IPKine™新型二抗解决方案在免疫共沉淀法后IPWB实验的验...

IPKine™新型二抗解决方案在免疫共沉淀法后IP-WB实验的验证方法免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。 当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留了下来。当用预先固化在argarose beads上的蛋白质A的抗体免疫沉淀A蛋白,那么与A蛋白在体内结合的蛋白质B也能一起沉淀下来。再通过蛋白变性分离,对B蛋白进行检测,进而证明两者间的相互作用。这种方法得到的目的蛋白是在细胞内与兴趣蛋白天然结合的,符合体内实际情况,得到的结果可信度高。这种方法常用于测定两种目标蛋白质是否在体内结合;也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。原理:当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留了下来。当用预先固化......阅读全文

免疫学实验抗环瓜氨酸多肽抗体(抗CCP)介绍

  抗环瓜氨酸多肽抗体(抗CCP)介绍:  抗环瓜氨酸多肤抗体(anti-cyclic peptide containing citrulline,anti-CCP):是环状聚胍蛋白的多肤片段,以IgG型为主的抗体。抗CCP抗体是由RA患者B淋巴细胞自发分泌 的,而其他疾病患者和正常人群B淋巴细胞并

沉淀DNA的实验——乙醇沉淀法

沉淀DNA的实验可应用于分离DNA。实验方法原理DNA 溶液是DNA以水合状态稳定存在,当加入乙醇时,乙醇会夺DNA周围的水分子,使DNA失水而易于聚合。一般实验中,是加2倍体积的无水乙醇与DNA相混 合,其乙醇的最终含量占67%左右。因而也可改用95%乙醇来替代懈水乙醇(因为无水乙醇的价格远远比9

Bruker-Daltonics在ASMS上展示新型质谱和解决方案

2008年6月2日,丹佛,商业电讯——布鲁克道尔顿今天在ASMS(美国质谱大会)发布了一系列新的高性能质谱产品和应用: maXis™,是第一个高速超高分辨率的飞行时间(UHR-TOF)质谱仪,代表了串联质谱的一场革命,它具有精确质量、跨越全质量范围的超高分辨率,高灵敏度的出众性能,而且所有这些性能

关于抗传染免疫—抗寄生虫免疫的介绍

  与抗病原微生物免疫有很大的不同。机体只对少数寄生虫感染有保护性免疫,对多数寄生虫感染,宿主所产生的获得性免疫不足以彻底消灭机体内的全部寄生虫,但对同株或同种寄生虫的再感染有较强的抵抗力。寄生虫多为较复杂的单细胞或多细胞生物,其本身成分以及其分泌物、排泄物的抗原组成远比微生物复杂。在寄生期间,有些

抗传染免疫—抗细菌免疫的基本信息介绍

  抗细菌免疫—细菌感染通常分为两大类:  ①细菌基本在宿主的细胞外存活,这类感染叫做细胞外感染;  ②细菌大部分时间在宿主细胞内存活,这类感染叫做细胞内感染。体液免疫在抵抗细胞外感染(包括常见的化脓性细菌感染)方面起很大作用。抗体有几种作用:①协助吞噬细胞进行吞噬(调理作用);  ②中和毒素的毒性

妙用乌梅治验二则

  案1  刘某,女,42岁,2003年11月初诊。患者3月前曾患感冒发热,病后形瘦乏力,胃纳不佳,西医诊断为消化功能障碍,服补中益气汤、六君子汤之类,效果不佳。刻诊:面色少华,胃中时有灼热,食欲不振,头昏乏力,大便量少不爽,小便短。舌质红,少苔,脉弦细无力。辨证属气阴两虚,胃阴不足,肝木乘土,

免疫学实验抗组蛋白抗体介绍

抗组蛋白抗体介绍:  组蛋白是核内最丰富的蛋白质,它与DNA构成的复合物称为染色质。染色质最基本的亚单位结构是核小体(nucleosome),它由146个碱基对组成的DNA链缠绕8个组蛋白分子(2个H2A-H2B杂二聚体之间夹着2个杂二聚体H2-H4)2圈构成的核心和核心外的组蛋白H1与连结DNA(

免疫学实验抗麸质抗体介绍

  抗麸质抗体介绍:   抗麸质抗体(IgA-GA)是麦胶性肠病患者中产生的一种自身抗体,属IgA。麸质中含有麦胶蛋白,又名醇溶蛋白,是引起麦胶性肠病的主要原因,该物质不能被患者吸收,而且成为致病因子,并刺激抗体产生抗麸质抗体。   抗麸质抗体正常值:    待定。   抗麸质抗体临床意义:

