常用多肽修饰方法及过程综述
多肽是一种由两个或多个氨基酸通过肽键(酰胺键)连接而形成的化合物。多肽在调节机体各系统、器官、组织和细胞的功能活动以及在生命活动中发挥重要作用,并且常被应用于功能分析、抗体研究、药物研发等领域。而通过对多肽进行修饰进而改变多肽的理化性质也是多肽研究中一种常用的手段。多肽修饰种类繁多,从修饰位点不同则可分为N端修饰、C端修饰、侧链修饰、氨基酸修饰、骨架修饰等(图1)。作为一种改变肽链主链结构或侧链基团的重要手段,多肽修饰可有效改变肽类化合物的理化性质、增加水溶性、改变其生物分布状况、延长体内作用时间、降低毒副作用、消除免疫原性等。今天我们来介绍几种最主要的多肽修饰及特点。 1、环化在自然界中,许多具有生物活性的多肽都是环状多肽,因此环肽在现代生物医学中有主多应用。环肽相较于线性肽,具有更好的刚性,对消化系统具有极强的抵抗力,因此可以在消化道中存货,并且对靶受体表现出更强的亲和力。环状多肽通常都是通过环化来实现的,根据环化......阅读全文
核酸-活性多肽及递质的提取方法
核酸分为两大类:一类为核糖核酸(RNA),另一类为脱氧核糖核酸(DND)。核酸的分子量极大,人数万致亿万。核酸是两性化合物,在一定的等电点。溶于水,其水溶液呈酸性,不溶于乙醇等有机溶剂。细胞内的核酸常和蛋白质结合成核蛋白。核糖核蛋白和脱氧核糖核蛋白在不同浓度的电解质溶液中的溶解度有显著区别,有一定
多肽合成方法及难题解决
多肽合成方法是把不同的或相同的多个氨基酸按指定顺序连结起来构成肽链(含多个肽键-CONH-)化合物的合成方法。由德国化学家费舍尔(E.Fischer)所首创。进行多肽合成,必须首先解决两个问题:1.要将氨基酸两个官能团中的一个(通常选氨基)封闭,即用保护基团保护起来,只让没被保护的那个基团(羧基)去
核酸-活性多肽及递质的提取方法
核酸分为两大类:一类为核糖核酸(RNA),另一类为脱氧核糖核酸(DND)。核酸的分子量极大,人数万致亿万。核酸是两性化合物,在一定的等电点。溶于水,其水溶液呈酸性,不溶于乙醇等有机溶剂。细胞内的核酸常和蛋白质结合成核蛋白。核糖核蛋白和脱氧核糖核蛋白在不同浓度的电解质溶液中的溶解度有显著区别,有一定浓
动物所发表有关6mADNA修饰的综述文章
DNA甲基化修饰作为重要的表观遗传修饰之一,广泛存在于多种生物的DNA基因组中。DNA甲基化参与许多重要的生物学过程,如细胞命运决定、发育和组织、器官的形成和稳态维持;其调控的异常与人类疾病密切相关,如肿瘤。因此,DNA甲基化修饰的调控机理一直以来是人们关注的热点之一。 DNA甲基化以多种修饰
微生物絮凝剂化学修饰的常用方法有哪些?
微生物絮凝剂化学修饰的常用方法包括:羧甲基化:在碱性条件下,将微生物絮凝剂中的羟基与氯乙酸或其钠盐反应,引入羧甲基,从而增加其水溶性和负电荷密度。磷酸化:使微生物絮凝剂与磷酸化试剂反应,引入磷酸基团,增强其电荷特性和与金属离子的络合能力。胺化:通过与胺类化合物反应,将氨基引入微生物絮凝剂分子中,改变
组织多肽抗原的检查过程
本法分三个步骤,即抗原与抗体反应、B和F分离和放射性测定。 (1)抗原与抗体反应:将标本(非标记抗原)、标记抗原和抗血清顺序定量加入小试管内,置室温(15~30℃)作用24h,使其充分竞争结合。 (2)B、F分离:分离技术多种多样,常用沉淀法。①第二抗体沉淀法:又称双抗体法,在受检抗原与第一
组织多肽抗原的检查过程
本法分三个步骤,即抗原与抗体反应、B和F分离和放射性测定。 (1)抗原与抗体反应:将标本(非标记抗原)、标记抗原和抗血清顺序定量加入小试管内,置室温(15~30℃)作用24h,使其充分竞争结合。 (2)B、F分离:分离技术多种多样,常用沉淀法。①第二抗体沉淀法:又称双抗体法,在受检抗原与第一
关于多肽链的一级结构加工修饰介绍
⑴N端甲酰蛋氨酸或蛋氨酸的切除:N端甲酰蛋氨酸是多肽链合成的起始氨基酸,必须在多肽链折迭成一定的空间结构之前被切除。 其过程是: ① 去甲酰化; ② 去蛋氨酰基。 ⑵氨基酸的修饰:由专一性的酶催化进行修饰,包括糖基化、羟基化、磷酸化、甲酰化等。 ⑶二硫键的形成:由专一性的氧化酶催化,将
