10分钟读懂转膜甲醇的作用
VDF膜一定要在纯甲醇里浸润的！不然蛋白结合不上去。 在100%甲醇里短暂浸润,其目的是为了活化PVDF膜上面的正电基团，使它更容易跟带负电的蛋白质结合。小分子及大分子量的蛋白转移时，多加或不加甲醇也是这个目的。因为小分子不容易和膜结合而大分子更容易。 转膜的过程，是一个恒定电场下，电荷转移的过程。这个过程中，蛋白的转移和电场强度以及自身电荷有关。你加入的甲醇主要是降低电导的作用。防止你的溶液过热。......阅读全文
转膜后为什么要电泳
、转膜后的mark非常歪的原因是胶、膜以及滤纸（三明治组合）之间气泡没赶干净导致的。2、而条带特别不清晰就得看你的转膜时间了：转膜时间不够会导致胶上的蛋白包括mark没有完全转到膜上，转膜时间长了会导致胶上的蛋白包括mark已经穿过膜到滤纸上了。建议电泳后胶进行考马斯亮蓝染色、转膜后的膜进行丽春红染
半干转膜仪如何使用
以WEALTEC的YRDIMES半干转膜仪为例，首先确认是转蛋白质还是核酸。蛋白质可参考Bjerrum and Schafer-Nielsen或Towbin或Dunn缓冲液系统配置缓冲液，电泳后将凝胶浸入缓冲液平衡5分钟，将转印膜和滤纸裁切并浸入缓冲液，合上上盖，按说明书垫上BP-C纸，普通转印1或
Western－不同转膜方法的取舍
转膜:小分子量的蛋白半干转效果比较好，大分子量（100KD）以上建议湿转。具体转膜条件需要多摸一下。30-80KD半干转恒流1mA/cm2，1-1.5h 都可以，大分子湿转100V，2.5h以上应该可以，转完膜丽春红染出的条带比较清楚的话，一般都能有结果。湿转，Buffer一定要预冷，最好提前一天配
RNA的电泳，转膜和杂交
实验原理：基本同 Southern Blotting，但因RNA 是单链分子，必须消除局部区域形成的二级结构，在电场中泳动的距离才能反映它本身的大小，因而需使用变性胶进行电泳；另应特别注意防止RNA 的降解。实验材料：经检测质量好的 RNA实验步骤：1．制胶：Agarose 1%-1.2% ， 1×
转膜实验原理与操作步骤
转膜是把DNA从琼脂糖凝胶中转移到固相支持物(一般是尼龙膜)上固定，是进行各种后续研究(如 RFLP 分析，阳性克隆的筛选验证等所有涉及分子杂交的研究)的前提。 实验目的： 掌握 Southern blotting 的原理及操作步骤 实验原理： 1. 转膜的方式： 向上的毛细管
westernblotting转膜是根据什么原理
western blot中封闭主要是起去除非特异性吸附的作用在western blot转膜时，PVDF膜在甲醇活化后是带电的，因而在转膜时会将蛋白吸附。封闭的目的就是要将PVDF膜上无蛋白的部分空隙用奶粉填满，以免孵抗体的时候一抗二抗与之结合，产生非特异条带或者是背景杂乱。所以western blo
转氨基的作用
大多数氨基酸在进行分解代谢之初，首先通过转氨基作用将α-氨基转移给α-酮戊二酸，使其形成谷氨酸和相应的α-酮酸（α-ketoacid）。转氨基作用是氨基酸在氨基转移酶(aminotransferase）或称转氨酶(transaminase）催化下，可逆地把α-氨基酸的氨基转移给α-酮戊二酸，使α-氨
WB－PVDF膜为什么要用甲醇泡
SDS-PAGE蛋白跑胶过的蛋白质带负电荷，用甲醇处理PVDF膜的目的是活化膜上的正电基团，这样其就更容易与带负电荷的蛋白质结合
western－blot转膜－膜上有白点点怎么回事
封闭的时候才出现的白点，是不是奶粉没有完全溶解啊。重新溶解下奶粉，然后用0.45或者0.21um的滤膜过滤一下，看情形能不能好转。另外还得根据结果来看，如果白点最后显影都变成黑点，奶粉没有溶解的可能性就比较大了。
