一次性使用固定床生物反应器与微载体搅拌罐的对比
rVSV-ZEBOV疫苗无血清生产：一次性使用固定床生物反应器 vs 微载体搅拌罐摘要 埃博拉病毒病(EVD)是一种致命性疾病，近年来偶发于非洲大陆，并导致严重的疫情。rVSV-ZEBOV是一种重组水泡口炎病毒结构，其中的天然病毒糖蛋白替换为埃博拉病毒(Zaire)糖蛋白。免疫被认为是预防这种高传染性疾病最有效的方法。所以，迫切需要开发经济高效且可放大的疫苗生产工艺，以使疫苗可大规模使用。贴壁细胞被广泛用于疫苗的开发和商品化生产。由于生物工艺行业近来的发展，对病毒性疫苗有很大的需求，超过了当前的生产能力。但是，使用传统技术(如搅拌罐、静态细胞培养)进行病毒疫苗的生产会有一定的局限性，如有限的可放大性、灵活性以及较高的生产成本。Univercells Technologies开发了一种可规模放大的新型固定床生物反应器，可帮助以可负担的形式，为市场提供所需数量的疫苗产品。在本研究中，将rVSV-ZEBOV的Vero细胞无血......阅读全文
一次性使用固定床生物反应器与微载体搅拌罐的对比
rVSV-ZEBOV疫苗无血清生产：一次性使用固定床生物反应器 vs 微载体搅拌罐摘要 埃博拉病毒病(EVD)是一种致命性疾病，近年来偶发于非洲大陆，并导致严重的疫情。rVSV-ZEBOV是一种重组水泡口炎病毒结构，其中的天然病毒糖蛋白替换为埃博拉病毒(Zaire)糖蛋白。免疫被认为是预防这种高传染
使用悬浮或贴壁细胞系进行基因治疗的商业化生产
Alex Chatel 和 Jean-Christophe Drugmand本文将探讨从实验室到临床的传统路径，以及scale-X 固定床技术如何提供一种替代解决方案，以满足商业化需求。有报告依此预计，到2023年，基因治疗市场将达到30亿美元，复合年增长率 (CAGR) 达34%，这使其成为生
生物反应器在病毒载体生产中的应用
摘要scale-X 生物反应器是一种新型固定床系统，可用于贴壁和悬浮细胞系的培养。设备单元占地小，而具有相当大的表面积，从而可获得极高细胞密度。本研究比较了在scale-X hydro生物反应器和标准微载体培养体系中进行的贴壁Vero细胞培养。两种系统可获得相似的单位面积细胞浓度。随后，
scaleX生物反应器系统在慢病毒和腺病毒载体生产中...2
细胞分布 我们之前比较了iCELLis Nano生物反应器高压缩固定床（4m2）和低压缩固定床（2.67m2）中的细胞分布，发现在低压缩中，细胞分布更加均衡。在高压缩固定床中，细胞分布有较大的差异，取决于计数的细胞来自哪一层（相比顶部，底部的细胞量要高3到4倍）。尽管在低压缩固定床中，差异性较
scaleX生物反应器系统在慢病毒和腺病毒载体生产中...1
我们之前在Pall iCELLis®固定床生物反应器中，以小规模和商品化规模，进行了病毒载体（慢病毒、腺病毒以及腺相关病毒）的生产。最近，一家名为Univercells的比利时公司推出了一种新型固定床生物反应器，其具有相同的细胞生长表面基质材料，但固定床结构与iCELLis生物反应器所使用的结构
微载体的原理与操作
1.原理：其原理是将对细胞无害的颗粒-微载体加入到培养容器的培养液中，作为载体，使细胞在微载体表面附着生长，同时通过持续搅动使微载体始终保持悬浮状态。贴壁依赖性细胞在微载体表面上的增殖，要经历黏附贴壁、生长和扩展成单层三个阶段。细胞只有贴附在固体基质表面才能增殖，故细胞在微载体表面的贴附是进一步铺展
如何利用新型固定床生物反应器开发高产量活病毒疫...1
如何利用新型固定床生物反应器开发高产量活病毒疫苗生产平台摘要：病毒疫苗生产日益增加的重要性，推动了细胞高密度培养生产工艺的发展。传统的细胞贴壁培养工艺有一定的物理局限性，如较大的设备占地、时间和较多的劳动力。我们通过新型一次性scale-Xcarbo生物反应器建立的病毒疫苗生产系统，解决了这种限制。
如何将病毒载体生产从塑料器皿向固定床生物反应器转变
早期到晚期临床开发中的基因和修饰细胞治疗（例如，嵌合抗原受体[CAR] T-细胞治疗）在多种疾病的治疗以及潜在治愈方面显示出了良好的前景。这类新一代药物中的多个产品已经获得了审批并开始进入市场。尽管有大量候选药物的管线开始进入临床试验阶段，但其仍面临着可能的生产瓶颈 – 病毒载体生产 – 其可能延迟
WAVETM－生物反应器中的－Cytodex™－微载体细胞培养工艺（一）
摘要 WAVE Bioreactor 系统多用于悬浮细胞的培养。然而，用于细胞治疗和疫苗生产的多种细胞为贴壁依赖型的，需要一个可贴附的生长表面。在本研究中，Cytodex 微载体被应用在 CellbagTM 生物反应器中以扩增 Madine-Darby Canine Kidney
微载体
实验方法原理以高浓度接种细胞和微珠，然后按照要求进行稀释、搅拌和取样。实验材料起始培养物仪器、耗材生长培养基微载体搅拌培养瓶磁力搅拌器实验步骤1. 按照所需最终培养液量的 1/3，以 2~3 g/L 混悬微珠。2. 用胰蛋白酶消化和计数细胞，以正常接种浓度的 3~5 倍将细胞接种到微珠悬液中。3.
