一次性使用固定床生物反应器与微载体搅拌罐的对比
rVSV-ZEBOV疫苗无血清生产:一次性使用固定床生物反应器 vs 微载体搅拌罐摘要 埃博拉病毒病(EVD)是一种致命性疾病,近年来偶发于非洲大陆,并导致严重的疫情。rVSV-ZEBOV是一种重组水泡口炎病毒结构,其中的天然病毒糖蛋白替换为埃博拉病毒(Zaire)糖蛋白。免疫被认为是预防这种高传染性疾病最有效的方法。所以,迫切需要开发经济高效且可放大的疫苗生产工艺,以使疫苗可大规模使用。贴壁细胞被广泛用于疫苗的开发和商品化生产。由于生物工艺行业近来的发展,对病毒性疫苗有很大的需求,超过了当前的生产能力。但是,使用传统技术(如搅拌罐、静态细胞培养)进行病毒疫苗的生产会有一定的局限性,如有限的可放大性、灵活性以及较高的生产成本。Univercells Technologies开发了一种可规模放大的新型固定床生物反应器,可帮助以可负担的形式,为市场提供所需数量的疫苗产品。在本研究中,将rVSV-ZEBOV的Vero细胞无血......阅读全文
什么是微载体?
是指直径在60-250μm,能适用于贴壁细胞生长的微珠。一般是由天然葡聚糖或者各种合成的聚合物组成。
如何利用新型固定床生物反应器开发高产量活病毒疫...2
2.5. 病毒收获收获原液通过由Sartopure PP38μm过滤器和Sartopore 2 0.8/0.45μm过滤器组成的两步深层过滤器链,收集进入二级容器。在运行4中,罐初步清空后,生物反应器用额外的1L新鲜培养基润洗,以冲洗掉固定床中所有残料的病毒颗粒。该冲洗液通过深层过滤器,以TFF
微载体细胞计数的难题与解决方案
细胞和病毒生产的放大培养面临挑战。当需要生产量增加千倍时,细胞培养瓶对于工业规模生产是不可行的。微载体为生物反应器中贴壁细胞的生长提供了方便, 微载体充当贴壁细胞可附着的支架,允许它们增殖,而生物反应器使细胞-微载体复合体自由悬浮在培养基中。因此,贴壁细胞也可以像悬浮细胞那样生长,从而简化了放大培养
动物细胞大规模培养技术-(二)
第三节 大规模培养技术的操作方式深层培养可分为:分批式、流加式、半连续式、连续式、连续式和灌注式五种。一、分批式培养(batch culture) 是细胞规模培养发展进程中较早期采用的方式,也是其它操作方式的基础。该方式采用机械搅拌式生物反应器,将细胞扩大培养后,一次性转入生物反应器内进行培养,在培
使用微载体珠上培养细胞时是否需要附在微珠?
微珠和细胞可以同时被装载入反应器,但又独立彼此。在它们两个被装载入反应器之后在反应器里面的细胞就会自动地附着微珠。
微载体培养的技术特点
●表面积/体积(S/V)大,因此单位体积培养液的细胞产率高; ●把悬浮培养和贴壁培养融合在一起,兼有两者的优点; ●可用简单的显微镜观察细胞在微珠表面的生长情况; ●简化了细胞生长各种环境因素的检测和控制,重现性好; ●培养基利用率较高; ●放大容易; ●细胞收获过程不复杂; ●劳动强
微载体技术的培养优点
●表面积/体积(S/V)大,因此单位体积培养液的细胞产率高;●把悬浮培养和贴壁培养融合在一起,兼有两者的优点;●可用简单的显微镜观察细胞在微珠表面的生长情况;●简化了细胞生长各种环境因素的检测和控制,重现性好;●培养基利用率较高;●放大容易;●细胞收获过程不复杂;●劳动强度小;●培养系统占地面积和空
微载体培养的技术方法
微载体培养是指微载体以微小颗粒作为细胞贴附的载体,可提供相当大的贴附面积,由于载体体积很小,比重较轻,在轻度搅拌下即可使得细胞悬浮在培养液内,最终能够使细胞在载体表面繁殖成单层的一种细胞培养技术。
微载体的主要类型介绍
国际市场上出售的微载体商品的类型已经达十几种以上,包括液体微载体、大孔明胶微载体、聚苯乙烯微载体、PHEMA微载体、甲壳质微载体、聚氨酯泡沫微载体、藻酸盐凝胶微载体以及磁性微载体等。常用商品化微载体有三种:Cytodex1、2、3,Cytopore和Cytoline。
微载体的定义和应用
中文名称:微载体英文名称:microcarrier定义:细胞培养中所使用的一类无毒性、非刚性、密度均一、通常是透明的小颗粒。能使依赖贴壁的细胞在悬浮培养时贴附在颗粒表面单层生长,从而增加细胞贴附生长的面积,有利于细胞的大规模培养和收集。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科);方法与技术(二级学科
