酸化丙酮／甲醇沉淀法实验
TCA 沉淀的另一有用的替代方法是使用酸化的丙酮-甲醇混合液。酸化有助于通过将去垢剂溶于有机相而蛋白质产生沉淀以去除样品中的 SDS。丙酮和甲醇都能以任何比例溶解于水中，因此不会发生相分离。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。试剂、试剂盒盐酸丙酮甲醇实验步骤材料盐酸（高纯；如 J,T-Baker 的 Ultrex 级)丙酮（高纯；如 Aldrich 的金标级)甲醇（高纯；如 Aldrich 或 Burdick&Jackson 的最同市售级)操作程序本操作程序是根据 Current Protocolsin Molecular Biology —书改进而成的1) 配制酸化丙酮：丙酮 &n......阅读全文
酸化丙酮/甲醇沉淀法实验
试剂、试剂盒 盐酸丙酮甲醇实验步骤 材料盐酸（高纯；如 J,T-Baker 的 Ultrex 级)丙酮（高纯；如 Aldrich 的金标级)甲醇（高纯；如 Aldrich 或 Burdick&Jackson 的最同市售级)操作程序本操作程序是根据 Current Protocolsin Molecu
酸化丙酮/甲醇沉淀法实验
试剂、试剂盒 盐酸丙酮甲醇实验步骤 材料盐酸（高纯；如 J,T-Baker 的 Ultrex 级)丙酮（高纯；如 Aldrich 的金标级)甲醇（高纯；如 Aldrich 或 Burdick&Jackson 的最同市售级)操作程序本操作程序是根据 Current Protocolsin Molecu
酸化丙酮/甲醇沉淀法实验
酸化丙酮/甲醇沉淀法实验 试剂、试剂盒 盐酸 丙酮 甲醇
酸化丙酮/甲醇沉淀法实验
TCA 沉淀的另一有用的替代方法是使用酸化的丙酮-甲醇混合液。酸化有助于通过将去垢剂溶于有机相而蛋白质产生沉淀以去除样品中的 SDS。丙酮和甲醇都能以任何比例溶解于水中，因此不会发生相分离。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。试剂、试剂盒盐酸丙酮甲醇实验步骤材料盐酸（高纯；如 J,T
用酸沉淀法浓缩蛋白质实验——丙酮沉淀法
实验材料含蛋白质的样品试剂、试剂盒丙酮（或其他有机溶剂如乙醇或甲醇）仪器、耗材Eppendorf 管（小塑料离心管）Eppendorf 管离心机（小型台式离心机）混旋器实验步骤1. 加 1 ml冷丙酮（-20℃）至 200 ul 样品溶液，混匀。2. -20℃： 放置 10 min。3. 小型台式离
丙酮沉淀法具体怎么做
1、在4度下，1：1或相应比例向蛋白质中加入丙酮（一般用20%-50%的丙酮沉淀蛋白），在冰域中温和的搅拌10-15分钟；2、低温10000g离心10分钟，除去上清液，用以沉淀体积的2倍体积的冷缓冲液悬浮。丙酮沉淀应该注意的是：1、此过程容易使蛋白质变性，所以有很多情况下复溶的时候会出现沉淀不溶的现
住区大气中甲醇、丙酮卫生检验标准方法（气相色谱法）
居住区大气中甲醇、丙酮卫生检验标准方法(气相色谱法)标准号：GB/T11738-89本标准规定了用气相色谱法测定居住区大气中甲醇、丙酮的浓度。本标准适用于居住区大气中甲醇、丙酮浓度的侧定。检出下限对甲醇、内酮的检出下限为2*10-3(进1ul样品溶液)。当采样体积为5L时，甲醇、丙酮zui低检出浓度
沉淀DNA的实验——乙醇沉淀法
沉淀DNA的实验可应用于分离DNA。实验方法原理DNA 溶液是DNA以水合状态稳定存在，当加入乙醇时,乙醇会夺DNA周围的水分子，使DNA失水而易于聚合。一般实验中,是加2倍体积的无水乙醇与DNA相混 合,其乙醇的最终含量占67%左右。因而也可改用95%乙醇来替代懈水乙醇(因为无水乙醇的价格远远比9
