体外哺乳类细胞基因突变(HGPRT)试验原理及注意事项1

In vitro Mammalian Cell Gene Mutation Test【试验原理】体外哺乳动物细胞基因突变试验是利用培养的哺乳动物细胞作指示生物的体外遗传毒理学试验,可用于检测有化学物质诱导的基因突变,适用的细胞系包括小鼠淋巴瘤细胞(L5178Y),中国仓鼠肺细胞(V79),中国仓鼠卵巢细胞(CHO),人类淋巴母细胞(TK6)等。这些细胞系,最常用的遗传学终点是检测胸苷激酶(TK)图标,次黄嘌呤鸟嘌呤转磷酸核糖激酶(HPRT/HGPRT)图标,黄嘌呤转磷酸核糖激酶(XPRT)基因突变。TK、HPRT/HGPRT、XPRT突变试验可以检测不同的遗传事件谱。细胞在正常情况下,能产生HGPRT(次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶),在含有6-硫代鸟嘌呤(6-thioguanine,6-TG)的选择性培养液中,HGPRT催化产生核苷-5,-单磷酸(NMP),NMP掺入DNA中致细胞死亡。在致癌和(或)致突变物作用下,某些细胞X染......阅读全文

VogesProskauer(VP)-试验的原理及注意事项

一、试验原理细菌在葡萄糖代谢中生成丙酮酸,从丙酮酸开始,随细菌种类不同而有多种分解途径,有的使丙酮酸进一步分解,生成甲酸、乙酸、乳酸等终产物,有的可以使丙酮酸脱羧变为中性最终产物乙酰甲基甲醇(Acetylmethyl carbinol),亦称 3-羧基丁酮(Acetoin)。本试验即为检查某些细

体外诊断设备环境试验要求

  体外诊断设备一般在其说明书或者标签中对其使用环境条件进行了限定,因此无论境内产品还是进口产品,申请产品注册的体外诊断设备和已批准产品的使用环境条件有变化提出变更或者说明书更改告知时,均需提交产品进行环境试验的相关验证资料,以证明申报产品在其声称环境条件下的安全性和有效性。  1.申报产品具有适用

体外异种授精实验的注意事项及检查过程

  注意事项  不合宜人群:暂时未明。  检查前禁忌:  (1) 留精液前,病人应停止性交4-7天。检查前1周不能用丙酸睾丸酮、苯乙酸睾丸酮、苯丙酸诺龙。检查前1个月内应停止饮酒,这点必须做到。  (2) 采取精液时,可用软皂或石蜡油做阴茎按摩,将标本收集在无菌的试管中;也可用避孕套(冲洗干净,不含

体外异种授精实验的临床意义及注意事项

  临床意义  异常结果:根据体外异种授精实验可估计精子的受精能力,判断男子生育力。  需要检查的人群:男性不育者。  注意事项  不合宜人群:暂时未明。  检查前禁忌:  (1) 留精液前,病人应停止性交4-7天。检查前1周不能用丙酸睾丸酮、苯乙酸睾丸酮、苯丙酸诺龙。检查前1个月内应停止饮酒,这点

溶血试验的原理及试验方法

  溶血试验是国标中规定的一种对细菌进行筛选鉴定的方法。常用于链球菌、弧菌、白喉杆菌等的区分鉴定。  基本原理:  不少细菌都能产生溶血素,可以溶血平板,因此在这些细菌周围会出现溶血环。  试验方法:  由于不同细菌所产的溶血素不同,因此做溶血试验时对应的实验条件和试验方法也不一样,下面就简单的介绍

单克隆抗体的制备原理简介

  原理1:单克隆抗体(MAb)与抗血清(又称多克隆抗体,PAb)最主要的区别是MAb为单一种B细胞克隆所产生的一种均一的免疫球蛋白分子。所以MAb是B细胞克隆的标志,是一种独特型的抗体,它的特异性是针对一个抗原决定簇的。制备单克隆抗体不能用化学分离的方法从多克隆抗体中去分离纯化得到它,而是用分离产

判断THP1细胞体外培养时健康的标准或主要特点

通常通过提高MOI值来提高病毒的转染效率,必要时可以在培养基中加入polybrene(5-10 μg/ml)来提高病毒的感染效率。同时,目的细胞良好的生长状态是获得正常感染效率的保证。

判断THP1细胞体外培养时健康的标准或主要特点

通常通过提高MOI值来提高病毒的转染效率,必要时可以在培养基中加入polybrene(5-10 μg/ml)来提高病毒的感染效率。同时,目的细胞良好的生长状态是获得正常感染效率的保证。