微载体的主要应用方向
●在细胞方面,如细胞群体、状态和类型。 ●在微载体方面,如微载体表面状态、吸附的大分子和离子;微载体表面光滑时细胞扩展快,表面多孔则扩展慢。 ●在培养环境中,如培养基组成、温度、pH、DC以及代谢废物等均明显影响细胞在微载体上的生长。如果所处条件最优,则细胞生长快;反之生长速度慢。 5. 微载
微流控芯片与微阵列(生物)芯片对比
微流控芯片微阵列(生物)芯片主要依托学科分析化学、MEMS生物学、MEMS结构特征微管道网络微探针阵列工作原理微管道中流体控制生物杂交为主使用次数重复使用数十次至数千次一般一次前处理功能多数技术供选择无集成化对象化学、生命科学等领域高密度杂交反应阵列应用领域全部分析领域DNA等专用生物领域产业化程度
实现病毒载体和基因治疗商业化可扩展性和再现性探讨
近年来,病毒载体介导的基因治疗领域迅速发展,包括体内外直接疗法和基于细胞的方法。然而,基因治疗在商业成功之路上也面临诸多挑战。本文将探讨基因治疗药物商业化进程需要战略和技术制造创新支持的三个非常重要的领域。如果我们要克服当前供需失衡,有效地发挥基因治疗的巨大潜力,在这些关键领域的成功将是至关重要的。
微载体培养操作要点
●培养初期:保证培养基与微球体处于稳定的PH与温度水平,接种细胞(对数生长期,而非稳定期)至终体积1/3的培养液中,以增加细胞与微载体接触的机会。不同的微载体所用浓度及接种细胞密度是不同的。常使用2-3g/L的微载体含量,更高的微载体浓度需要控制环境或经常换液。●贴壁阶段(3-8d)后,缓慢加入培养
LNP制备:微流控法与乙醇注入法对比
近年来,研究者们开发了很多新型脂质类载体,如脂质体纳米粒 (LNP)。LNP 由可离子化阳离子脂质 DLinDMA、二硬脂酰磷脂酰胆碱 (DSPC)、胆固醇 (cholesterol) 和 PEG-DMA包载基因药物而形成。目前常用过膜挤压法、乙醇注射技术等方法制备。制备过程中,质粒的水相溶液、脂类
微载体的三个方面
●在细胞方面,如细胞群体、状态和类型。●在微载体方面,如微载体表面状态、吸附的大分子和离子;微载体表面光滑时细胞扩展快,表面多孔则扩展慢。●在培养环境中,如培养基组成、温度、pH、DC以及代谢废物等均明显影响细胞在微载体上的生长。如果所处条件最优,则细胞生长快;反之生长速度慢。5. 微载体培养操作要
一次性生物反应器性能介绍
这是目前比较新的一类生物反应器,它的体积从10ml到2m3不等,可用于如下领域:疫苗生产、蛋白重组、筛选试验等等。一次性生物反应器的核心组成部分是带有预先灭菌功能的培养容器,它的制作材料非常特殊,只能进行单次使用,不可以重复利用,故此称之为一次性生物反应器。不同类型的培养在材料的选取、结构设计、功率
一次性生物反应器,如何选择?
过去十年,随着一次性技术的发展,一次性生物反应器被广泛的应用在生物制药尤其是单抗和疫苗的研发、中试以及生产中。使用一次性生物反应器的好处是显而易见的,它们占地面积小,免去清洗、灭菌和相关的验证,使厂房设计变得更加灵活,节约固定投资的成本和对能源的消耗,同时也更容易生产不同的产品。当然任何新的技术在
一次性生物反应器选型指南
过去十年,随着一次性技术的发展,一次性生物反应器被广泛的应用在生物制药尤其是单抗和疫苗的研发、中试以及生产中。使用一次性生物反应器的好处是显而易见的,它们占地面积小,免去清洗、灭菌和相关的验证,使厂房设计变得更加灵活,节约固定投资的成本和对能源的消耗,同时也更容易生产不同的产品。当然任何新的技术在被
赛多利斯携生物制药完整解决方案亮相China-Pharm-2013
2013年10月29日-11月1日第十八届中国国际医药工业展览会(China-Pharm 2013) 在上海新国际博览中心隆重举行。赛多利斯中国盛装出席此次盛会,展示产品涵盖了细胞培养与发酵、过程控制技术(PAT)、纯化、过滤、液体处理和实验室技术等,全面呈现了生物制药工艺的完整解决方案。
一次性生物反应器的发展和应用
对于动物细胞一次性生物反应器而言,其类型的选择主要取决于如下因素:培养生物量、细胞株特性等,同时,反应器的Zda培养体积和流体参数、剪切力分布以及混合时间等技术指标也同样重要。以波浪式为例,此类反应器具备低剪切力的特点,适用于对剪切力较为敏感的细胞株。目前,生产规模在500L以上的一次性生物反应器的
一次性生物反应器的类型有哪些?
