨率就越小。制备色谱上样过程中的流速对动态吸附容量影响很大。 (3)温度。 温度上升,流动相黏度下降,流动速度加快,且流动相与固定相之间的传质速度加快,使分辨率增加。同时,温度上升,分子热运动增加,疏水性作用减弱。升高温度要考虑目标物质的热稳定性。 (4)流动相组成。 流动相的极性越大,溶质的分配系数越大,洗脱时间越长。RPC多采用降低流动相极性(水含量)的线性梯度洗脱法。水是极性最强的溶剂,在反相色谱中常常和基础溶剂配合使用,向流动相中加入不同浓度的、可以与水混溶的有机溶剂,以得到不同强度的流动相,这......阅读全文
关于反相色谱技术的影响因素的介绍
(1)柱长 有机小分子和肽类的分辨率随柱长的增加而增加．但是柱长增加并不能使蛋白质和核酸等生物大分子的分辨率显著增加．它们在较短的柱子上往往也有很好的分离效果。 (2)流动相的流速。 有机小分子和肽类的分辨率对流动相流速非常敏感。而蛋白质和核酸等生物大分子的分辨率则不然。流速越小,柱子越长
反相色谱柱的影响因素
液相色谱柱通常分为正相柱和反相柱。正相色谱柱大多以硅胶为柱，或是在硅胶表面键合-CN,-NH3等官能团的键合相硅胶柱；反相色谱柱填料主要以硅胶为基质，在其表面键合非极性的十八烷基官能团（ODS）称为C18柱，其它常用的反相柱还有C8,C4,C2和苯基柱等。另外还有离子交换柱，GPC柱，聚合物填料
反相色谱法的影响因素
1、溶质的分子结构（极性）极性越弱，疏水性越强，k越大，tR也越大。同系物碳数越多，极性越弱，k越大；引入极性取代基，降低疏水性，k值变小。2、固定相键合烷基的疏水性随碳链的延长而增加，溶质的k也增大。硅胶表面键合烷基的浓度越大，则溶质的k越大。3、流动相极性越强，洗脱能力越弱，使溶质的k越大；溶剂
反相色谱柱的优点和影响因素
液相色谱柱通常分为正相柱和反相柱。正相色谱柱大多以硅胶为柱，或是在硅胶表面键合-CN,-NH3等官能团的键合相硅胶柱;反相色谱柱填料主要以硅胶为基质，在其表面键合非极性的十八烷基官能团（ODS）称为C18柱，其它常用的反相柱还有C8,C4,C2和苯基柱等。另外还有离子交换柱，GPC柱，聚合物填料柱等
关于吸附色谱的影响因素介绍
吸附色谱的分离效果，决定于吸附剂、溶剂和被分离化合物的性质这三个因素。 (1)吸附剂 凡能够将其他物质聚集到自己表面上的物质，都称为吸附剂。能聚集于吸附剂表面的物质称为被吸附物。在吸附色谱中应用的吸附剂一般为固体。常用的吸附剂有硅胶、氧化铝、活性炭、硅酸镁、聚酰胺、硅藻土等。 ①硅胶 色
关于反相色谱的介绍
根据流动相和固定相相对极性不同,液相色谱分为正相色谱和反相色谱。流动相极性大于固定相极性的情况,称为反相色谱。非极性键合相色谱可作反相色谱。在现代液相色谱中应用最广泛,现代液相色谱分析工作的70%以上是在非极性键合固定相上进行的。
能影响到反相色谱柱的因素有哪些？
反相色谱柱是指利用非极性的反相介质为固定相，极性有机溶剂的水溶液为流动相，根据溶质极性(疏水性)的差别进行溶质分离与纯化的洗脱色谱法。与HIC一样，RPC中溶质也通过疏水性相互作用分配于固定相表面，但是，RPC固定相表面完全被非极性基团所覆盖，表现出强烈的疏水性。因此，必须用极性有机溶剂(如甲醇
影响反相液相色谱仪ODS柱性能的因素
影响反相液相色谱仪ODS柱性能的因素有色谱柱物理性质和化学性质。一、色谱柱物理性质：1、硅胶纯度：硅胶纯度指填料硅胶的纯度和残留金属离子的浓度。A类硅胶由于带负电荷的残留硅羟基和酸性表面上金属的含量高（硅羟基pKa低），导致碱性化合物发生拖尾。B类硅胶（高纯）由于金属含量低，硅羟基pKa高，碱性化合
影响反相离子对色谱仪色谱保留的因素
影响反相离子对色谱仪色谱保留的因素有流动相pH值、离子对试剂种类、离子对试剂浓度、有机溶剂性质、有机溶剂浓度、缓冲盐浓度和柱温等。一、流动相pH值：反相离子对色谱常用的流动相是甲醇－水、乙腈－水，流动相中一般含有3～10mol/L的离子对试剂。流动相pH值决定离子化合物的解离度，合适的pH值是反相离
