RNA的电泳，转膜和杂交
实验原理：基本同 Southern Blotting，但因RNA 是单链分子，必须消除局部区域形成的二级结构，在电场中泳动的距离才能反映它本身的大小，因而需使用变性胶进行电泳；另应特别注意防止RNA 的降解。实验材料：经检测质量好的 RNA实验步骤：1．制胶：Agarose 1%-1.2% ， 1×MOPS buffer 。用灭菌的 DEPC 水定容，加热融化，冷却至 70℃ 加甲醛，使终浓度为 2% ，通风橱中放 1hr 。2．准备电泳液： 1×MOPS buffer （小号槽约配 500ml ，中号槽约配 900ml ）3．制样：测好浓度后按以下体系加样 :15μg RNA+ 灭菌的 DEPC 水 10ulSample buffer 8ulloading buffer 2ulEB (10mg/ml, 专用于 RNA) 0.03ul65℃ 水浴变性 10min ，立即放冰上，直至点样4．点样：点样要仔细，不要漏出，并记住点样顺......阅读全文
RNA的电泳，转膜和杂交
实验原理：基本同 Southern Blotting，但因RNA 是单链分子，必须消除局部区域形成的二级结构，在电场中泳动的距离才能反映它本身的大小，因而需使用变性胶进行电泳；另应特别注意防止RNA 的降解。实验材料：经检测质量好的 RNA实验步骤：1．制胶：Agarose 1%-1.2% ， 1×
电泳、转膜
转膜是把DNA从琼脂糖凝胶中转移到固相支持物（一般是尼龙膜）上固定，是进行各种后续研究（如RFLP分析，阳性克隆的筛选验证等所有涉及分子杂交的研究）的前提。实验目的：掌握Southern blotting的原理及操作步骤。实验原理：1. 转膜的方式： 向上的毛细管转移 向下的毛细管转移 同时向
电泳、转膜概述
转膜是把DNA 从琼脂糖凝胶中转移到固相支持物（一般是尼龙膜）上固定，是进行各种后续研究（如 RFLP 分析，阳性克隆的筛选验证等所有涉及分子杂交的研究）的前提。实验目的：掌握 Southern blotting 的原理及操作步骤实验原理：1．转膜的方式：向上的毛细管转移向下的毛细管转移同时向两张膜
关于Southern杂交的转膜的介绍
即将凝胶中的单链DNA片段转移到固相支持物上。而此过程最重要的是保持各DNA片段的相对位置不变。DNA是沿与凝胶平面垂直的方向移出并转移到膜上，因此，凝胶中的DNA片段虽然在碱变性过程已经变性成单链并已断裂，转移后各个DNA片段在膜上的相对位置与在凝胶中的相对位置仍然一样，故而称为印迹（blot
做western转膜，用湿转电泳，还是半干转电泳好
半干转要用专门的半干转膜仪，而湿转用电泳仪配附件即可；半干转所需时间较短，但控制不好，中间发热比较大容易把膜和胶烘坏；而湿转耗时较长，尤其对大分子量的蛋白转膜效果较好。相对来讲，还是湿法转膜的实验室多一些。
RNA样品的转膜（虹吸印迹法）
实验概要本实验介绍了RNA样品的转膜（即虹吸印迹法）的操作步骤等。主要试剂1. 20×SSC：175.3g NaCl，88.2g柠檬酸钠，DEPC水定容1000ml NaOH调pH至7.0，高压后备用。 2. 6×SSC：用20×SSC稀释。主要设备1. 紫
杂交膜转印膜*纤维素膜NC膜与PVDF膜的区别
1. *纤维素膜*纤维素膜是蛋白印迹广泛使用的转移介质，对蛋白有很强的结合能力，而且适用于各种显色方法，包括同位素，化学发光(Luminol类)、常规显色、染色和荧光显色；背景低，信噪比高。NC膜的使用也很简便，比如不需要甲醛预处理，只要在无离子水面浸润排出膜内气泡，再在电泳缓冲液中平衡几分钟就可以
转膜后为什么要电泳
、转膜后的mark非常歪的原因是胶、膜以及滤纸（三明治组合）之间气泡没赶干净导致的。2、而条带特别不清晰就得看你的转膜时间了：转膜时间不够会导致胶上的蛋白包括mark没有完全转到膜上，转膜时间长了会导致胶上的蛋白包括mark已经穿过膜到滤纸上了。建议电泳后胶进行考马斯亮蓝染色、转膜后的膜进行丽春红染
