Nature|胚胎干细胞悬浮培养首次构建体外类囊胚
哺乳动物的发育起源于受精卵,受精卵通过分裂,经历了2-cell、4-cell、8-cell、桑葚胚(Morula)再到囊胚(Blastocyst)阶段,称之为着床前胚胎(pre-implantation)。随后胚胎植入子宫壁,诱导子宫内膜蜕膜化(decidualization)预示着成功着床(implantation)。着床后胚胎通过原肠作用形成外胚层/内胚层和中胚层,不同胚层细胞相互作用,为胚胎形成结构复杂的器官奠定基础。 复杂的生命历程有着复杂的分子调节机制,为了研究这些复杂的科学问题, 科研人员研发了 体外培养体系 。类器官(Organoids)的出现,为研究器官形成和人类疾病发生等问题,打开了新的篇章。目前,类器官模型已经成功应用于许多器官模型的建立,如脑、肝、肾等。类器官模型在研究疾病发生和药物筛选方面发挥着重要的作用。 人工培育胚胎作为胚胎研究的类器官一直受到科学家的广泛关注:2016年,研究人员成功......阅读全文
基因敲除技术原理和方法
1.利用基因同源重组进行基因敲除基因敲除是80年代后半期应用DNA同源重组原理发展起来的。80年代初,胚胎干细胞(ES细胞)分离和体外培养的成功奠定了基因敲除的技术基础。1985年,首次证实的哺乳动物细胞中同源重组的存在奠定了基因敲除的理论基础。到1987年,Thompsson首次建立了完整的ES细
建立了将体细胞诱导为无异源人EPS细胞的重编程诱导方法
2021年5月21日,生命科学学院邓宏魁研究组在Nature Communications杂志上发表了题为“Chemically Defined and Xeno-free Culture Condition for Human Extended Pluripotent Stem Cells”的
研究人员报告说从人类卵细胞成功培养胚胎干细胞
6日出版的新一期英国《自然》杂志刊登报告说,美国研究人员用人类卵细胞培养出了胚胎干细胞,虽然这项成果还存在一些缺陷,但已是“黄禹锡造假事件”后最接近培养出正常人类胚胎干细胞的成果。这一成果可能引起有关克隆问题的新一轮大争论。 将体细胞中的遗传物质植入卵细胞中,将其培育
关于胚胎干细胞的研究进展—牛ES细胞的介绍
Saito等在加有LIF的培养基中对牛ICM进行培养,分离得到牛ES细胞并进行传代。Sims等使用与一般ES细胞分离完全不同的低密度培养法,使用BRL(buffalo rat liver)条件培养基并添加亚硒酸钠、胰岛素、运铁蛋白和50 mL/L胎牛血清,培养6 d~10 d,得到15个ES细胞
5L摇瓶细胞培养瓶适用于悬浮培养/培养基制备或储存
HUICH大容量摇瓶特点:1、瓶身采用医用聚碳酸酯(PC)材质,符合ISO10993 USP要求,透明度高,抗冲击力强,抗氧化、可耐高温121℃。2、外观刻度清晰、准确、便于观察培养基容量。3、5L摇瓶把手设计方便拎取,把手颈圈与瓶身贴合度高防止打滑;口部防挂液设计易于倾倒;底部四周平整,于摇床黏板
关于胚胎干细胞的研究进展—兔ES细胞的介绍
Graves K H等从兔子附植前囊胚分离得到ES细胞,并进行了初步鉴定,证明它们具有在饲养层上保持未分化状态的增殖能力,体外传代培养1年以上,仍具有正常的核型,且能形成包含三胚层分化物的胚体。之后,Niemann等以PMEF为饲养层,建立了9个兔ES细胞系。Schoonjans L等将兔ES细
《Nature-Genetics》染色体外DNA会改变癌基因扩增水平
恶性胶质瘤(glioblastoma,GBM)是最常见且最具攻击性的脑癌,标准治疗反应很差,两年生存率仅为15%。最近,《Nature Genetics》的一篇文章发现了GBM肿瘤耐药的一个关键密码。 为了靶向遏制GBM的攻击性,杰克逊实验室(Jackson Laboratory,JAX)教授
悬浮生长的细胞如何进行传代培养
先将细胞直接倒入50毫升或者量少的话15毫升移液管中,离心800rpm5min弃上清,用PBS清晰两次(每次加PBS后将细胞打匀,离心,弃上清,重复两次)然后加培养基,计数,培养
简介悬浮培养的细胞与毒株的驯化与保藏