定制多肽、氨基酸和蛋白等表面修饰脂质体
主动靶向药物传递是指利用特定的生物过程如特异性的配体-受体识别和相互作用来提高特定部位的药物浓度。主动靶向系统以抗体、多肽、糖类、维生素、糖蛋白等作为配体与靶细胞受体进行专属性作用。其中多肽分子是机体内一类重要的生物活性物质。具有良好的生物相容性、靶向性、无免疫原性、低毒性等优点将其作为配体应用于靶
常用膜分离过程
根据被分离物(溶质)粒子的大小及所用膜的结构。可以将压力差为推动力的膜分离过程分为四类:微滤、超滤、纳滤和反渗透。它们构成了一个可分离固态微粒到离子的四级分离过程。(1)超滤与微滤超滤和微滤都是成熟的膜分离技术,已广泛应用于化工、医药、轻工、机械电子和环保等领域。其中微滤是目前应最广泛的膜分离过程。
何川教授新发Nature综述:mRNA修饰介导的基因调控
在分子生物学的中心法则中,遗传信息从DNA、RNA流向蛋白。基因组DNA和组蛋白上都存在可逆的表观遗传学修饰,这些修饰可以调控基因的表达,并由此决定细胞的状态,影响细胞的分化和发育。近年来人们发现,mRNA和其他RNA上也存在类似的调控机制。 N6-methyladenosine(m6A)是真
蛋白浓度测定及常用方法
蛋白质溶液浓度测定方法有多种,下述几种方法可供选用。蛋白质浓度的测定,往往用于计算纯化方法的回收率的重要方法。一、蛋白浓度的直接测定(UV法)这种方法是在280nm波长,直接测试蛋白。选择Warburg 公式,光度计可以直接显示出样品的浓度,或者是选择相应的换算方法,将吸光值转换为样品浓度。蛋白质测
常用灰分测定原理及方法
一、粮食灰分的测定 粮食中除含有大量有机物质外,还含有较丰富的无机成分。经高温灼烧遗留的无机物质称为灰分。各种粮食的灰分因品种、土壤、气候、肥料及灌溉等条件的不同而有差异。禾谷类粮食中的灰分质量分数一般在1.5~3.0%。 灰分在粮粒中的分布极不均匀,胚乳灰分含量最低,胚部次之,皮层
肿瘤神经多肽受体显像的注意事项及检查过程
注意事项 不合宜人群:无特殊要求。 检查前禁忌:检查当日请空腹到科室。 检查时要求:患者应处于休息状态,必要时使用镇静剂。 检查过程 采用正电子断层显像,近年来PET、PET/CT技术的不断发展,正电子放射性药物在肿瘤学研究及临床应用中占据着重要的地位和作用。
多肽合成方法
1.酰基叠氮物法 早在1902年,Theodor Curtius就将酰基叠氮物法引入到肽化学中,因此它是最古老的缩合方法之一。在碱性水溶液中,除了与酰基叠氨缩合的游离氨基酸和肽以外,氨基酸酯可用于有机溶剂中。与其他许多缩合方法不同的是,它不需要增加辅助碱或另一等当量的氨基组分来捕获腙酸。
DNA修饰图谱揭示人脑发育过程
由美国加州大学洛杉矶分校牵头的一项研究,揭示了人类大脑发育过程中基因调控的演变方式,并展示了染色质的3D结构在其中发挥的关键作用。研究人员绘制了海马体和前额叶皮质中DNA修饰的首张图谱,这两个大脑区域对学习、记忆和情绪调节至关重要,也常与自闭症和精神分裂症等疾病相关。这项研究为早期大脑发育如何影响身
人类或有机会修饰大脑发育过程
在英国《自然》杂志25日发表的两项神经科学成果中,美国科学家报告了发育中人脑的两个三维模型,这些系统让研究人员有机会在培养的细胞中研究和修饰大脑发育的关键过程,对理解正常的大脑发育和某些疾病(如自闭症谱系障碍和精神分裂症)的神经发育根源很有帮助。 随着人类胎脑的发育,γ-氨基丁酸能神经元会从腹
实验分析方法常用固定相基质特征及常用种类
一、固定相基质的特征由于HPLC分离过程涉及物理化学作用、流体动力カ学、热力学过程等,因而对固定相基质材料的物理化学性质有比较严格的要求。液相色谱固定相基质可分为无机氧化物、有机聚合物和无机有机杂化材料三种类型。杂化基质作为一类新型液相色谱固定相基质,近两年发展较快,但大多尚处于研究阶段。无机和有机
常用加热仪器及加热方法(二)
(2)电炉 电炉是一种用电热丝将电能转化为热能的装置。其温度高低可通过调节电阻来控制。使用时,容器和电炉之间要隔石棉网,以使受热均匀。