western－blot－电泳液和转膜缓冲液的配方
5*SDS-PAGE电泳缓冲液 0.125M tris 15.1g, 1.25M glycine 94g,0.5% SDS 5.0g,加入800ml去离子水，搅拌溶解。加去离子水将溶液定容至1L后，室温保存。用的时候稀释成1*的就可以了。转膜缓冲液的配制方法：39mM glycine 2.9g,48
纯化的RNA的点杂交和狭线杂交
实验方法原理 点杂交和狭线杂交技术（Kafatos et al. 1979) 用于在同一固相支持物（通常为带电荷的尼龙膜）上固定几种核酸样品，然后用合适的探针与已固定的样品杂交，并由此判断靶序列的浓度。通过估计样品点发射出 的信号的强度，与已知浓度的标准品信号强度 进行比较，确定待测样品中靶
纯化的RNA的点杂交和狭线杂交
点杂交和狭线杂交技术（Kafatos et al. 1979) 用于在同一固相支持物（通常为带电荷的尼龙膜）上固定几种核酸样品，然后用合适的探针与已固定的样品杂交，并由此判断靶序列的浓度。通过估计样品点发射出的信号的强度，与已知浓度的标准品信号强度 进行比较，确定待测样品中靶序列的量。本实验来源「分
纯化的RNA的点杂交和狭线杂交
实验方法原理 点杂交和狭线杂交技术（Kafatos et al. 1979) 用于在同一固相支持物（通常为带电荷的尼龙膜）上固定几种核酸样品，然后用合适的探针与已固定的样品杂交，并由此判断靶序列的浓度。通过估计样品点发射出 的信号的强
western转膜时间和电流
300mA90分钟,我们是1.0的胶厚度,要是0.75也行,但1.5mm的厚胶要时间长一些,另外你做的蛋白如果超过100kd建议时间更长一些,若是小蛋白就减少转模时间,立春红确定最适时间
Northern印迹和总RNA杂交实验
Northern印迹分析杂交和放射自显影试剂、试剂盒甲醛凝胶溶液 RNA 电泳缓冲液
Northern印迹和总RNA杂交实验
试剂、试剂盒 甲醛凝胶溶液RNA 电泳缓冲液仪器、耗材 凝胶模梳齿凝胶用具实验步骤 1. 用肥皂和水彻底清洗凝胶模，梳齿和凝胶用具。2. 准备甲醛凝胶溶液。甲醛凝胶溶液（300 ml 1％ 琼脂糖凝胶）：琼脂糖，3.0 g10x RNA 电泳缓冲液，30 ml Milli-Q 或用玻璃器皿蒸
Northern印迹和总RNA杂交实验
Northern印迹分析 杂交和放射自显影 试剂、试剂盒 甲醛凝胶溶液 RNA 电泳缓冲液
Northern印迹和总RNA杂交实验——杂交和放射自显影
实验材料mRNA试剂、试剂盒甲酰胺SSPEDenhardt 试剂SDS仪器、耗材滤膜实验步骤1. 滤膜进行 1~2 小时预杂交。在 42℃：50% 甲酰胺5x SSPE2 x Denhardt 试剂0.1% SDS或者在 68℃：6x SSC2x Denhardt 试剂0.1% SDS2. 把已变性
RNA点杂交
RNA点杂交1） 纯化的RNA的点杂交和狭线杂交安装印迹装置1．切一张合适大小的带正电荷尼龙膜。用铅笔标上表示方向的记号。用水把膜简单弄湿，在20×SSC中室温泡1 h。2．在膜浸泡期间，先用0.1 mol/L NaOH小心清洗印迹装置，再用无菌水洗干净。3．把两片厚滤纸用20×SSC浸湿，再放到
RNA点线杂交
RNA点线杂交（Dot and Slot blotting）· RNA dot blot and slot blot (Beverly Faulkner-Jones)This methods allows the rapid analysis of numerous small sa
RNA点杂交
1） 纯化的RNA的点杂交和狭线杂交安装印迹装置1．切一张合适大小的带正电荷尼龙膜。用铅笔标上表示方向的记号。用水把膜简单弄湿，在20×SSC中室温泡1 h。2．在膜浸泡期间，先用0.1 mol/L NaOH小心清洗印迹装置，再用无菌水洗干净。3．把两片厚滤纸用20×SSC浸湿，再放到真空器顶部。4