磷酸化蛋白鉴定实验
实验材料测序级膜蛋白酶试剂、试剂盒二硫苏糖醇碘代乙酰胺乙酸溶液甲酸乙酰氯仪器、耗材螯合琼脂糖凝胶层析介质实验步骤这里所述的方法概括为下列几个步骤：胰蛋白酶水解消化膜和可溶性组分中的蛋白质（见 24. 3.1 )；固相金属螯合亲和层析（IMAC) 富集磷酸肽（见 24. 3. 2 )；用串联质谱对磷酸
磷酸化蛋白鉴定实验
实验材料测序级膜蛋白酶 试剂、试剂盒二硫苏糖醇 碘代乙酰
磷酸化蛋白鉴定实验
实验材料 测序级膜蛋白酶试剂、试剂盒 二硫苏糖醇碘代乙酰胺乙酸溶液甲酸乙酰氯仪器、耗材 螯合琼脂糖凝胶层析介质实验步骤 这里所述的方法概括为下列几个步骤：胰蛋白酶水解消化膜和可溶性组分中的蛋白质（见 24. 3.1 )；固相金属螯合亲和层析（IMAC) 富集磷酸肽（见 24. 3. 2 )；用串
用酸沉淀法浓缩蛋白质实验——三氯醋酸沉淀法
实验材料含蛋白质的样品试剂、试剂盒100％三氯醋酸（TCA）0.1N NaOH（400 mg NaOH 溶于 100 ml 蒸馏水）实验步骤1. 在 1ml 样品中至少要含有 5mg 蛋白质。加 100 ul 100％ 的三氯醋酸（TCA），混匀；2. 将蛋白质在冰浴中沉淀 30 min （或在冷冻
丙酮酸激酶的测定实验
实验方法原理PK，ATP：丙酮酸磷酸转移酶。有其他激酶的伴随，这个反应的直接实验：例如，可以应用 P32 标记。由分光光度测定出，这个反应与 LDH 反应偶联，继续 NADH 的氧化反应：实验材料酶样品试剂、试剂盒三乙醇胺-HCl KOHKClMgCl2磷酸烯醇式丙酮酸ADPNADHLDH仪器、耗材
苯丙酮尿定性检查实验
实验方法原理 苯丙酮酸与三价铁离子产生蓝色反应，干扰显色导致假阴性反应的磷酸盐被变成磷酸铵镁而除去．试剂、试剂盒 三氯化铁溶液磷酸盐沉剂依盐酸实验步骤 一、实验试剂：1、三氯化铁溶液，称取FeCl6?6H2O 10g，用蒸馏水溶解并稀释至100毫升．2、磷酸盐沉剂：取氯化镁（MgCl2?6H2O）2
丙酮酸激酶的测定实验
实验方法原理 PK，ATP：丙酮酸磷酸转移酶。有其他激酶的伴随，这个反应的直接实验：例如，可以应用 P32 标记。由分光光度测定出，这个反应与 LDH 反应偶联，继续 NADH 的氧化反应：实验材料 酶样品试剂、试剂盒 三乙醇胺-HCl KOHKClMgCl2磷酸烯醇式丙酮酸ADPNADHLDH仪器
丙酮酸激酶的测定实验
基本方案 实验方法原理 PK，ATP：丙酮酸磷酸转移酶。有其他激酶的伴随，这个反应的直接实验：例如，可以应用 P32 标记。由分光光度测定出，这个反应与 LD
苯丙酮尿定性检查实验
实验方法原理苯丙酮酸与三价铁离子产生蓝色反应，干扰显色导致假阴性反应的磷酸盐被变成磷酸铵镁而除去．试剂、试剂盒三氯化铁溶液磷酸盐沉剂依盐酸实验步骤一、实验试剂：1、三氯化铁溶液，称取FeCl6?6H2O 10g，用蒸馏水溶解并稀释至100毫升．2、磷酸盐沉剂：取氯化镁（MgCl2?6H2O）2.3克
有机溶剂沉淀法浓缩蛋白质实验——有机溶剂沉淀法
实验方法原理将有机溶液例如丙酮和乙醇加入蛋白质溶液时，和高浓度盐类似产生沉淀，这是因为它们能够降低蛋白质的溶解度。在温度为 10 ℃ 左右时蛋白质在有机溶剂中容易变性，所以在沉淀时必须特别注意冷却溶液和离心转头（0 ℃～4 ℃ 为佳），建议离子强度为 0.05～0.2 mol/L。有机溶剂的浓度按体
表达蛋白检测实验_免疫沉淀法
实验方法原理使用强大的晚期基因启动子表达的重组蛋白可以用放射性氨基酸标记，再用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测。当使用早期或晚期基因启动子时，利用标记蛋白免疫沉淀能提高灵敏性和特异性。试剂、试剂盒磷酸缓冲液（PBS）细胞裂解液[35S]蛋氨酸或[35S]半胱氨酸仪器、耗材完全 MEM-5 培养基（含和不含蛋氨
