Cultex细胞暴露技术建立呼吸道过敏反应的人肺体外模型1

方法简介化学品引起的呼吸道过敏反应,不论是体内还是体外,目前尚缺少有效的评价方法。因此,新实验方法的开发收到极大的关注,特别是考虑到REACH(《化学品注册、评估、许可和限制》)新的法规规定。应注意的是,REACH指导方针明确指出,应尽量避免动物实验,其中,化妆品材料应在2013年全面禁止动物实验。所以,建立体外模型显得非常必须和十分的紧迫。为了化学品呼吸道过敏反应的人肺体外模型的建立,我们采用Cultex技术开发一种三维共培养系统,模拟人肺肺泡区。该系统,采用细胞气液界面暴露技术,使体外培养的细胞在完全模拟人肺部环境下暴露于气溶胶或颗粒物质。方法建立三种类型的共培养系统:双细胞共培养模型:•人肺上皮细胞(ECs):A549细胞•人肺泡巨噬细胞(AMs):U937细胞三细胞共培养模型,类型1和类型2:• ECs: A549 cells• AMs: U937 cells, differentiated to AMs with PM......阅读全文

Cultex细胞暴露技术建立呼吸道过敏反应的人肺体外模型-1

方法简介化学品引起的呼吸道过敏反应,不论是体内还是体外,目前尚缺少有效的评价方法。因此,新实验方法的开发收到极大的关注,特别是考虑到REACH(《化学品注册、评估、许可和限制》)新的法规规定。应注意的是,REACH指导方针明确指出,应尽量避免动物实验,其中,化妆品材料应在2013年全面禁止动物实验。

Cultex细胞暴露技术建立呼吸道过敏反应的人肺体外模型-2

图3:免疫细胞化学(A-C)和流式(D)的表面标记。A,B:ECs(A)和AMs(B)DAPI染色(蓝色信号)和抗-proSP-C(红色)。在ECs上检测到ProSP-C,但是在AMs上检测不到。C:DCs DAPI染色(蓝色信号)和CD86(红色)。大部分细胞CD86呈阴性(箭头)。 D:DCs

细胞体外暴露染毒技术的发展与展望

一、简介: 不断进行的工业发展和新技术改进应用(例如,纳米技术),都导致了空气污染的不断增加,导致了肺部疾病在过去几十年里大大的增加。新的产品(例如,纳米粒子的喷雾剂)已经被广泛应用在电气工业,日常消费和医疗应用等等特别是喷雾或粉末形式应用的产品,对人体健康被认为是特别有害的。由于增加了有害物质的释

细胞气液界面暴露方法的一个重要问题及CULTEX的解决方案

关于细胞气液界暴露,由于欧盟关于化学物质的毒性风险评估(REACH EC No. 1907/2006)法规的改变,以及目前不断发展的替代方法的需求,以取代动物实验为目标,在体外模型基础上进行肺毒性的评估的技术,显然是非常有必要的。迄今为止,国内外的细胞体外毒性测试实验研究中,仍多采用浸没式细

体外抗药肿瘤细胞模型的建立实验_细胞培养技术

实验方法原理体外抗药肿瘤细胞模型的建立实验采取长时间药物处理、诱导抗性,最终筛选出具有一定抗性的细胞克隆。实验材料小鼠试剂、试剂盒小牛血清DMEMDOX仪器、耗材CO2培养箱无菌钢圈实验步骤一、培养条件用含10%小牛血清的DMEM培养液,5%CO2,37℃培养。二、实验步骤1.  将CHO细胞培养在

RFS细胞暴露实验程序的验证及颗粒物急性暴露毒性评价...

RFS细胞暴露实验程序的验证及颗粒物急性暴露毒性评价预测模型的优化项目合作单位德国军队药理学和毒理学研究所,慕尼黑SEH咨询服务,帕德博恩施特劳瓦尔特药理学与毒理学研究所,慕尼黑Cultex实验室有限公司,汉诺威由于工业和制药领域中对于松散固体颗粒的普遍使用使得空气中悬浮颗粒物的影响越来越重要。这些

体外抗药肿瘤细胞模型的建立实验

实验方法原理 抗药性细胞模型的筛选大多采取长时间药物处理、诱导抗性,最总筛选出具有一定抗性的细胞克隆。实验材料 小鼠试剂、试剂盒 小牛血清DMEMDOX仪器、耗材 CO2培养箱无菌钢圈实验步骤 一、培养条件用含10%小牛血清的DMEM培养液,5%CO2,37℃培养。二、实验步骤1.  将CHO细胞培

