IPKine™新型二抗解决方案在免疫共沉淀法后IPWB实验的验...

IPKine™新型二抗解决方案在免疫共沉淀法后IP-WB实验的验证方法免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。 当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留了下来。当用预先固化在argarose beads上的蛋白质A的抗体免疫沉淀A蛋白,那么与A蛋白在体内结合的蛋白质B也能一起沉淀下来。再通过蛋白变性分离,对B蛋白进行检测,进而证明两者间的相互作用。这种方法得到的目的蛋白是在细胞内与兴趣蛋白天然结合的,符合体内实际情况,得到的结果可信度高。这种方法常用于测定两种目标蛋白质是否在体内结合;也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。原理:当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留了下来。当用预先固化......阅读全文

肿瘤细胞的荧光免疫表型和-FISH-共分析实验

实验材料 正常鼠血清鼠单克隆抗地髙辛抗体鼠抗 FITC 抗体AMCA-亲和素FITC-亲和素生物素化山羊抗亲和素抗体Cy3 标记的亲和素Cy3 标记的山羊抗鼠抗体Cy3 标记的兔抗山羊抗体Cy3 标记的驴抗兔抗体Cy3 标记的兔抗鼠抗体 地高辛标记的山羊抗鼠抗FITC 标记的驴抗鼠抗体FIT

肿瘤细胞的荧光免疫表型和-FISH-共分析实验

            实验材料 正常鼠血清 鼠单克隆抗地髙辛抗体 鼠抗 FITC 抗体 AMCA-亲和素 FITC-亲和素 生物素化山羊抗亲和素抗体

肿瘤细胞的荧光免疫表型和-FISH-共分析实验

染色体畸变通常在大多数血液肿瘤和各种实体瘤中检测到,在临床病理上,经常与判定肿瘤的直接形态和免疫表型特征有关。染色体畸变的检测为逐条诊断和肿瘤遗传分类奠定了基础。尤其在白血病和淋巴瘤中,许多主要的染色体畸变与疾病的临床分期有关。另外,在肿瘤预后过程中,还将发生其他染色体的畸变。因此,细胞遗传学结果对

FITC荧光二抗?——EarthOx新型DyLight-488绿色荧光

FITC(Fluorescein Isothiocyanate,异硫*酸荧光素)是一种绿色荧光团,在免疫学实验里,经常被用于荧光团标记到相应的检测分子,如抗体上。FITC的纯品为黄色或橙黄色结晶粉末,易溶于水和酒精溶剂。FITC分子量为389.4,最大吸收光波长为 490~495nm,最大发射光波长

免疫沉淀法的技术特点

免疫沉淀法(Immunoprecipitation, IP)是一种研究蛋白质间交互作用的生物技术,这种技术是将蛋白质视为抗原,并利用抗体与之进行特异性结合的特性,来进行研究。这项技术可用来将含有上千种不同蛋白质的样品中,分离和浓缩出特定蛋白质。进行免疫沉淀法时,抗体需要和一个受质结合。

免疫沉淀法的主要类型

个别免疫沉淀法(IP):用来分离某个细胞萃取物中的已知特定蛋白质免疫共沉淀法(Co-IP):研究整个蛋白质复合体染色质免疫沉淀法(ChIP):用来研究DNA上的特定蛋白质RNA免疫沉淀法(RIP):和ChIP相近,但RNA免疫沉淀法是用来研究会与RNA结合的蛋白质RIP技术(RNA Binding

聚乙二醇沉淀法浓缩蛋白质实验

实验方法原理聚乙二醇(PEG)是一个非离子水溶性多聚体,使用 PEG 沉淀蛋甶质时,只在个别浓度下才使蛋白质稍有变性。由于 PEG 溶解时散热低,形成沉淀的子衡时间短等特点,使它在蛋白质的组分分离以及结晶中成为一个有用的试剂。通常 PEG 终浓度达 30% 时,蛋白质就能够达到最大量沉淀。实验材料蛋

聚乙二醇沉淀法浓缩蛋白质实验

实验方法原理 聚乙二醇(PEG)是一个非离子水溶性多聚体,使用 PEG 沉淀蛋甶质时,只在个别浓度下才使蛋白质稍有变性。由于 PEG 溶解时散热低,形成沉淀的子衡时间短等特点,使它在蛋白质的组分分离以及结晶中成为一个有用的试剂。通常 PEG 终浓度达 30% 时,蛋白质就能够达到最大量沉淀。

聚乙二醇沉淀法浓缩蛋白质实验

聚乙二醇法             实验方法原理 聚乙二醇(PEG)是一个非离子水溶性多聚体,使用 PEG 沉淀蛋甶质时,只在个别浓度下才使蛋白质稍有变性。由于 PEG 溶解时散