酶法检测磷酸化实验
实验方法原理实验材料 含 100～200 μg 总蛋白的样品试剂、试剂盒 50 mmol L NN'-2-羟丙磺酸哌嗉(PIPES)Sephadex G-25 柱（可选）PIPES 2－ME 或 RPERS DTT 缓冲液马铃薯酸性磷酸酶2 × SDS－PAGE 样品缓冲液100 mmol
酶法检测磷酸化实验
基本方案1 非特异酸性磷酸酶消化磷酸蛋白质 基本方案2 丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶消化磷酸蛋白质 实验方法原理实验材料 含 100～200 μg 总蛋白的样品 试
磷酸化位点分析实验磷酸化位点的确定
实验方法原理 磷酸化位点的确定也使用一些通用方法；磷酸化蛋白质被纯化，如果可能蛋白质要均一；磷蛋白被特异性的化学或酶反应切断、产生肽混合物，其中含有一到两个磷酸肽不同之处在干其分离磷酸肽的策略是为了确定氨基酸序列，定位肽段内磷酸化的残基。上面所述的分离方法， 2D-PP 作图、 HPLC 或 l
磷酸化位点分析实验磷酸化位点的确定
磷酸肽的化学测序 磷酸肽的质谱分析 源后衰变 用酶和化学方法去磷酸化 实验方法原理 磷酸化位点的确定也使用一
免疫沉淀法浓缩蛋白质实验
实验方法原理通过免疫沉淀，用蛋白质特异性抗体能够定量分离目的蛋白。免疫沉淀法由三个步骤组成。首先将特异性抗体加入细胞提取物，第二步加入经化学固定的金黄色葡萄球菌，以确保形成大量沉淀。这些细菌通过蛋白质 A 和抗体形成复合物，蛋白质 A 与免疫球蛋白的 Fe 部分有高度的亲和性。或者说，纯化的蛋白质
醋酸钠乙醇沉淀法核酸纯化实验
实验方法原理 核酸是多聚阴离子的水溶性化合物，可以与许多1价、2价离子结合形成盐类，后者在有机溶剂中不溶解也不变性．在较低温度下形成沉淀．实验材料 待纯化样本试剂、试剂盒 醋酸钠缓冲液无水乙醇70%乙醇实验步骤 实验试剂：1. 3mol／L醋酸钠缓冲液，pH5.2：称取醋酸钠（NaAC·3H20）4
免疫沉淀法浓缩蛋白质实验
免疫沉淀法 实验方法原理 通过免疫沉淀，用蛋白质特异性抗体能够定量分离目的蛋白。免疫沉淀法由三个步骤组成。首先将特异性抗体加入细胞提取物，第二步加入经化学固定
用酸沉淀法浓缩蛋白质实验
实验方法原理 实验材料 含蛋白质的样品试剂、试剂盒 100％三氯醋酸（TCA）0.1N NaOH（400 mg NaOH 溶于 100 ml 蒸馏水）实验步骤 1. 在 1ml 样品中至少要含有 5mg 蛋白质。加 100 ul 100％ 的三氯醋酸（TCA），混匀；2. 将蛋白质在冰浴中沉淀 30
免疫沉淀法浓缩蛋白质实验
实验方法原理 通过免疫沉淀，用蛋白质特异性抗体能够定量分离目的蛋白。免疫沉淀法由三个步骤组成。首先将特异性抗体加入细胞提取物，第二步加入经化学固定的金黄色葡萄球菌，以确保形成大量沉淀。这些细菌通过蛋白质 A 和抗体形成复合物，蛋白质 A 与免疫球蛋白的 Fe 部分有高度的亲和性。或者说，纯化的蛋
用酸沉淀法浓缩蛋白质实验
三氯醋酸沉淀法 丙酮沉淀法 实验方法原理 实验材料 含蛋白质的样品
醋酸钠乙醇沉淀法核酸纯化实验
实验方法原理核酸是多聚阴离子的水溶性化合物，可以与许多1价、2价离子结合形成盐类，后者在有机溶剂中不溶解也不变性．在较低温度下形成沉淀．实验材料待纯化样本试剂、试剂盒醋酸钠缓冲液无水乙醇70%乙醇实验步骤实验试剂：1. 3mol／L醋酸钠缓冲液，pH5.2：称取醋酸钠（NaAC·3H20）408.1