western－blot－中甲醇作用
westernblot转膜不用甲醇可以蛋白质印迹法（免疫印迹试验）即westernblot。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息
western－blot－中甲醇作用
westernblot转膜不用甲醇可以蛋白质印迹法（免疫印迹试验）即westernblot。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息
转膜时间太长，小蛋白会不会从膜中穿过
影响因素应该有很多；一、首先需确定目的蛋白是否在胶上：跑完电泳可以先考马斯亮蓝染胶，如果在marker的指示下看到了目的蛋白的清晰条带，基本可以确定蛋白已经在胶上跑开。二、膜的准备：1.根据被转移的蛋白分子量大小，选择不同孔径的pvdf膜。因为随着膜孔径的不断减小，膜对低分子量蛋白的结合就越牢固。通
转膜时间太长，小蛋白会不会从膜中穿过
影响因素应该有很多；一、首先需确定目的蛋白是否在胶上：跑完电泳可以先考马斯亮蓝染胶，如果在marker的指示下看到了目的蛋白的清晰条带，基本可以确定蛋白已经在胶上跑开。二、膜的准备：1.根据被转移的蛋白分子量大小，选择不同孔径的pvdf膜。因为随着膜孔径的不断减小，膜对低分子量蛋白的结合就越牢固。通
转膜时间太长，小蛋白会不会从膜中穿过
影响因素应该有很多；一、首先需确定目的蛋白是否在胶上：跑完电泳可以先考马斯亮蓝染胶，如果在marker的指示下看到了目的蛋白的清晰条带，基本可以确定蛋白已经在胶上跑开。二、膜的准备：1.根据被转移的蛋白分子量大小，选择不同孔径的pvdf膜。因为随着膜孔径的不断减小，膜对低分子量蛋白的结合就越牢固。通
western－blot－的转膜缓冲液
目的是为了消除电荷对电泳的影响，western各步骤的缓冲液基本上都是要加的。
western－blotting转膜是根据什么原理
原理：westernblotting转膜一般采用“滤纸-凝胶-膜-滤纸”夹心法，凝胶靠近负极，膜靠近正极。因为蛋白上结合有sds，因而带负电，在电流的作用下会从负极向正极运动，从而转移到膜上。
RNA样品的转膜（虹吸印迹法）
实验概要本实验介绍了RNA样品的转膜（即虹吸印迹法）的操作步骤等。主要试剂1. 20×SSC：175.3g NaCl，88.2g柠檬酸钠，DEPC水定容1000ml NaOH调pH至7.0，高压后备用。 2. 6×SSC：用20×SSC稀释。主要设备1. 紫
关于Southern杂交的转膜的介绍
即将凝胶中的单链DNA片段转移到固相支持物上。而此过程最重要的是保持各DNA片段的相对位置不变。DNA是沿与凝胶平面垂直的方向移出并转移到膜上，因此，凝胶中的DNA片段虽然在碱变性过程已经变性成单链并已断裂，转移后各个DNA片段在膜上的相对位置与在凝胶中的相对位置仍然一样，故而称为印迹（blot
western－blotting转膜是根据什么原理
原理：westernblotting转膜一般采用“滤纸-凝胶-膜-滤纸”夹心法，凝胶靠近负极，膜靠近正极。因为蛋白上结合有sds，因而带负电，在电流的作用下会从负极向正极运动，从而转移到膜上。
western转膜后marker拖尾原因
western转膜有时候marker深，有时候浅是很正常的事情因为不同批次转膜的时候，电压电流缓冲液温度等等条件不可能完全保持一致，在各种条件变化的情况下，很容易造成批次间的差异，具体表现就是有时候marker深，有时候浅所以western转膜有时候marker深，有时候浅是很正常的事情
石墨炔膜材料可实现甲醇零渗透