关于反相色谱的应用的介绍
反相介质性能稳定。分离效率高,可分离蛋白质、肽、氨基酸、核酸、甾类、脂类、脂肪酸、糖类、植物碱等含有非极性基团的各种物质。 例如使用C8和C18改造的硅胶柱的高压液相来制备和分析四环素类抗生素,对于四环素类抗生素来说．用氧化铝、硅胶、离子交换树脂等来进行制备性分离会显得极性太强。反相色谱硅胶L
影响反相液相色谱仪溶质保留值的因素
反相液相色谱仪分析中溶质保留值主要由键合相种类、固定相表面积和流动相组成决定。 一、键合相种类： 溶质保留值通常随链长增长或键合相疏水性增强而增大。 二、固定相表面积： 溶质保留值与固定相表面积成正比。当其它条件相同时，溶质在低表面积色谱柱上的保留值小。 三、流动相组成： 溶质保留值
影响反相液相色谱仪溶质保留值的因素
反相液相色谱仪分析中溶质保留值主要由键合相种类、固定相表面积和流动相组成决定。一、键合相种类：溶质保留值通常随链长增长或键合相疏水性增强而增大。二、固定相表面积：溶质保留值与固定相表面积成正比。当其它条件相同时，溶质在低表面积色谱柱上的保留值小。三、流动相组成：溶质保留值可通过改变流动相组成或溶剂强
影响亲和色谱的因素介绍
1、上样体积 若目标产物与配基的结合作用较强，上样体积对亲和色谱效果影响较小。若二者间结合力较弱，样品浓度要高一些，上样量不要超过色谱柱载量的5%~10%。（这个载量是指色谱柱所吸附的配体的量） 2、柱长 亲和柱的长度需要根据亲和介质的性质确定。如果亲和介质的载量高，与目标产物（目标物）的
影响反相离子对色谱仪保留值的因素
气相色谱仪的柱温直接影响色谱柱的使用寿命、柱的选择性、柱效能和分析速度，是重要的操作条件。 柱温低有利于分配，有利于组分的分离。 但柱温过低，组分可能在色谱柱冷凝或传质阻力增加，使色谱峰扩张，甚至拖尾。 柱温高，虽有利于传质，但分配系数变小，不利于分离。 一般通过
影响反相离子对色谱仪保留值的因素
影响反相离子对色谱仪保留值的因素有PH值、离子对试剂的性质与浓度、溶剂极性、离子强度等。一、PH值：对于阴离子的分离，PH值下降，k减小。改善分离选择性的有效方法。二、离子对试剂的性质与浓度：离子对试剂烷基链越长，疏水性越大，k越大。三、溶剂极性：甲醇和乙腈等含量增加，洗脱强度增大，k减小。洗脱强度
影响正相硅胶反相洗脱色谱仪保留值的因素
影响正相硅胶反相洗脱色谱仪保留值的因素：一、色谱流动相保持一定的PH值和离子强度。随着流动相中水的比例增加，洗脱能力减小。 二、流动相中三乙胺浓度升高，对含碱性基团组分的洗脱能力提高，保留时间缩短。三乙胺为阴离子竞争离子，用于竞争硅羟基，以消除硅羟基对生物间的吸附。三、碱性组分的保留随缓冲盐浓度的增
影响反相键合相液相色谱仪溶质保留的因素
影响反相键合相液相色谱仪溶质保留的因素有溶质的极性、溶质分子中非极性部分的总表面积、键合相上的烷基总面积和流动相的表面张力等。一、溶质的极性：溶质的极性越弱，疏水性越强，保留值越大。二、溶质分子中非极性部分的总表面积：溶质和固定相接触的总表面积越大，保留值越大。三、键合相上的烷基总面积：烷基键合相的
反相色谱介绍
反相液相色谱柱效高、分离能力强、保留机理清楚，是液相色谱分离模式中使用zui为广泛的一种，对于生物大分子、蛋白质及酶的分离分析，反相液相色谱正受到越来越多的关．反相色语法是以表面非极性载体为固定相，面以比固定相极性强的溶剂为流动相的—种液相色谱分离模式．反相色谱固定相大多是硅胶表面键合疏水基团，基于
影响反相键合固定相色谱仪溶质保留值的因素
影响反相键合固定相色谱仪溶质保留值的因素有流动相、键合固定相和溶质等。一、流动相：组分的保留值随流动相极性的减小而减小。二、键合固定相：1、烷基覆盖量增加，k值增大。2、烷基链长增加，k值增大。三、溶质：1、非离子化合物：极性大，k值小。2、非极性化合物：分子表面积大，k值大。3、同系物：链长增大，
影响反相离子对色谱仪分离选择性的因素