Cultex细胞暴露技术建立呼吸道过敏反应的人肺体外模型-1

方法简介化学品引起的呼吸道过敏反应,不论是体内还是体外,目前尚缺少有效的评价方法。因此,新实验方法的开发收到极大的关注,特别是考虑到REACH(《化学品注册、评估、许可和限制》)新的法规规定。应注意的是,REACH指导方针明确指出,应尽量避免动物实验,其中,化妆品材料应在2013年全面禁止动物实验。

关于盐酸格拉司琼片的用药禁忌介绍

  孕妇及哺乳期妇女用药:  多个体外或体内评估试验证实本药对哺乳类动物细胞无遗传毒性。动物试验无致畸胎性。尚无孕妇使用本品经验,也缺乏在母乳中分泌及排泄资料,因此,应当遵循以下原则:  1.孕妇除非必需外,不宜使用。  2.哺乳期妇女需慎用,若使用本品时应停止哺乳。  儿童用药:尚无儿童用药经验,

贝乐司的药理作用

  巴柳氮钠是一种前体药物,口服后以原药到达结肠,在结肠细菌的作用下释放出5-氨基水杨酸(有效成分)和4-氨基苯甲酰-β-丙氨酸。5-氨基水杨酸可能是通过阻断结肠中花生四烯酸代谢产物的生成而发挥其减轻炎症的作用。  毒理研究:  遗传毒性:巴柳氮钠Ames试验、人淋巴细胞染色体畸变试验、小鼠淋巴瘤细

贝乐司的药理毒理

  巴柳氮钠是一种前体药物,口服后以原药到达结肠,在结肠细菌的作用下释放出5-氨基水杨酸(有效成分)和4-氨基苯甲酰-β-丙氨酸。5-氨基水杨酸可能是通过阻断结肠中花生四烯酸代谢产物的生成而发挥其减轻炎症的作用。  毒理研究:  遗传毒性:巴柳氮钠Ames试验、人淋巴细胞染色体畸变试验、小鼠淋巴瘤细

杂交瘤技术原理

单克隆是指利用在细胞融合基础上的B细胞杂交瘤技术。        杂交瘤技术的基本原理是通过融合两种细胞而同时保持两者的主要特征。这两种细胞分别是经抗原免疫的小鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞。被特异性抗原免疫的小鼠脾细胞(B淋巴细胞)的主要特征是它的抗体分泌功能,但不能在体外连续培养,小鼠骨髓瘤细胞则可在

与胰腺癌相关的基因突变及临床解释1DH1基因

IDH1基因所编码的蛋白名为异柠檬酸脱氢酶1,人类IDH有三种类型,分别为IDH1、IDH2和IDH3,IDH1定位与细胞质和过氧化物酶体中,IDH2和IDH3定位与线粒体中。该类蛋白酶可以将异柠檬酸氧化为草酰琥珀酸,然后在转化为α-酮戊二酸。最先研究发现IDH1的突变与脑胶质瘤密切相关,之后又发现

细胞计数及活力测定方法1

一、原理培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好,所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。计算细胞数目可用血球计数盘或是Coulter counter 粒子计数器自动计数。 血球计数盘一般有二个chambers,每个chamber 中细刻9 个

红细胞镰变试验的临床意义及注意事项

  临床意义  异常结果:检查结果为阳性,常见于镰状细胞性贫血(HbS),纯合子患者镰变红细胞可达100%,杂合子型可达50%左右。  需要检查的人群:有贫血症状的人群。  注意事项  不合宜人群:无。  检查前禁忌:检查前一天不吃过于油腻、高蛋白食物,避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结

红细胞渗透脆性试验的临床意义及注意事项

  临床意义  异常现象:  (1) 增高:遗传性球形红细胞增多症、自身免疫性溶血性贫血、先天性溶血性黄疸(家族性溶血性黄疸)等。  (2) 降低:镰状红细胞性贫血、阻塞性黄疸、缺铁性贫血、地中海贫血、铅中毒、恶性贫血、脾切除术后、肝脏病。  需要检查人群:贫血,铅中毒,黄疸,肝脏异常的人群。  注

红细胞镰变试验的注意事项及检查过程

  注意事项  不合宜人群:无。  检查前禁忌:检查前一天不吃过于油腻、高蛋白食物,避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。体检前一天 的晚八时以后,应禁食。  检查时要求:抽血时应放松心情,避免因恐惧造成血管的收缩、增加采血的困难。  检查过程  用末梢血主要有耳垂取血和指尖取血两个部位

中性粒细胞杀菌试验的临床意义及注意事项

  临床意义  杀菌活力降低,说明机体对感染抵抗力降低,易遭受细菌的感染。多见于先天性慢性肉芽肿病及中性粒细胞功能异常症、糖尿病、多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、慢性粒细胞性白血病、髓性及淋巴性增殖病、骨髓炎、某些病毒感染、类风湿性关节炎、红斑性狼疮、长期应用类固醇、秋水仙碱及长春新碱、酒精中毒及吸烟者