山羊抗兔二抗(HRP标记)在诸多文献中的应用

在免疫学实验中,比如WB,IHC,IF等,大家都知道选着好正确的一抗,往往实验就成功了一大半,因此,往往很多研究者便会忽视对二抗,以及其它试剂盒品质的追求。二抗是一种相对而言比较稳定的产品,包装大,因此很多实验室都会公用一个二抗。但如果二抗没有选择好的话,影响的可能就是一整个实验室或者课题组了。艾美

BSA、封闭血清与Fab单链二抗在封闭实验中的应用

免疫学实验中,尝尝会出现高背景值,影响实验结果的检测。这是因为在使用相关免疫学试剂时,蛋白与未吸附的固体载相结合,发生非特异性结合造成的。免疫学实验中常通过封闭试剂来封闭这样的固相载体部位,以减少或消除非特异性结合背景的影响。常见的封闭剂包括脱脂奶粉、牛血清白蛋白BSA、动物血清和Fab片段单链二抗

免疫组化中一抗与二抗有什么要求

比如一抗是鼠抗人,二抗必须是×抗鼠的。×表示可以是羊,兔,马等。一抗是单抗,二抗是多抗,是抗一类同种异型的Ig,带有特殊的可产生发光现象的标记。条件允许尽量选择进口,一抗abcam,Santa,CST等值得信赖,二抗的话国产的就行了。源性一抗如果需要做共定位,那么就需要不同源性的且要能够用于人组织的

中国乙肝疫苗免疫后儿童抗HBc的流行情况

  近期发表于《VACCINE》上的一篇题为“The prevalence of hepatitis B core antibody in vaccinated Chinese children: A hospital-based study”的文章根据大样本调查,对中国儿童乙肝疫苗免疫后状态进行了

酶联免疫吸附实验(ELISA)-全套解决方案

基本原理  1971年Engvall和Perlmann发表了酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)用于IgG定量测定的文章,使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法。这一方法的基本原理是:①使抗原或抗

免疫学实验抗核仁抗体介绍

  抗核仁抗体介绍:   核仁呈现荧光染色阳性,提示存在抗核仁核糖核酸抗体。SSc或与SSc重叠的其他风湿病可呈阳性。   抗核仁抗体正常值:    阴性。   抗核仁抗体临床意义:   阳性:硬皮病、干燥综合征及其他风湿病可呈阳性。   抗核仁抗体注意事项:    正常人可有5%的阳

免疫学实验抗Sa抗体介绍

  抗Sa抗体介绍:  抗Sa抗体是Despres等于1994年报告的出现于类风湿性关节炎患者血清中的一种自身抗体。靶抗原(Sa抗原)最初发现于人脾,之后又在人胎盘、类风湿滑膜翳中发现,可能是人体的正常组织成分。用免疫印迹技术分析,人脾中Sa抗原分子量为50kD,而人胎盘Sa抗原为50和55kD两种

免疫学实验抗线粒体抗体介绍

抗线粒体抗体介绍:  抗线粒体抗体(AMA)由Maokey等于1958年首次于原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis,PBC)患者血清发现,是一种无器官特异性也无种属特异性的自身抗体,以后的研究发现,AMA也见于其他自身免疫病患者。AMA的靶抗原是线粒体膜上的多种蛋白

免疫学实验抗心肌抗体介绍

抗心肌抗体介绍:  早在1937年,Brokman等在研究风湿热时,用盐水提取的心脏组织浸出液为抗原,建立补体结合试验,在82%的风湿热患者中检出了抗心肌抗体。迄今60余年来,这方面的研究一直没有间断,除采用经典的间接免疫荧光试验(以人和大鼠的心组织为抗原片)外,还用过火棉胶(collodion)粒

免疫学实验抗磷脂抗体介绍

抗磷脂抗体介绍:  在系统性风湿性疾病的诊断中,抗磷脂抗体这个词包括多种特异性不同的自身抗体。靶抗原为带负电荷的阴离子磷脂,如心磷脂。它们在自身免疫性患者血清中的反应性需要辅助因子(β2-糖蛋白Ⅰ即载脂蛋白H)。抗磷脂抗体可以导致梅毒试验假阳性反应,即VDRL阳性或螺旋体特异性抗体试验阴性而心磷脂-

免疫学实验抗Ku抗体介绍

  抗Ku抗体介绍:   抗Ku抗体是由Mimori等于1981年报道的。他们发现一例全身性硬化症/多发性肌炎重叠综合征患者(Ku)的血清能与一种DNA结合蛋白发生沉淀反应。这种核蛋白称为Ku抗原,对胰蛋白酶敏感,但不被DNase和RNase破坏;加热(37℃30min或56℃15min)和pH改