二手烟对细胞暴露及其对呼吸道病毒感染的易感性研究-1

简介:二手烟对细胞暴露及其对呼吸道病毒感染的易感性研究目标是了解二手烟的暴露对病毒性呼吸道疾病的形成有何促进作用。本研究项目的目的是确定在病毒感染中二手烟雾暴露的影响,在肺上皮细胞模型,使用两种流行的人类呼吸道病毒:鼻病毒和腺病毒。腺病毒(AD)是无包膜DNA病毒,是儿科需要住院治疗的呼吸系统疾病的

为什么利用thp1细胞建立细胞模型

我是生物领域的,就生物实验外包而言,对于实验外包公司,他们能够充分利用手中的技术及市场信息资源,利用较小的成本,完成不同单位的课题项目,避免了不同单位采购不常用设备的花费,和试剂耗材的浪费。因此对于一些研究条件比较差的实验室来说,选择单位以外提供的实验外包服务是一个相当不错的选择。其次要看下你选择单

为什么利用thp1细胞建立细胞模型

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多通道气液界面细胞直接暴露染毒技术CultexRFS-Compact

多通道气液界面细胞直接暴露染毒技术-CultexRFS Compact,细胞气液界面的直接暴露。在过去的几十年里,大气污染表现出惊人的速度,特别是今年中国雾霾的污染。空气中颗粒物浓度的急剧增加导致了呼吸道急性或慢性疾病的影响。在传统研究中,是通过动物的吸入暴露实验,确定可吸入物质对健康的影响。到

为什么选用thp1细胞建立痛风细胞模型

痛风病有原发性通风和继发性的区分,其病因也有所不同,具体简介如下:原发性痛风(1)遗传因素 临床所见,痛风有明显的家族遗传倾向,痛风患者亲属合并无症状高尿酸血症的检出率明显高于非痛风患者.痛风与其他具有遗传倾向的代谢性疾病(肥胖、高血压、高脂血症、糖尿病等)关系密切.已查明导致尿酸生成过多的嘌呤代谢

采用Cultex技术研究电子香烟(ecigarette)对支气管上皮...

采用Cultex技术研究电子香烟(e-cigarette)对支气管上皮细胞暴露染毒效应采用Cultex技术研究电子香烟(e-cigarette)对支气管上皮细胞暴露染毒的效应。自电子香烟于2003年问世以来,其售出的数量急剧上升。比如, 2013年至2014年,电子香烟在英国年销售量增长了2

体外暴露染毒技术的优化设计应用于实验重复性的提高-1

1.简介:目前的体外暴露染毒研究中,受试物可在气液界面直接与细胞接触(Cultex),避免了传统浸没培养暴露中培养基成分对实验的干扰。在此气-液界面体外暴露染毒过程中的实验重复性(稳定性和再现性)取决于细胞体外暴露染毒技术及暴露系统的优化设计。 在文献中,我们常见到的受试物在气液界面直接与细胞暴露接

帕金森体外模型帕金森体外模型

体外培养的中脑多巴胺能神经元MPTP损伤模型l实验操作:实验采用胚胎龄14一16天的大鼠,剖子宫取胎,取胎鼠中脑腹侧区。可将多个胚胎来源的组织收集在一起,置Fl2培养基(Gibco)至35mm的培养皿中,以细剪刀剪碎。将2ml含0.125%的胰酶的F12加入到组织中,该混合物于37oC孵育10分钟后

常见体外肝细胞损伤模型

1.四氯化碳体外损伤肝细胞模型原代培养的正常大鼠肝细胞培养24h(贴壁良好)后,置培养皿于一密闭的塑料盒,内置四氯化碳0.4M容积,37度90min,造成肝细胞损伤的模型,后转入正常培养,进行下一步实验。(即熏蒸法)肝细胞培养12h后,吸弃上清,更换培养液并加入CCL4 8mM(事先用DMSO溶解,

体外肝细胞损伤模型建立(CCl4和H2O2)

1 大鼠肝细胞的分离和培养 大鼠4%戊巴比妥麻醉,门静脉插管,先以无钙灌流液灌流,继以37℃通入O2的Ⅳ型胶原酶灌流液继续循环灌流15 min。将肝脏移至一平皿内,轻轻撕去肝包膜后,加入含5%小牛血清的清洗液,用吸管吹打成单个肝细胞悬液,200目尼龙网过滤,低速离心(500 r·min-1,1 mi

转基因小鼠模型的建立(SOP)1

名称:转基因小鼠模型的建立(SOP)关键词:转基因小鼠目的:在动物体研究转化基因原理:转基因动物是指染色体基因组中整合有外源基因并能遗传给后代的一类动物。整合到动物染色体基因组的外源基因称为转基因。转基因技术则是指制备转基因动物所需的一套技术,它涉及外源基因的构建、载体和受体的筛选、基因导人技术、供