免疫学实验抗隐球菌抗体介绍

  抗隐球菌抗体介绍:  新型隐球菌(Cryptococus Neoformans)革兰染色阳性,呈球型。主要侵犯中枢神经系统和肺,人体抵抗力降低是发病的主要因素,临床上最常见的是亚急性或慢性脑膜炎、肺部感染、皮肤和黏膜损害。抗隐球菌抗体检查对临床鉴别诊断有一定价值。  抗隐球菌抗体正常值:   阴

免疫学实验抗红细胞抗体介绍

抗红细胞抗体介绍:  抗红细胞抗体(RBC抗体)于1904年由Donatht和Landsteiner首次报道,是人体内第一个被阐明的自身抗体,现称为Donath—Landsteiner(DL)抗体。共分为温抗体(WAS)、冷凝集素抗体(CAs)、DL抗体三大类。该抗体能引起自身免疫性溶血性贫血(AH

免疫学实验抗核抗体(ANA)介绍

  抗核抗体(ANA)介绍:   泛指抗各种细胞核成分的抗体,是一种广泛存在的自身抗体。   抗核抗体(ANA)正常值:   间接免疫荧光法: 小于 1:10(阴性)。   抗核抗体(ANA)临床意义:   增高:见于系统性红斑狼疮、混合性结缔组织病、硬皮病、类风湿关节炎、干燥综合征、药物

免疫学实验抗透明带抗体介绍

抗透明带抗体介绍:  透明带(zona pellucida,ZP)是围绕在卵细胞周围的一圈无结构、嗜酸性的明胶样物质,由卵细胞及其外围的卵泡细胞于卵的生长发育过程中共同分泌而成,是由4条多肽链通过二硫键结合的糖蛋白,具有很强的免疫原性,ZP能诱发机体产生全身或局部的细胞与体液免疫反应,产生抗透明带抗

免疫学实验抗网蛋白抗体介绍

  抗网蛋白抗体介绍:   抗网状蛋白自身抗体是一种IgA抗体,其在麦胶性肠病患者中的发病机制中起何作用尚未明了,在麦胶性肠病患者中血液可发现网状蛋白的IgA抗体。此种抗体的作用还需随着科技发展而不断开发。   抗网蛋白抗体正常值:   待定   抗网蛋白抗体临床意义:   异常结果:抗网

免疫学实验抗心磷脂抗体介绍

抗心磷脂抗体介绍:  抗磷脂抗体是一组针对各种酸性磷脂的自身抗体的总称,包括抗心磷脂抗体、抗磷脂酰乙醇胺、抗磷脂酰丝氨酸、抗磷脂酰甘油和抗磷脂酸等,其中又以抗心磷脂抗体最具有代表性,它的靶抗原是存在于细胞膜和线粒体膜中带负电荷的心磷脂,为甘油磷脂类结构。ACL可通过干扰凝血酶原转变成为凝血酶,阻止凝

免疫学实验抗桥粒自身抗体介绍

  抗桥粒自身抗体介绍:  抗桥粒自身抗体是天疱疮的特异性标志抗体,常结合临床、组织学和免疫病理来确诊天疱疮。其靶抗原有3种:Dsg1,为叶状天疱疮抗体的主要靶抗原;Dsg2,存在于各种上皮细胞中;Dsg3,为寻常天疱疮(PV)抗体的主要靶抗原。抗桥粒自身抗体常用间接免疫荧光法检测:染色模式为特征性

免疫学实验抗心肌磷脂抗体介绍

抗心肌磷脂抗体介绍:  抗心肌磷脂抗体是一组针对各种带负电荷磷脂的自身抗体。包括抗心肌磷脂、抗磷脂酰丝氨酸、抗磷脂酰胺醇、抗磷脂酰甘油、抗磷脂酸等的抗体,可作为抗磷脂抗体综合征(包括血栓形成、自发性流产、血小板减少和中枢神经系统病变等)的诊断指标之一。抗心肌磷脂抗体正常值:  正常人血清中ACL测定

免疫学实验抗胃壁细胞抗体介绍

  抗胃壁细胞抗体介绍:  抗胃壁细胞抗体(PCA)由Taylor等首次于恶性贫血病人血清中发现,其靶抗原定位于壁细胞分泌小管微绒毛的膜内,是胞浆内的微粒体部分和胞质膜上的一种脂蛋白。PCA有器官特异性,不与胃以外的其他脏器反应,但无种属特异性,故可用大鼠或兔的胃壁细胞作抗原。PCA的Ig类别主要为