为提高生物制品的产率和安伞有效性,在生物反应器中繁殖的病毒与细胞需要进行相互适应选择,针对不同的毒株及其表达量筛选适合的宿主细胞对于细胞大规模生产具有重要意义。 细胞的筛选驯化和保藏 实现悬浮培养首先需要选择合适的宿主细胞,细胞系的特征直接影响放大的可能性以及放大技术的选择。同一种细胞在悬浮
杆状病毒储液制备实验——从悬浮培养中制备
实验材料悬浮培养的 Sf 9 细胞待接种的杆状病毒(野生型的或重组)试剂、试剂盒含10%胎牛血清的昆虫细胞培养液 TNM-FH仪器、耗材150 mm 培养瓶27℃ 培养箱倒置显微镜带有 GH-3.7 水平转子的4℃GPR离心机带螺口盖的冻存管液氮罐500 ml 旋转细胞培养瓶多转瓶的揽拌台实验步骤1
悬浮细胞培养技术在兽用疫苗领域的应用
细胞悬浮培养是利用生物反应器大规模培养动物细胞生产生物制品的核心技术,是当前国际上生物制品生产的主流模式,其最大优势是通过更为精确有效的工艺控制手段,在获得最大产量的同时能稳步提高产品的质量。但该技术目前在国内尚未得到广泛应用,生物制品生产仍主要采用病毒产率低、生产成本高、劳动强度大的转瓶细胞培养方
生物反应器悬浮培养关键技术有哪些
一、生物反应器在生物制药中的应用及现状 21世纪初,随着流加培养、灌流培养、基因工程等技术的发展,作为大规模培养主要设备的生物反应器规模也趋向大型化和自动化。当前生物制药的主流技术是在大型机械搅拌式反应器中,用无血清培养基和灌流工艺悬浮培养细胞进行生产。 生物反应器大规模培养在生物制药领域快
Nature:干细胞领域里程碑成果“大盘点”
那是2011年秋季再寻常不过的一天,Madeline Lancaster忽然意识到自己培养出了一个大脑。在此之前的几个星期,她一直试图让人胚胎干细胞分化为玫瑰花环(rosettes)结构的神经干细胞。但她的细胞就是不肯贴上培养皿,发而形成了奇怪的乳白色球体。Lancaster经过仔细分析才发现,
克隆技术的应用前景
克隆技术已展示出广阔的应用前景,概括起来大致有以下四个方面: (1)培育优良畜种和生产实验动物; (2)生产转基因动物; (3)生产 人胚胎干细胞用于细胞和组织替代疗法; (4)复制濒危的动物物种,保存和传播动物物种资源。 以下就生产 转基因动物和胚胎干细胞作简要说明。 转基因动物研
健康所在解决胚胎干细胞移植治疗的成瘤性方面取得突破
胚胎干细胞具有体外培养无限增殖、自我更新和多向分化的特性。无论在体外还是体内环境,胚胎干细胞都能被诱导分化为几乎所有的细胞类型。因此,胚胎干细胞是细胞移植治疗中非常重要的细胞来源。但是,胚胎干细胞治疗存在一个非常大的问题,即成瘤风险,移植细胞中存在的未分化的胚胎干细胞会在被移植体内成瘤
结缔组织类细胞培养
一、成纤维细胞培养用人或动物胚体为好;动物可用小鼠或鸡胚,去头和内脏,剪成小碎块后,用胰蛋白酶消化法培养;如为人胚,可取皮肤培养。幼儿包皮是培养成纤维细胞的很好对象。二、巨噬细胞培养1.实验前三天,向每只小鼠腹腔内注入无菌硫羟乙酸肉汤1ml(勿注入肠内)。2.引颈杀死动物,手提鼠尾将全鼠浸入70%酒
类鼻疽假单胞菌的培养
在血平板上经24小时培养呈细小菌落,48小时后菌落增大至中等大小,灰黄色,外形似车轮状或菊花样。菌落周围呈半溶血状态。在液体培养中,初为混浊生长,后形成皱褶菌膜。在麦康凯平板上为分解乳糖的红色菌落;在SS平板上生长不良;在含2%和3%NaCl营养琼脂平板上不生长。所有生长菌落的平板均有浓烈的异味
类器官培养的起始细胞来源
类器官培养的起始细胞群一般从成人或胎儿组织活检样本中获得,肿瘤组织也可类似处理以分离肿瘤细胞来培养类器官。此外,从外周血、腹水和胸腔积液等液体样本中分离的肿瘤细胞也可作为起始材料。对于肿瘤衍生类器官,需要解决癌细胞和正常细胞共存的问题,可利用培养条件,通过使用选择性培养基来实现。
类器官的概念和培养方式
什么是类器官类器官(Organoids)是一种在体外培养条件下,由干细胞或祖细胞分化形成的具有三维结构并且能够部分模拟真实器官的细胞集合体。类器官的培养过程类器官的培养通常起始于干细胞,如多能干细胞(包括胚胎干细胞和诱导多能干细胞)或成体干细胞。将这些干细胞放置在含有特定生长因子、细胞外基质成分以及
“一个能真实还原癌症转移过程的体外模型”被构建
