二合一液相系统:混合分析与制备功能的HPLC系统
当液相色谱法被用于目标化合物的分离纯化时,首先需要使用一套制备型的LC系统来开发相应的纯化方法,然后,分析型HPLC则被用于纯化后的纯度和含量分析。在这种情况下,往往需要准备两套HPLC系统,一个专门用于制备分离,另一个用于纯度分析,这无疑对于仪器采购来说增加了成本负担。 KNAUER新发布的二合一液相系统,混合了分析与制备两种功能,能够将单一物质从混合物中分离出来,并进行自动的纯度分析。该系统能帮助您建立一种混合的方法,同时支持流速高达50ml/min的制备分离以及目标纯化后的HPLC纯度和含量分析。 二合一液相系统的优点: 1)只需一套泵,兼顾分析与制备方法的流速需求,节省采购成本; 2)制备-分析自动连续运行,缩短制备-分析流程时间和减少人工操作; 二合一液相系统 该系统只需一个流速50ml/min的高压泵AZURA P6.1L来运行制备和分析方法所需的洗脱流速,搭配八波长检测器MWD 2.1L来实现制备和......阅读全文
二合一液相系统:混合分析与制备功能的HPLC系统
当液相色谱法被用于目标化合物的分离纯化时,首先需要使用一套制备型的LC系统来开发相应的纯化方法,然后,分析型HPLC则被用于纯化后的纯度和含量分析。在这种情况下,往往需要准备两套HPLC系统,一个专门用于制备分离,另一个用于纯度分析,这无疑对于仪器采购来说增加了成本负担。 KNAUER新发布的
液相色谱(HPLC)入门(二)
什么是色谱图?色谱图表示发生在高效液相色谱系统中的化学[色谱]分离。一系列从基线出现的峰以时间为坐标。每个峰代表对不同化合物的检测器反应。色谱图由计算机数据站描绘。[如图 H].Figure H: How Peaks Are Created图H中,黄色谱带完全通过了检测器流通池;产生的电信号被送到计
液相色谱(HPLC)入门(五)
正相高效液相色谱在植物提取物的分离过程中,茨维特成功运用极性固定相[玻璃柱中的粉笔末; 如图A]和弱极性[非极性]流动相。这种经典的色谱模式被称为正相。图 S -1: 正相色谱法图 S -1 代表三个染料混合物的正相色谱分离。极性的固定相最强地保留了极性的黄色染料。相对非极性的蓝色染料在非极
液相色谱(HPLC)入门(四)
高效液相色谱分离模式总的来说,化合物的三种主要的性质可以用来产生高效液相色谱分离。它们是:· 极性· 电荷· 分子大小首先,让我们考虑极性和根据这一特性的两种主要分离模式:正相和反相色谱。基于极性的分离一个分子的结构、活性和物化性质由组成它的原子和化学键决定。在一个分子内部,决定了其特殊性质和可预测
液相色谱(HPLC)入门(一)
什么是液相色谱?历史概述和定义液相色谱的定义是二十世纪早期由俄罗斯植物学家 Mikhail S. 茨维特提出的。他最先尝试在装满颗粒的柱子上使用溶剂来分离从植物中提取的化合物[树叶色素]。茨维特用颗粒填满开口的玻璃柱。他发现两种特殊的材料,粉笔末(碳酸钙)和氧化铝很有用。他将样品[混匀植物叶
液相色谱(HPLC)入门(三)
高效液相色谱量级 [分析,制备和工程]我们已经讨论了高效液相色谱如何提供分析数据,用于定性和定量样品中的化合物。然而,高效液相色谱也可以用来纯化和收集所需的每一个化合物,在流通池下游使用组分收集器。这个过程被称为制备液相[如图 K].在制备液相中,科学家可以收集每个流出色谱柱的组分[例如:在本例中,
液相色谱(HPLC)漏液怎么办
通常可以通过拧紧或更换管路接头来解决漏液的问题。但值得注意的是过份拧紧会导致金属接头的漏液和塑料接头的磨损。如果通过稍微拧紧接头不能解决漏液的问题,就必须将接头取下,检查是否损坏(例如,卡套损坏、密封表面有杂质);损坏的接头应该更换掉。 1. 接头处漏液。 一般通过拧紧、清洗、更
高效液相色谱(HPLC)常见问题
1、HPLC灵敏度不够的主要原因及解决办法样品量不足:解决办法为增加样品量样品未从柱子中流出:可根据样品的化学性质改变流动相或柱子样品与检测器不匹配:根据样品化学性质调整波长或改换检测器检测器衰减太多:调整衰减即可。检测器时间常数太大:解决办法为降低时间参数检测器池窗污染:解决办法为清洗池窗。检测池