免疫学实验抗精子抗体介绍

  抗精子抗体介绍:   男性体内的血睾屏障可使精子与免疫系统隔离,但当此种屏障因疾病或创伤受损时,精子或其可溶性膜抗原逸出,可导致机体产生抗精子自身抗体(AsAb),从而抑制精子的活动与受精,造成男性不育。正常女性生殖道具有酶系统,能降解进入的精子抗原,但此种酶系统的缺陷可使精子抗原保持完整而刺

免疫学实验抗硬皮病70抗体

抗硬皮病-70抗体介绍:  抗硬皮病-70抗体是DNA拓扑异构酶Ⅰ(相对分子质量100 000)的降解产物,抗Scl-70抗原是细胞核内的碱性核蛋白,所产生的相应抗体Scl-70是属于抗核抗体的一种类型,现在已经证实抗Scl-70抗体是为系统性硬皮病的标记抗体。抗硬皮病-70抗体正常值:  正常呈阴

免疫学实验抗甲状腺抗体介绍

抗甲状腺抗体介绍:  包括甲状腺球蛋白抗体、甲状腺微粒体抗体、TSH受体的抗体等,抗体均具有器官特异性及种属特异性(与灵长穆有交叉反应),具有疾病典型性,但不具疾病特异性。主要属IgG抗体,很少为IgA及IgM。抗甲状腺抗体正常值:  抗甲状腺微粒体抗体(抗-TM)(-)  抗甲状腺球蛋白抗体(抗-

免疫学实验抗ENA抗体介绍

  抗ENA抗体介绍:   抗ENA抗体称盐水可提取性核抗原的抗体。是抗小分子细胞核核糖核蛋白(snRNPs)和小分子细胞浆核糖核蛋白(scRNPs)的自身抗体,不含组蛋白。主要有七种:抗Sm抗体 、抗SS-A/Ro抗体、抗SS-B/ La抗体、抗Scl-70抗体、抗Jo-1抗体、抗U1-RNP抗

Bruker-Daltonics在ASMS上展示新型质谱和解决方案

2008年6月2日,丹佛,商业电讯——布鲁克道尔顿今天在ASMS(美国质谱大会)发布了一系列新的高性能质谱产品和应用: maXis™,是第一个高速超高分辨率的飞行时间(UHR-TOF)质谱仪,代表了串联质谱的一场革命,它具有精确质量、跨越全质量范围的超高分辨率,高灵敏度的出众性能,而且所有这些性能

放射免疫沉淀法

中文名称放射免疫沉淀法英文名称radioimmunoprecipitation定  义以放射性标记的抗原或抗体进行的免疫沉淀法。能大大提高检测抗原抗体复合体的灵敏度。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

妙用乌梅治验二则

  案1  刘某,女,42岁,2003年11月初诊。患者3月前曾患感冒发热,病后形瘦乏力,胃纳不佳,西医诊断为消化功能障碍,服补中益气汤、六君子汤之类,效果不佳。刻诊:面色少华,胃中时有灼热,食欲不振,头昏乏力,大便量少不爽,小便短。舌质红,少苔,脉弦细无力。辨证属气阴两虚,胃阴不足,肝木乘土,

关于免疫沉淀实验一抗的选择介绍

  某些目的蛋白因为没有对应的特异性抗体而无法进行免疫沉淀,如抗体所识别的抗原表位被相互作用所遮蔽,无法与目的蛋白相互作用或抗体选择不合适,所选抗体不能识别处于天然构象的蛋白等,可以采用一个表位标记蛋白质,再选择针对此表位的标签抗体来进行免疫沉淀。(铭研生物提供的标签抗体用于IP实验,涉及FLAG、

免疫荧光共标记怎么计算共标记的细胞个数

共定位的定义:共定位是对样品内两种荧光标记的信号共同分布的位置进行分析。 共定位就如字面意思上所说的,只能够表明蛋白A和B都在此细胞有表达,并且在同样的细胞内位置/细胞器。相关短语:共定位通道 PDM Channel 细胞共定位 Cellular co localization 细胞内共定位信息 c

免疫学实验抗环瓜氨酸多肽抗体(抗CCP)介绍

  抗环瓜氨酸多肽抗体(抗CCP)介绍:  抗环瓜氨酸多肤抗体(anti-cyclic peptide containing citrulline,anti-CCP):是环状聚胍蛋白的多肤片段,以IgG型为主的抗体。抗CCP抗体是由RA患者B淋巴细胞自发分泌 的,而其他疾病患者和正常人群B淋巴细胞并