癌症转移是导致患者长期生存率下降的主要原因,构建一个能真实还原癌症转移过程的体外模型,是该领域的研究难点。传统的动物模型和二维细胞模型在研究模拟癌症转移上仍存在明显局限。类组装体是一种由多种细胞类型生成的具有空间结构的复杂类器官系统,为模拟癌症转移提供了新路径,其现有构建方法存在选择性差、毒性高等问
胚胎“体检”狙击遗传肿瘤-10年诞生百名“无癌宝宝”
11月1日,在长沙举行的第五届湖南省抗癌协会家族遗传性肿瘤专业委员会学术年会上,中信湘雅生殖与遗传专科医院(下称中信湘雅)首席科学家卢光琇宣布,该院第100位通过胚胎植入前遗传学检测(PGT)技术阻断遗传性肿瘤基因的宝宝已健康出生,目前各项指标良好。10年,100例,这标志着我国在遗传性肿瘤防治领域
Cell:科学家首次利用核移植生成人类胚胎干细胞
体细胞核转移(Somatic cell nuclear transfer,SCNT)是一种将供体细胞的细胞核移植到已去除细胞核的卵细胞中去的重要技术,利用这种技术,科学家们能获得与供体细胞遗传相匹配的胚胎。 5月来自美国俄勒冈健康与科学大学的研究人员第一次利用核移植技术生成了人类胚胎干
最新研究打开了人类胚胎早期发育的“黑匣子”
临床上,大约30%~40%的情况下,胚胎会出现无法着床或正常发育的现象,部分原因来自胚胎,然而具体机制尚不清晰。阐明胚胎从着床开始的早期发育情况,对不孕症的干预、试管婴儿技术成功率的提升至关重要。 然而人类胚胎在植入子宫后的早期发育情况,由于伦理和技术的限制而长期处于“黑匣子”般的状态。 1
西北高原所等鉴定出调控绵羊卵母细胞及早期胚胎发育的关键代谢物
体外胚胎生产是现代繁殖技术的核心组成部分。近年来,结合活体采卵,体外胚胎生产快速推广,成为家畜遗传改良和良种扩繁的重要手段之一。然而,体外培养体系不完善,因而体外生产胚胎的质量低于体内生产胚。有研究发现,建立高效的胚胎培养体系存在两个制约因素。一是关于卵母细胞成熟和胚胎发育过程中代谢和代谢基因表达缺
西北高原所等鉴定出调控绵羊卵母细胞及早期胚胎发育的关键代谢物
体外胚胎生产是现代繁殖技术的核心组成部分。近年来,结合活体采卵,体外胚胎生产快速推广,成为家畜遗传改良和良种扩繁的重要手段之一。然而,体外培养体系不完善,因而体外生产胚胎的质量低于体内生产胚。有研究发现,建立高效的胚胎培养体系存在两个制约因素。一是关于卵母细胞成熟和胚胎发育过程中代谢和代谢基因表
科学家用干细胞制出人猪嵌合体胚胎
科学家将人类细胞注入猪囊胚。近日,美国索尔克生物研究所科学家首次成功培育出人猪嵌合体胚胎,。人与动物嵌合体胚胎将能帮助模拟认识许多人类遗传疾病的早期起病过程,并实施药物测试。目前,新人猪嵌合体正帮助科学家了解人类干细胞的生长和分化。该研究的最终目标是在动物体内培育出可供移植的人类细胞、组织和器官。但
Nature:科学家再构建蛋白质-“遗传图谱”
6月6日,《自然》杂志发表了一项由剑桥大学和默沙东的科学家领导完成的重要成果:他们成功创建出人类蛋白质的第一个详细遗传图谱。这一突破性研究有望增进我们对各种疾病的了解,并有助于新药的开发。 DOI: 10.1038/s41586-018-0175-2 这项研究描述了人类血浆“蛋白质组
Nature:科学家再构建蛋白质-“遗传图谱”
6月6日,《自然》杂志发表了一项由剑桥大学和默沙东的科学家领导完成的重要成果:他们成功创建出人类蛋白质的第一个详细遗传图谱。这一突破性研究有望增进我们对各种疾病的了解,并有助于新药的开发。 DOI: 10.1038/s41586-018-0175-2 这项研究描述了人类血浆“蛋
Nature:用二维码构建“DNA编码库”
麻省沃尔瑟姆市(Waltham, Massachusetts)的一座钢筋混泥土建筑的二楼,一个实验室冰箱里的塑料盒中,包含着无数种化学分子。这些分子是葛兰素史克制药公司(GlaxoSmithKline,GSK)合成的带DNA标签的分子,数目达到万亿种——这是银河系恒星数目的10倍。 各大制药公
Nature:科学家再构建蛋白质-“遗传图谱”
《自然》杂志发表了一项由剑桥大学和默沙东的科学家领导完成的重要成果:他们成功创建出人类蛋白质的第一个详细遗传图谱。这一突破性研究有望增进我们对各种疾病的了解,并有助于新药的开发。 DOI: 10.1038/s41586-018-0175-2 这项研究描述了人类血浆“蛋白质组”(pro