微载体
实验方法原理 以高浓度接种细胞和微珠，然后按照要求进行稀释、搅拌和取样。 实验材料 起始培养物
微载体
实验方法原理 以高浓度接种细胞和微珠，然后按照要求进行稀释、搅拌和取样。 实验材料 起始培养物
一次性搅拌生物反应器的特点及应用
工艺开发与控制（质量属性和关键工艺控制）的有效工具在过去十年中，一次性生物反应器已被广泛接受作为替代传统的不锈钢或玻璃生物反应器，应用于药物生产和工艺开发。在生物制药行业，玻璃生物反应器主要应用于工艺开发和优化，也会作为工艺参数确证的比例缩小模型。所以无论是重复性还是一次性反应器，重现生产规模反应器
五分钟了解一次性生物反应器（下）
在上篇，我们介绍了一次性生物反应器的类型和市场分布，而在下篇，我们重点介绍市场上的主要厂家及产品。一次性生物反应器主要产品思拓凡Cytiva (Danaher) Cytiva是一家生命科学领域的全球领先公司，提供各种生物制药和生物技术应用的解决方案和产品。在生物反应器领域，Cytiva 提供
微载体实验
实验方法原理 以高浓度接种细胞和微珠，然后按照要求进行稀释、搅拌和取样。实验材料 起始培养物仪器、耗材 生长培养基微载体搅拌培养瓶磁力搅拌器实验步骤 1. 按照所需最终培养液量的 1/3，以 2~3 g/L 混悬微珠。2. 用胰蛋白酶消化和计数细胞，以正常接种浓度的 3~5 倍将细胞接种到微珠悬液中
慢病毒大规模生产面临的挑战
慢病毒作为基因载体在治疗各类遗传性和后天性的人类疾病中倍受欢迎。从基础研究发展到临床阶段，高浓度纯化的载体需求量越来越大，相应的方法也层出不穷。目前大多数慢病毒的生产是在方瓶、平皿等体系中加入胎牛血清贴壁培养HEK293细胞系（293T和293E），通过多质粒瞬时转染包装得到病毒，但是该方法难以
微载体在生物反应器进行细胞规模扩培中的应用
微载体是用于基于生物反应器的进行细胞生产中微型载体颗粒。麻省理工学院研究与技术联盟 (SMART) 的研究人员近期开发了一种用于大规模细胞生产和扩增的新型微载体，与传统方法相比，该微载体具有更高的产量和成本效益，并减少了所需的步骤在细胞检索过程中。SMART 新开发的基于明胶的可溶性微载体已被证明可
生化反应工程特点是什么
生物反应器通常在常温常压下操作，但与化学反应器相比有下列特点：①生物反应过程的底物（反应物）及产物的浓度均较低，生物的生长速率一般又小于化学反应，因此生物反应器的体积一般较大，或需要很长的反应时间。②温度、pH值、溶氧等反应环境及某些中间产物的浓度对生化反应的影响极大。③生物细胞比重与液体相近，一般
生物转盘与MBR膜生物反应器工艺对比
1. 水质处理稳定性方面：生物转盘工艺是AO工艺的一种变形，该工艺在设备初期时出水比较稳定，但随着污泥浓度的变化及气温的变化，一年中某个时段容易出现水质不达标的情况，一般COD会超过50，而MBR工艺可以有效的提高活性污泥的浓度，使用SV值保持在较高水平，因而产水具有连续性好且稳定的特点，全年不受外
Cytodex－1,－Cytodex－3－球形微载体的使用（二）
细胞培养容器 有关培养容器的详细内容，请参阅《微载体细胞培养：原理与方法》手册。 简而言之，微载体培养液可置于各类细胞培养容器中。但是，应用一些在轻微搅动即可使微载体均匀悬浮的容器所获得的效果最佳，如WAVE生物反应器。那些在应用了能有效的混合悬液但不产生高剪切力的装置能够形成一个均匀的培养环境
Cytodex－1,－Cytodex－3－球形微载体的使用（一）
用于细胞培养的微载体 微载体培养（microcarrier culture）是一种用于高产量培养贴壁细胞的实用技术。CytodexTM专用于培养各类动物细胞，其培养体积可以从数毫升到6000升以上。应用Cytodex微载体技术，可以实现简单的贴壁细胞悬浮化培养，每毫升培养液可得到数百万细胞。微载