高压液相色谱(HPLC)系统组成(一)
HPLC系统一般由 输液泵、进样器、色谱柱、检测器、数据记录及处理装置 等组成。其中输液泵、色谱柱、检测器是关键部件。有的仪器还有梯度洗脱装置、在线脱气机、自动进样器、预柱或保护柱、柱温控制器等,现代HPLC仪还有微机控制系统,进行自动化仪器控制和数据处理。制备型HPLC仪还备有自动馏分收集装置
高效液相色谱(HPLC)常见问题
1、HPLC灵敏度不够的主要原因及解决办法 样品量不足:解决办法为增加样品量样品未从柱子中流出:可根据样品的化学性质改变流动相或柱子样品与检测器不匹配:根据样品化学性质调整波长或改换检测器检测器衰减太多:调整衰减即可。检测器时间常数太大:解决办法为降低时间参数检测器池窗污染:解决办法为清洗池窗。检测
高压液相色谱(HPLC)系统组成(二)
四、检测器 检测器是HPLC仪的三大关键部件之一。其作用是把洗脱液中组分的量转变为电信号。HPLC的检测器要求灵敏度高、噪音低(即对温度、流量等外界变化不敏感)、线性范围宽、重复性好和适用范围广。 1.分类 1)按原理可分为光学检测器(如紫外、荧光、示差折光、蒸发光散射)、热学检测器(如吸附
超纯水对液相(HPLC)实验影响
随着时代和科技的发展,液相等精密分析仪器已普及至与分析测试有关的行业,对实验水质要求也愈来愈高。现今液相(HPLC)都要求用户使用超纯水定出平坦而没有波峰的基线以保证分析测试的灵敏度,但有部分HPLC用户因资金或习惯等原因仍沿用瓶装饮用纯净水或蒸馏水进行实验,效果往往不很理想。 瓶
Thermo-Scientific-Syncronis-HPLC-液相色谱柱
开发新方法时,色谱工作者最重要的目标之一就是实现一致的、可重现的分离。为此,就需要选择重现性高的HPLC 色谱柱。 新一代Thermo Scientific Syncronis HPLC 色谱柱通过选用超纯硅胶、自动装填工艺、严格的检测和控制程序帮助色谱工作者达到满意的
高效液相(HPLC)流动相走干了怎么办
1.换上足量新的流动相或超纯水;2.拧开排气阀,开大流速进行排气,如果泵不能吸液,可以拧开出口单向阀的出口螺丝,直至有液体流出再拧紧(建议用注射器把溶剂过滤头到比例阀入口那段管路的气泡抽光,免得柱塞杆长时间干跑而损坏柱塞杆);3.把柱子换成双通,不接流通池,拧紧排气阀,开大流速把系统管路里的气泡冲走
高效液相(HPLC)流动相走干了怎么办
1.换上足量新的流动相或超纯水;2.拧开排气阀,开大流速进行排气,如果泵不能吸液,可以拧开出口单向阀的出口螺丝,直至有液体流出再拧紧(建议用注射器把溶剂过滤头到比例阀入口那段管路的气泡抽光,免得柱塞杆长时间干跑而损坏柱塞杆);3.把柱子换成双通,不接流通池,拧紧排气阀,开大流速把系统管路里的气泡冲走
高效液相(HPLC)流动相走干了怎么办
1.换上足量新的流动相或超纯水;2.拧开排气阀,开大流速进行排气,如果泵不能吸液,可以拧开出口单向阀的出口螺丝,直至有液体流出再拧紧(建议用注射器把溶剂过滤头到比例阀入口那段管路的气泡抽光,免得柱塞杆长时间干跑而损坏柱塞杆);3.把柱子换成双通,不接流通池,拧紧排气阀,开大流速把系统管路里的气泡冲走
高效液相(HPLC)流动相走干了怎么办
1、Dry Prime,呵呵,既然流动相都干了,那流路大概也干了进行dryprime的操作步骤如下1.轻轻振摇溶剂瓶中的过滤头以除去可能留存的气泡.2.在灌注排液阀出口插上一支注射器,然后打开排液阀(反时针旋转半圈).不要将注射器固定在排液阀上,而要用手将其贴紧阀的出口.3.选择DryPrime,然
高效液相(HPLC)流动相走干了怎么办
1.换上足量新的流动相或超纯水;2.拧开排气阀,开大流速进行排气,如果泵不能吸液,可以拧开出口单向阀的出口螺丝,直至有液体流出再拧紧(建议用注射器把溶剂过滤头到比例阀入口那段管路的气泡抽光,免得柱塞杆长时间干跑而损坏柱塞杆);3.把柱子换成双通,不接流通池,拧紧排气阀,开大流速把系统管路里的气泡冲走
高效液相(HPLC)流动相走干了怎么办?