体外DNA重组技术1

在体外将两个或多个来源相同或不相同的DNA片段连接成新的重组DNA分子,再转到特定宿主细胞中进行自主复制并表达。这是分子生物学中的基本技术。DNA重组技术的基本程序包括:(1)获得外源DNA:外源DNA是进行DNA重组的目的DNA片段,一般采用 DNA聚合酶链式反应(PCR)或逆转录-DNA聚合酶链

关于复合空气污染物体外气液界面毒性研究的进展

2019年2月,来自于中国科学院国家纳米中心、山西大学环境与健康研究中心环境与资源学院、中国科学院大学的多位科学家在著名的环境类期刊Chemosphere发表题为“Complex to simple: In vitro exposure of particulate matter simulat

骨骼肌细胞损伤模型的建立

1  材料 地塞米松磷酸钠注射液(江苏第三制药厂,批号000706) ;RPMI - 1640 培养基(GIBCO ,USA)(每升含10 %小牛血清、L-谷氨酰胺0. 33mg、青霉素100u、链霉素100u、pH-7. 4) ; 胰蛋白酶(Difco ,Lot :12885655) ; 四甲基氮

骨骼肌细胞损伤模型的建立

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Tb-1-Lu细胞,正常,蝙蝠肺细胞

污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室 环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养 基配制是减低污染之方法。2.如果细胞发生微生物污染时,应如何处理?直接灭菌后丢弃之。3.购买之细胞冷冻管经解冻后

体外暴露染毒技术的优化设计应用于实验重复性的提高-2

图5 颗粒物沉积模式图 3.结果不同粒径及质量的颗粒物在两种不同暴露染毒模块内有不同的沉积结果。通常情况下,虽然粒子的理化性质及粒径大小可能会对颗粒沉积有影响,但在同一粒子的暴露结果可以看出,辐射流暴露染毒系统CULTEX RFS中三个位置暴露数据的具有更低的偏差和相对标准偏差,且相对标准偏差都

最新研究:表观遗传变化的肺腺癌病人分类模型被建立

  近期,Genome Biology在线发表了复旦大学附属肿瘤医院主任孙艺华、中国科学院上海营养与健康研究所研究员邵振和中科院分子细胞科学卓越创新中心研究员季红斌、孟飞龙等的合作研究成果——A systematic dissection of the epigenomic heterogeneit

体内组织细胞的体外培养1

体内组织细胞在体外培养时,所需培养环境基本相似,但由于物种、个体遗传背景及所处发育阶段等的不同,各自要求条件有一定差别,所采取的培养技术措施亦不尽相同,现介绍个别组织细胞培养的要点如下:一、上皮细胞培养上皮细胞包括腺上皮是很多器官如肝、胰、乳腺等的功能成分,又由于癌起源于上皮组织,故上皮细胞培养特别

Nature:呼吸道疾病新模型

  人的呼吸道并不适于微生物生存,呼吸道中存在许多免疫防御机制能在吸入的细菌引起疾病前将其杀死或清除。但囊性纤维化CF会扰乱这些防御机制,让患者对呼吸道感染特别敏感,而这也是CF致病或致死的主要原因。   Iowa大学的科学家通过一种独特的CF动物模型,发现健康呼吸道和CF呼吸道(杀菌能力减弱)之

脊髓星形胶质细胞机械性损伤的体外培养模型

1.材料与方法取新生的wistar 大鼠脊髓,剪碎,0125 %胰蛋白酶消化1h ,用含血清的DMEM培养液终止胰蛋白酶的作用; 而后吹打成散在的单个细胞,进行细胞计数,按5 ×105 个Pcm2 密度进行接种。培养至第10天时加10mM Leu2methy12ester 除杀小胶质细胞。于16d

体外三维模型或揭示癌细胞转移机制

  癌症之所以致命,根本原因之一在于肿瘤细胞临床上的转移性,但是人们对肿瘤细胞侵袭和转移过程的认识尚不清楚。  现在,一项研究有望揭示肿瘤细胞的转移机制,帮助我们更加深入理解癌症的致命机理,从而为探索新治疗手段提供思路。  近日,中科院物理研究所公布了一项新研究进展。该所刘雳宇研究员与美国科学家合作

建立基于表观遗传异质性的肺腺癌病人分型模型

  近期,Genome Biology在线发表了复旦大学附属肿瘤医院主任孙艺华、中国科学院上海营养与健康研究所研究员邵振和中科院分子细胞科学卓越创新中心研究员季红斌、孟飞龙等的合作研究成果——A systematic dissection of the epigenomic heterogeneit