直接甲醇燃料电池被认为是最有前途的清洁高效能源电池之一，其中，质子交换膜是影响直接甲醇燃料电池能量效率、功率密度等的核心部件。近日，香港科技大学教授赵天寿课题组发现新型二维碳纳米材料石墨炔是较为理想的质子交换膜材料，具备高选择性和高导电性，能有效阻隔甲醇燃料的渗透。相关成果发表于《自然—通讯》上
PVDF膜用前要用100％甲醇润湿吗
用甲醇活化不能超过15秒，时间太久会对pvdf膜造成损伤。找一个平皿，倒入一定体积的纯甲醇，用镊子夹着膜边角在纯甲醇里漂一下，见到膜由不透明变为均一的半透明，大概需要5秒左右即可。然后立即向平皿中加入不含甲醇的转膜液，使甲醇的终浓度在20％，将凝胶和膜以及滤纸在其中平衡30min左右即可转膜，在整个
PVDF膜用前要用100％甲醇润湿吗
用甲醇活化不能超过15秒，时间太久会对pvdf膜造成损伤。找一个平皿，倒入一定体积的纯甲醇，用镊子夹着膜边角在纯甲醇里漂一下，见到膜由不透明变为均一的半透明，大概需要5秒左右即可。然后立即向平皿中加入不含甲醇的转膜液，使甲醇的终浓度在20％，将凝胶和膜以及滤纸在其中平衡30min左右即可转膜，在整个
PVDF膜活化处理完后不转膜能保存吗
PVDF膜即聚偏二氟乙烯膜（polyvinylidene fluoride）是蛋白质印迹法中常用的一种固相支持物。PVDF膜是疏水性的，膜孔径有大有小，随着膜孔径的不断减小，膜对低分子量的蛋白结合就越牢固。大于20000的蛋白选用0.45um的膜，小于20000的蛋白选用0.2um的膜。PVDF膜在
Western－Blot转膜时胶和膜放反了有影响吗
那蛋白就都转到滤纸上去了，没有到膜上。你找点丽春红染染膜看看，估计膜上什么也没有哇。不用往下做了。当然，如果你在膜上看到预染Marker了，还是值得再去尝试一下的。
PVDF膜活化处理完后不转膜能保存吗
PVDF膜即聚偏二氟乙烯膜（polyvinylidene fluoride）是蛋白质印迹法中常用的一种固相支持物。PVDF膜是疏水性的，膜孔径有大有小，随着膜孔径的不断减小，膜对低分子量的蛋白结合就越牢固。大于20000的蛋白选用0.45um的膜，小于20000的蛋白选用0.2um的膜。PVDF膜在
170KD蛋白转膜用多大电压
电流通过导体（或用电器）的时候，会受到一定的阻力，但在电压的作用下，电流能够克服这种阻力顺利通过导体（或用电器），但遗憾的是，流过串联电阻（或用电器）后，电位（电势）再也没有以前那么高了，它的电位（电势）下降了。而且电阻越大，它两端电位（电势）的变化就越大。所以，把电流流过电阻（或用电器）时，在电阻
请教western转膜封闭后怎么办
western blot中封闭主要是起去除非特异性吸附的作用在western blot转膜时，PVDF膜在甲醇活化后是带电的，因而在转膜时会将蛋白吸附。封闭的目的就是要将PVDF膜上无蛋白的部分空隙用奶粉填满，以免孵抗体的时候一抗二抗与之结合，产生非特异条带或者是背景杂乱。所以western blo
western－blot转膜是怎么做的
蛋白免疫印迹( Western Blot) 是将电泳分离后的细胞或组织总蛋白质从凝胶转移到固相支持物NC膜或PVDF 膜上。目前主流方法是电转印法，分为湿式转印与半干转印。湿式转印是将胶块垂直方向夹在湿式转印槽内进行电转印。以E-Blotter湿转槽为例，一般使用垂直电泳槽的缓冲液槽体，将内部垂直电
转硫酸基作用的概念
中文名称转硫酸基作用英文名称transsulfation定 义从3′-磷酸腺苷-5′-磷酰硫酸中将硫酸基转移到各种结合底物上的过程。如芳香族酚类或类固醇化合物的硫酸化，或糖类、蛋白质的硫酸化。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），新陈代谢（二级学科）