1.换上足量新的流动相或超纯水;2.拧开排气阀,开大流速进行排气,如果泵不能吸液,可以拧开出口单向阀的出口螺丝,直至有液体流出再拧紧(建议用注射器把溶剂过滤头到比例阀入口那段管路的气泡抽光,免得柱塞杆长时间干跑而损坏柱塞杆);3.把柱子换成双通,不接流通池,拧紧排气阀,开大流速把系统管路里的气泡冲走
高效液相色谱(HPLC)流动相的性质要求
高效液相色谱(HPLC)流动相溶剂具有粘度低、与检测器相容性好、产品易得、毒性低等特点。选择填料(固定相)后,强溶剂对填料表面溶质的吸附降低,相应的容量因子K降低。然而,较弱的溶剂增加了溶质在填料表面的吸附,相应的容量因子k也增加了 因此,k值是流动相组成的函数 塔板数n通常与流动相的粘度成反比
超纯水对液相(HPLC)实验的影响
随着时代和科技的发展,液相等精密分析仪器已普及至与分析测试有关的行业,对实验水质要求也愈来愈高。现今液相(HPLC) 都要求用户使用超纯水定出平坦而没有波峰的基线以保证分析测试的灵敏度,但有部分HPLC用户因资金或习惯等原因仍沿用瓶装饮用纯净水或蒸馏水进行实验,效果往往不很理想。
高效液相色谱技术(HPLC)的技术原理
尽管二维凝胶电泳(2-DE)是常用的对全蛋白组的分析方法,但其存在分离能力有限、存在歧视效应、操作程序复杂等缺陷。对于分析动态范围大、低丰度以及疏水性蛋白质的研究往往很难得到满意的结果。Chong等使用HPLC/质谱比较分析恶性肿瘤前和癌症两种蛋白质差异表达。利用HPLC分离蛋白质,并用MALDI-
高效液相色谱技术(HPLC)的技术原理
尽管二维凝胶电泳(2-DE)是常用的对全蛋白组的分析方法,但其存在分离能力有限、存在歧视效应、操作程序复杂等缺陷。对于分析动态范围大、低丰度以及疏水性蛋白质的研究往往很难得到满意的结果。Chong 等使用HPLC/ 质谱比较分析恶性肿瘤前和癌症两种蛋白质差异表达。利用HPLC 分离蛋白质,并用MAL
简介高效液相色谱(HPLC)流动相的性质要求
(1)流动不会相应地改变填料的任何性质 低交联度离子交换树脂和排斥色谱填料有时会遇到一些有机相的膨胀或收缩,从而改变色谱柱填料床的性能。碱性流动相不能用于硅胶柱体系中,酸性流动相不能用于氧化铝、氧化镁等吸附柱体系中。 (3)必须与探测器配套。当使用紫外检测器时,所用的流动相在检测波长上不应吸收
超纯水对高效液相(HPLC)实验的影响
随着时代和科技的发展,高效液相等精密分析仪器已普及至与分析测试有关的行业,对实验水质要求也愈来愈高。现今高效液相(HPLC) 都要求用户使用超纯水定出平坦而没有波峰的基线以保证分析测试的灵敏度,但有部分HPLC用户因资金或习惯等原因仍沿用瓶装饮用纯净水或蒸馏水进行实验,效果往往不很理想。瓶装纯净
高效液相HPLC溶剂的选择及使用(二)
2、溶剂的处理和更换 液相色谱溶剂应尽量使用HPLC级溶剂。HPLC级试剂是用特殊方法生产的含有最少的微粒和最低的紫外吸收物质。水也应达到HPLC级。液相色谱实验室应配有纯水发生器。非色谱纯溶剂可通过蒸馏方法进行提纯,除掉大部分有紫外吸收的杂质。另外,用氧化铝或硅胶柱可除去极性强的化合物。
高压液相色谱HPLC发展概况、特点及分类
一、液相色谱理论发展简况色谱法的分离原理是:溶于流动相(mobilephase)中的各组分经过固定相时,由于与固定相(stationaryphase)发生作用(吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和)的大小、强弱不同,在固定相中滞留时间不同,从而先后从固定相中流出。又称为色层法、层析法。色谱法最早是由俄国
液相色谱HPLC检测器及检测限
在定义检测器灵敏度时,只考虑了样品响应信号的大小,并没有考虑检测器的噪声。当检测器噪声与响应信号大小相近时,两者就无法区分。而且对于某些检测器,其输出信号要经过放大后才能输出到记录仪。电子放大器几乎可以把一个信号放大到任意倍数,这样似乎可以任意提高检测器的灵敏度。其实不然,因为在放大信号时也同时放大
高效液相HPLC溶剂的选择及使用(一)
高效液相色谱法又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对
高效液相HPLC溶剂的选择及使用(三)
3、溶剂与检测器的匹配 在使用紫外可见光检测器时,需选用无紫外吸收特性的溶剂作流动相。样品测定波长应当在溶剂紫外吸收波长上限以上,噪声降至10-4 ~ 10-5AU,才能保证检测的灵敏度,才能用于梯度洗脱。流动相溶剂在整个梯度范围内互溶性要好,尽量减少溶剂折光指数对溶剂组成梯度的影响。溶剂