影响反相离子对色谱仪分离选择性的因素有溶剂极性、离子强度、pH值、离子对试剂性质及浓度、温度等。一、溶剂极性：溶剂极性小，洗脱能力强，k值小。二、离子强度：水溶液中离子强度大，洗脱能力强，k值小。三、pH值：对于弱酸，pH值接近7，组分完全电离，zui易形成离子对，k值zui大。pH值降低，固定相中
导致液相色谱仪反相色谱柱污染的因素
反相色谱在高效液相色谱中是应用最广泛的技术，主要是因为它适用于分析极大多数的非极性物质和离子化合物。大多数用于反相色谱的固定相都是天然的疏水物质，因此，分析物是按照它们与固定相的疏水相互作用的大小来分离的。 反相色谱柱在分离检测过程中，分析物和基质污染能使固定相受到影响，使用过程中应当注意固定
影响电泳技术的因素介绍
1．电泳介质的pH值溶液的pH值决定带电物质的解离程度，也决定物质所带净电荷的多少。对蛋白质，氨基酸等类似两性电解质，pH值离等电点越远，粒子所带电荷越多，泳动速度越快，反之越慢。因此，当分离某一种混合物时，应选择一种能扩大各种蛋白质所带电荷量差别的pH值，以利于各种蛋白质的有效分离。为了保证电泳过
影响色谱柱分离度的因素介绍
影响色谱柱分离度的因素是固定相的种类、性质（粒度、粒径分布等）、填充状况、柱长、流动相的种类和流速及测定柱效所用物质的性质等。具体如下：（1）色谱长度和填料的性质，色谱柱越长，组分之间分析越好，但色谱柱越长压降越大，而输入的压力是有限的。色谱柱过长会增大进出口压力比，相反会影响色谱峰分离；（2）色谱
亲和色谱的影响因素
1、上样体积若目标产物与配基的结合作用较强，上样体积对亲和色谱效果影响较小。若二者间结合力较弱，样品浓度要高一些，上样量不要超过色谱柱载量的5%~10%。（这个载量是指色谱柱所吸附的配体的量）2、柱长亲和柱的长度需要根据亲和介质的性质确定。如果亲和介质的载量高，与目标产物（目标物）的作用力强，可以选
关于阿斯巴甜合成的影响因素介绍
合成影响因素（乙醇）,有研究表明,阿斯巴甜在水中溶解度一般较小,约为1%（25℃）,但随着溶剂中乙醇含量的不断增加,阿斯巴甜的溶解度也逐渐上升,当阿斯巴甜在乙醇水溶液中溶解度到达峰值时,随着乙醇继续加入,阿斯巴甜溶解度会逐渐降低。 合成影响因素（温度）,常温下配置相同甜度的阿斯巴甜溶液和白砂糖
关于吸附层析的影响因素介绍
吸附色谱的分离效果，决定于吸附剂、溶剂和被分离化合物的性质这三个因素。 (1)吸附剂 凡能够将其他物质聚集到自己表面上的物质，都称为吸附剂。能聚集于吸附剂表面的物质称为被吸附物。在吸附色谱中应用的吸附剂一般为固体。常用的吸附剂有硅胶、氧化铝、活性炭、硅酸镁、聚酰胺、硅藻土等。 ①硅胶 色
关于反相色谱法的基本信息介绍
一般用非极性固定相（如C18、C8)；流动相为水或缓冲液，常加入甲醇、乙腈、异丙醇、丙酮、四氢呋喃等与水互溶的有机溶剂以调节保留时间。适用于分离非极性和极性较弱的化合物。RPC在现代液相色谱中应用最为广泛，据统计，它占整个HPLC应用的80%左右。
高速逆流色谱的影响因素及技术发展
影响因素 1.固定相的保留值 在逆流色谱中，留在管中固定相的量是影响溶质峰分离度的一个重要因素，高保留量将会大大改进峰分离度。 仪器对保留值的影响（外因） 研究表明：螺旋管支持件的自转半径r与公转半径R之比B值是一个影响两相互不混溶溶剂在旋转螺旋管内保留的关键因素。用大直径的支持件使值进一
关于内标法的影响因素的介绍
影响内标和被测组分峰高或峰面积比值的因素主要有化学方面的、色谱方面的和仪器方面的三类。 由化学方面的原因产生的面积比的变化常常在分析重复样品时出现。 化学方面的因素包括： 1、内标物在样品里混合不好； 2、内标物和样品组分之间发生反应， 3、内标物纯度可变等。 对于一个比较成熟的方法
反相色谱的样品保留的介绍
反相色谱中样品的保留值主要由固定相比表面积、键合相种类和浓度决定,保留值通常随链长增长或键合相的疏水性增强而增大．对于非极性化合物通常遵循以下规则：(弱)非键合硅胶《氰基