红细胞渗透脆性试验的注意事项及检查过程

  注意事项  检查时:  (1) 地中海贫血的渗透脆性降低,应进行低浓度NaCl溶液的检查。  (2) 严重贫血者,要把RBC配成50%浓度,黄疸者要洗红细胞。  (3) 血标本在冰箱中保存不得超过6h。  检查过程  (1) 制备不同浓度的NaCl溶液。先配置1%浓度的低渗NaCl溶液100ml

T细胞花环形成试验的注意事项及相关疾病

  注意事项  一、抽血前的注意事项  1、抽血前一天不吃过于油腻、高蛋白食物,避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。  2、体检前一天的晚八时以后,应禁食,以免影响第二天空腹血糖等指标的检测。  3、抽血时 应放松心情,避免因恐惧造成血管的收缩、增加采血的困难;  有晕血史者请提前说明

狼疮细胞试验的注意事项

  不合宜人群:一般无特殊人群。  检查前禁忌:避免使用可引起狼疮活动的药物,如青霉素类、避孕药、磺胺类等药物,能引起狼疮活动的药物颇多。  检查时要求:根据医生指示做好配合工作,保持正常心态。

细胞重编程研究新突破:非哺乳类动物重编程

  将已分化的细胞重编程,令其恢复多能性是一项重要的科学突破,这一成果也因此荣获了2012年诺贝尔生理/医学奖——两位科学家因证明“成熟细胞能被重编程恢复多能性”站在的科学的最高领奖台上。不过到目前为止,这种多能性重编程应用主要还是限制在哺乳动物中。   近期一组研究人员在9月3日的eLife杂志

单克隆抗体技术的基本流程

单克隆抗体技术的流程为:脾细胞和骨髓瘤细胞在聚乙二醇(PEG)作用下发生细胞融合;加入HAT选择培养基(含H、A和T)后,未融合的骨髓瘤细胞因其从头合成途径被氨基蝶呤阻断,而又缺乏HGPRT不能利用补救途径合成DNA,从而死亡;未融合的脾细胞难以在体外培养而死亡;融合细胞因从脾细胞获得HGPRT,故

胸腺嘧啶的产品用途

是合成抗艾滋病药物AZT、DDT及相关药物的关键中间体。上游原料:冰醋酸、醋酸丁酯、甲醇、甲基丙烯酸甲酯、尿素、盐酸、乙醇。也可用化学方法合成。用于药物制造。胸腺嘧啶是脱氧核糖核酸中的碱基之一。可与脱氧核糖结合形成胸腺嘧啶的脱氧核苷,其5-位甲基上的氢为氟取代后的产物称为三氟代胸腺嘧啶脱氧核苷,用做

胸腺嘧啶的产品用途

是合成抗艾滋病药物AZT、DDT及相关药物的关键中间体。上游原料:冰醋酸、醋酸丁酯、甲醇、甲基丙烯酸甲酯、尿素、盐酸、乙醇。也可用化学方法合成。用于药物制造。胸腺嘧啶是脱氧核糖核酸中的碱基之一。可与脱氧核糖结合形成胸腺嘧啶的脱氧核苷,其5-位甲基上的氢为氟取代后的产物称为三氟代胸腺嘧啶脱氧核苷,用做

胸腺嘧啶的用途

是合成抗艾滋病药物AZT、DDT及相关药物的关键中间体。上游原料:冰醋酸、醋酸丁酯、甲醇、甲基丙烯酸甲酯、尿素、盐酸、乙醇。也可用化学方法合成。用于药物制造。胸腺嘧啶是脱氧核糖核酸中的碱基之一。可与脱氧核糖结合形成胸腺嘧啶的脱氧核苷,其5-位甲基上的氢为氟取代后的产物称为三氟代胸腺嘧啶脱氧核苷,用做

2A1细胞培养注意事项

1. 收到2A1细胞。后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。2. 仔细阅读2A1细胞。说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、比例、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。3

INS1细胞培养注意事项

细胞正常生长形态照片细胞名称: INS-1(大鼠胰岛细胞瘤细胞)细胞别称: INS1细胞货号:SNL-332生长特性: 贴壁培养条件: 1640+20% FBS+0.05mM β-mercaptoethanol+1% P/S培养环境: 空气,95%;二氧化碳 (CO2),5%;37℃细胞简介: IN

PA1细胞培养注意事项

收到PA-1细胞。后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。2. 仔细阅读PA-1细胞。说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、比例、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。3.