一次性生物反应器的研究集中在以下几种类型上:摇动式、搅拌式、波浪混合式,这些类型的生物反应器全可以为细胞提供良好的生长环境,相关试验结果表明,Zda细胞密度与蛋白产量可以达到不锈钢生物反应器的水平。随着此类反应器的不断发展和研究的逐步深入,其培养规模与应用范围随之进一步扩大,细胞株、干细胞均可用其进
一次性生物反应器优异的放大性能
在过去几年中,一次性的生物反应器已经在现代生物制药工艺中逐步得到应用(1, 2),这因为该技术能够增加灵活性,降低投资及操作成本。此外,一次性技术还可提升产量,缩短药物上市时间(3)。如今对于哺乳动物细胞和昆虫细胞培养而言,市场上已经有许多一次性生物反应器可供选择,但可供微生物培养的一次性解决方案
固定床的简介
固定床是在进行多相过程的设备中,若有固相参与,且处于静止状态时,则设备内的固体颗粒物料层。 在进行 多相过程的 设备中,若有 固相参与,且处于 静止状态时,则设备内的固体颗粒物料层,称为 固定床。 例如,固定床离子交换柱中的 离子交换树脂层,固定床催化反应器中的 催化剂颗粒层,固定床吸附器中
固定床的简介
固定床是在进行多相过程的设备中,若有固相参与,且处于静止状态时,则设备内的固体颗粒物料层。 在进行 多相过程的 设备中,若有 固相参与,且处于 静止状态时,则设备内的固体颗粒物料层,称为 固定床。 例如,固定床离子交换柱中的 离子交换树脂层,固定床催化反应器中的 催化剂颗粒层,固定床吸附器中
回顾和预测-现代生物制药为何青睐一次性生物反应器?
一次性反应技术近年来逐渐成为生物制药企业、CDMO公司的选择,由于其污染风险少、清洁、验证成本低的特点,备受业内好评。一次性技术选择不仅仅为生物制药企业和CDMO公司带来一种创新方向的选择,更重要的是在生产过程中,可极大缩短建设投产时间、降低占地面积、缩短药物研发的等待时间等。本文将系统围绕着一次性
关于动物乳腺生物反应器的表达载体介绍
制备乳腺生物反应器的关键是保证目的蛋白特异性在乳腺中的高效表达,传统表达载体都是选用某种乳蛋白基因的调控序列作为启动子元件。已经克隆并用作构建载体的乳蛋白基因主要有β-乳球蛋白(BLG)基因、aS1-酪蛋白基因、β-酪蛋白基因、乳清酸蛋白(WAP)以及乳清白蛋白基因。
动物细胞大规模培养用生物反应器(bioreactor)简介
动物细胞培养技术能否大规模工业化、商业化,关键在于能否设计出合适的生物反应器(bioreactor)。由于动物细胞与微生物细胞有很大差异,传统的微生物反应器显然不适用于动物细胞的大规模培养。首先必须满足在低剪切力及良好的混合状态下,能够提供充足的氧以供细胞生长及细胞进行产物的合成。一、生物反应器分类
微流控芯片与传统实验的反应时间对比
微流控芯片有着较大的比表面积,一般为10000-50000m2/m3,相对传统的玻璃容器而言,玻璃容器则需要通过搅拌,以此来提高反应物的接触面积。芯片上大的比表面积和相接触表面积,使得反应时间大大缩短,从而增加了实验转化率。 转化率与各因素的关系如下图反应时间对转化率的影响不同直径微管道
凝聚胺法与微柱凝聚法检测不规则抗体的对比
临床输血安全保障日益受到重视,随着试剂及技术的改进,过去因血型鉴定灵敏度方面的误差所引起的严重输血反应已鲜有报道。人类红细胞有29个血型系统,不规则抗体在正常人群中检出率为0.3%-2%。抗体筛查是输血前常规检查,其目的是保障输血安全。采用一种灵敏度高,特异性好,结果准确的检测方法对患者输血前或者供