常用加热仪器及加热方法(三)
(3)电热恒温水浴锅 电热恒温水浴锅有两孔、四孔、六孔等不同规格。其构造分内外两层。内层用铝板制成,外壳用薄板制成,表面烤漆覆盖:槽底安装铜管.内装电炉丝用瓷接线柱联通双股导线至控制器;控制器表面有电源开关、调温旋钮和指示灯:水浴锅左下侧有放水阀门,后上侧可插温度计,外形如图2-5。水浴锅恒温范围为
常用加热仪器及加热方法(一)
(1)酒精灯 酒精灯一般是玻璃制的。由灯帽、灯芯、灯壶三部分组成。其灯焰温度通常可达400-500℃ ,外焰最高,内焰次之,焰心最低。酒精灯用于温度不需太高的实验,点燃时,切勿用点燃的酒精灯直接点火;添加酒精时,必须将火焰熄灭,且加入的量不能超过灯容量的三分之二;熄灭酒精灯时必须用灯罩罩熄,
常用脂肪测定原理及方法汇总
一、糕点、糖果中脂肪的测定 脂肪是食品的主要成分之一,常用的测定方法有:索氏提取法、酸水解法、三氯甲烷冷浸法、罗兹-哥特里法、盖勃法、巴布科氏法和尼霍夫氏碱法等。糕点及糖果食品主要用索氏提取法和酸水解法。 1、索氏提取法 本法适用于各类食品中脂肪含量的测定,操作简便,准确度高,但提取时间长
常用的荧光分析方法及仪器
直接测定法利用物质自身发射的荧光进行测定分析。间接测定法不管是直接测定,还是间接测定,一般的采用标准工作曲线法,取各种已知量的荧光物质,配成一系列的标准溶液,测定出这些标准溶液的荧光强度,然后给出荧光强度对标准溶液的浓度的工作曲线。在同样的仪器条件下,测定未知样品的荧光强度,然后从标准工作曲线上查出
色谱及质谱常用定量方法
色谱及质谱检测中往往需要对目标物质进行定量,目前使用较多的定量方法有面积归一化法、外标法、内标法、标准加入法等。 定量分析基本要求: 1、纯物质做标准 2、被定量组分峰要与其它峰达到基线分离(质谱可不满足) 3、符合定性参数要求 4、选择合适的定量方法 定量分析基本公式: 在某些条
多肽稳定标同位素记技术与甲基化修饰技术
1. 多肽稳定标同位素记技术 随着多肽在生物医药领域越来越广泛和深入的应用,标记和修饰性的多肽种类的需求越来越多,质量需求也越来越高。稳定同位素标记(同位素示踪法)就是其中典型的一种。稳定同位素标记多肽是指用稳定同位素标记的氨基酸合成的多肽。与标准氨基酸相比,同位素标记是指用2H,13C或1
多肽固相合成方法:Boc多肽合成法和Fmoc多肽合成法
多肽的合成是氨基酸重复添加的过程,通常从C端向N端(氨基端)进行合成。多肽固相合成的原理是将目的肽的第一个氨基酸C端通过共价键与固相载体连接,再以该氨基酸N端为合成起点,经过脱去氨基保护基和过量的已活化的第二个氨基酸进行反应,接长肽链,重复操作,达到理想的合成肽链长度,最后将肽链从树脂上裂解下来
多肽固相合成方法:Boc多肽合成法和Fmoc多肽合成法
多肽的合成是氨基酸重复添加的过程,通常从C端向N端(氨基端)进行合成。多肽固相合成的原理是将目的肽的第一个氨基酸C端通过共价键与固相载体连接,再以该氨基酸N端为合成起点,经过脱去氨基保护基和过量的已活化的第二个氨基酸进行反应,接长肽链,重复操作,达到理想的合成肽链长度,最后将肽链从树脂上裂解下来
多肽固相合成方法:Boc多肽合成法和Fmoc多肽合成法
多肽的合成是氨基酸重复添加的过程,通常从C端向N端(氨基端)进行合成。多肽固相合成的原理是将目的肽的第一个氨基酸C端通过共价键与固相载体连接,再以该氨基酸N端为合成起点,经过脱去氨基保护基和过量的已活化的第二个氨基酸进行反应,接长肽链,重复操作,达到理想的合成肽链长度,最后将肽链从树脂上裂解下来,分
肿瘤神经多肽受体显像的检查过程
采用正电子断层显像,近年来PET、PET/CT技术的不断发展,正电子放射性药物在肿瘤学研究及临床应用中占据着重要的地位和作用。
螺栓无损检测方法综述
螺栓作为工业现场中最为常用的连接件,普遍应用于航空航天、船舶轮机、桥梁建设、化工设备、新能源等领域的关键设备中。由于其具有施工简单、受力性能好、可拆换、耐疲劳以及在动力荷载作用下不致松动等优点,在用于可拆卸零件和传递载荷上有着不可替代的作用,因此成为当前主要的连接、密封方式。螺栓一旦在运行中突然