微载体的应用原理
1.原理：其原理是将对细胞无害的颗粒-微载体加入到培养容器的培养液中，作为载体，使细胞在微载体表面附着生长，同时通过持续搅动使微载体始终保持悬浮状态。 贴壁依赖性细胞在微载体表面上的增殖，要经历黏附贴壁、生长和扩展成单层三个阶段。细胞只有贴附在固体基质表面才能增殖，故细胞在微载体表面的贴附是进一步
微载体培养的原理
微载体培养技术（micro-carrierculturetechnique）于1967年被用于动物细胞大规模培养。经过三十余年的发展，该技术日趋完善和成熟，广泛应用于生产疫苗、基因工程产品等。 微载体是指直径60-250μm，能适用于贴壁细胞生长的微珠。一般是由天然葡聚糖或者各种合成的聚
微载体的基本介绍
自Van Wezel用DEAE-Sephadex A 50 研制的第一种微载体问世以来，国际市场上出售的微载体商品的类型已经达十几种以上，包括液体微载体、大孔明胶微载体、聚苯乙烯微载体、PHEMA微载体、甲壳质微载体、聚氨酯泡沫微载体、藻酸盐凝胶微载体以及磁性微载体等。常用商品化微载体有三种：Cyt
微载体的分类系统
生物反应器系统此技术大规模培养，细胞扩增的效率受到诸多因素的影响和限制，其中主要的限制性因素包括：细胞对剪切力的敏感性、氧的传递以及传代和扩大培养等。而研制的各种类型生物反应器系统则可针对上述限制性因素，为微载体细胞培养与扩增提供低剪切力、高氧传递效率、易于细胞传代等适宜的外部环境。已较多使用的微载
WAVETM－生物反应器中的－Cytodex™－微载体细胞培养工艺（二）
用于MDCK和 Vero细胞的生物反应器 WAVE Bioreactor 系统由一个带有一次性塑料细胞培养袋的摇动平台组成，配备CO2 气体混合器 (CO2MIX20) 或WAVEPOD™控制塔用于控制pH、温度、氧气和混合。MDCK细胞在Cellbag-10 L和Cellbag-50
WAVETM－生物反应器中的－Cytodex™－微载体细胞培养工艺（五）
MDCK细胞的生长和放大（2% FBS） 为了研究在 Cellbag 生物反应器中 MDCK细胞扩增的可放大性，在两种不同大小的袋子之间比较最大细胞密度和细胞生长速率 Cellbag-10 L和 Cellbag-50 L。 袋子的工作培养体积采用最大工作体积的40%（即Cellbag-1
WAVETM－生物反应器中的－Cytodex™－微载体细胞培养工艺（六）
Vero细胞在转瓶 （Spinner Flask)中无血清条件下的微载体培养 Vero细胞也可以在转瓶中进行微载体培养。如图 14 所示，在无血清条件下，WAVE 和转瓶这两种培养系统中可以获得基本相同的最大细胞密度。相比 Cytodex3，Cytodex 1 具有更大的表面积，
WAVETM－生物反应器中的－Cytodex™－微载体细胞培养工艺（三）
结果和讨论 微载体培养的最佳工作体积和混合速度的确定当我们使用 20%到 80%的Cellbag最大工作体积时，微载体培养可以产生均匀的微载体混合分布（图 2）。图 2. 微载体培养的最佳工作体积 在工作体积小于 20%的 Cellbag 最大工作体积时，部分微载体有可能粘在 Cel
WAVETM－生物反应器中的－Cytodex™－微载体细胞培养工艺（四）
微载体用量为3 g/l的 Cytodex3，接种细胞密度为0.3×106细胞/ml。培养条件为37℃，pH 7.3，5% CO2，采用光纤溶氧电极监测溶氧水平。培养基含有 2% FBS。每小时取样并用结晶紫染色测定总细胞密度，上清中的悬浮细胞和死细胞用台盼蓝染色。MDCK细胞在接种后1 h