电泳和Western转印的常见问题
表1 Common problems for electrophoresis and western bloting问 题可能原因建议解决方法推荐电压条件下电泳时间过长。电泳缓冲液过稀。配制新鲜缓冲液，使用1X稀释液。推荐电压条件下电流过高，热量过大。电泳缓冲液过稀。配制新鲜缓冲液，使用1X稀释液。
膜电泳的定义和应用介绍
中文名称膜电泳英文名称membrane electrophoresis定 义以膜性物质作为支持介质的电泳技术。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），方法与技术（二级学科）
Western转膜步骤
下面的步骤适用于通过Xcell Ⅱ转印系统进行蛋白印记的大部分应用。为达到最佳效果，用户的优化是必要的。I. 所需材料：•Xcell SureLock™或Xcell Ⅱ™ Mini-Cell以及Blot Module（Cat. Nos. EI10001, EI9001及EI9051）•电泳后的迷你胶
Southern转膜方法
Southern转膜方法（毛细管虹吸印迹法、电转移法与真空转移法）将凝胶中的DNA进行碱变性并将pH值恢复至中性后，即可将凝胶中的DNA片段转移到固相支持物上。用于转膜的固相支持物有多种，包括硝酸纤维素滤膜(NCM)、尼龙膜、化学活性膜和滤纸等，Southern转膜时可根据需要选择不同的固相支持物用
在原位杂交中－为什么rna可以和dna杂交
因为碱基互补配对啊。RNA不光和DNA杂交，还可以和RNA杂交。RNA原位核酸杂交又称RNA原位杂交组织化学或RNA原位杂交。该技术是指运用cRNA或寡核苷酸等探针检测细胞和组织内RNA表达的一种原位杂交技术。其基本原理是：在细胞或组织结构保持不变的条件下，用标记的已知的RNA核苷酸片段，按核酸杂交
RNA电泳
RNA Gel (Crawford Lab)Gel Electrophoresis of RNA (Beverly Faulkner-Jones)great tips on RNA gel electrophoresis.Northern Gel and TransferUsing glyoxal
RNA－电泳
①电泳RNA 所用器械如制胶的模具、梳子、电泳槽等用肥皂粉洗干净后用双蒸水冲洗二遍后在室温晾干备用。②用新的1XTBE 配制1. 2 %琼脂糖凝胶,倒胶时溴化乙锭(E直接加入凝胶中。③制备好的琼脂糖凝胶板放入电泳槽后再加入经高压灭菌过的1XTBE ,液面只能刚好同胶面平齐,缓冲液不要淹过胶面。④点样
RNA电泳
· RNA Gel (Crawford Lab)· Gel Electrophoresis of RNA (Beverly Faulkner-Jones)great tips on RNA gel electrophoresis. · Northern
RNA的斑点杂交
实验概要本实验介绍了RNA的斑点杂交操作流程及注意事项。主要试剂1. 预杂交液：5×SSC，2×Denhardt液(或采用试剂盒的相应试剂)，0.02%(W/V) SDS2. 杂交液DIG Easy Hyb3. 含0.1%SDS 2×SSC和含0.1%SDS 0.1×SSC主要设备杂交袋实验步骤1.
Multiple－Tissue－Northern－(MTN#8482;)Blots
人、小鼠和大鼠的多种组织来源的高质量mRNA,经电泳分离后预转于尼龙膜上预制的即用型Northern杂交膜，免去RNA电泳操作过程可检测范围：0.5-10kb可重复使用提供ExpressHybTM快速杂交液样品可靠的优良品质从1991年始，公司就向广大的生命科学研究者提供高质量的预制杂交膜。而MTN