免疫学实验-抗内因子抗体介绍

抗内因子抗体介绍:  抗内因子抗体是针对内因子的一种自身抗体,属于IgG。抗内因子抗体可存在于患者血清、胃液与唾液中。抗内因子抗体可引起胃黏膜萎缩、抑制内因子活性和使血中维生素B12浓度下降,导致恶性贫血及神经系统症状。测定抗内因子抗体对恶性贫血的诊断有一定帮助。抗内因子抗体正常值:  阴性。文献报

包涵体蛋白溶解后的重折叠实验(二)

二、对该常规操作流程的评论1. 大肠杆菌中重组蛋白的过表达获得高水平表达与重折叠是不同的主题,在此不会进一步讨论(可见本部分的第12章 )。许多系统可以获得占总细胞蛋白质1 0 % 〜4 0 % 的目标蛋白质表达水平(Mak r i d e s,1996; M u r b y et al.,

酸化丙酮/甲醇沉淀法实验

试剂、试剂盒 盐酸丙酮甲醇实验步骤 材料盐酸(高纯;如 J,T-Baker 的 Ultrex 级)丙酮(高纯;如 Aldrich 的金标级)甲醇(高纯;如 Aldrich 或 Burdick&Jackson 的最同市售级)操作程序本操作程序是根据 Current Protocolsin Molecu

酸化丙酮/甲醇沉淀法实验

试剂、试剂盒 盐酸丙酮甲醇实验步骤 材料盐酸(高纯;如 J,T-Baker 的 Ultrex 级)丙酮(高纯;如 Aldrich 的金标级)甲醇(高纯;如 Aldrich 或 Burdick&Jackson 的最同市售级)操作程序本操作程序是根据 Current Protocolsin Molecu

酸化丙酮/甲醇沉淀法实验

酸化丙酮/甲醇沉淀法实验             试剂、试剂盒 盐酸 丙酮 甲醇

酸化丙酮/甲醇沉淀法实验

TCA 沉淀的另一有用的替代方法是使用酸化的丙酮-甲醇混合液。酸化有助于通过将去垢剂溶于有机相而蛋白质产生沉淀以去除样品中的 SDS。丙酮和甲醇都能以任何比例溶解于水中,因此不会发生相分离。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。试剂、试剂盒盐酸丙酮甲醇实验步骤材料盐酸(高纯;如 J,T

用酸沉淀法浓缩蛋白质实验——丙酮沉淀法

实验材料含蛋白质的样品试剂、试剂盒丙酮(或其他有机溶剂如乙醇或甲醇)仪器、耗材Eppendorf 管(小塑料离心管)Eppendorf 管离心机(小型台式离心机)混旋器实验步骤1. 加 1 ml冷丙酮(-20℃)至 200 ul 样品溶液,混匀。2. -20℃: 放置 10 min。3. 小型台式离

免疫组化的一抗和二抗浓度和孵育时间有什么要求

一抗孵育温度有几种:4度、室温、37度,其中4度效果最佳;孵育时间与温度、抗体浓度有关,一般37度1-2h,4度过夜(从冰箱拿出后37度复温45min)。具体条件还要摸索。二抗一般室温或37度30min-1h,浓度一般有工作液,若是浓缩液还要摸索浓度。

免疫组化的一抗和二抗浓度和孵育时间有什么要求

一抗孵育温度有几种:4度、室温、37度,其中4度效果最佳;孵育时间与温度、抗体浓度有关,一般37度1-2h,4度过夜(从冰箱拿出后37度复温45min)。具体条件还要摸索。二抗一般室温或37度30min-1h,浓度一般有工作液,若是浓缩液还要摸索浓度。

免疫组化的一抗和二抗浓度和孵育时间有什么要求

一抗孵育温度有几种:4度、室温、37度,其中4度效果最佳;孵育时间与温度、抗体浓度有关,一般37度1-2h,4度过夜(从冰箱拿出后37度复温45min)。具体条件还要摸索。二抗一般室温或37度30min-1h,浓度一般有工作液,若是浓缩液还要摸索浓度。

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免疫组化的一抗和二抗浓度和孵育时间有什么要求

一抗孵育温度有几种:4度、室温、37度,其中4度效果最佳;孵育时间与温度、抗体浓度有关,一般37度1-2h,4度过夜(从冰箱拿出后37度复温45min)。具体条件还要摸索。二抗一般室温或37度30min-1h,浓度一般有工作液,若是浓缩液还要摸索浓度。

免疫组化的一抗和二抗浓度和孵育时间有什么要求

一抗孵育温度有几种:4度、室温、37度,其中4度效果最佳;孵育时间与温度、抗体浓度有关,一般37度1-2h,4度过夜(从冰箱拿出后37度复温45min)。具体条件还要摸索。二抗一般室温或37度30min-1h,浓度一般有工作液,若是浓缩液还要摸索浓度。