细胞组织消化常用的几种酶的选择
直接从生物体获取的组织,一般需要将其消化成单个细胞才能进行体外培养。这种直接从离体组织获得的细胞,更接近于生物体内的生活状态,且生物性状尚未发生很大改变,因此在药物筛选、细胞移植、类器官培养、肿瘤研究等众多领域备受欢迎。但组织消化过程中常遇到多种问题,例如消化不完全、细胞死亡率高等。如何克服这些问题,其实消化酶的选择是关键。 本文将为您介绍一些常用的消化酶及其适用组织,并为您罗列多种正常和肿瘤组织消化方案,供您参考。 来了解组织消化过程中常用的酶吧~ 1.胰蛋白酶 胰蛋白酶(Trypsin)是目前应用最广泛的消化试剂,通过作用于与赖氨酸或精氨酸相连接的肽腱,除去细胞间粘蛋白及糖蛋白,影响细胞骨架,从而使细胞分离。胰蛋白酶适用于消化细胞间质较少的软组织,如胚胎、上皮、肝、肾等组织。但对于纤维组织和较硬的癌组织的效果差,常常将胰蛋白酶与其他消化酶联合使用。EDT......阅读全文
细胞组织消化常用的几种酶的选择
直接从生物体获取的组织,一般需要将其消化成单个细胞才能进行体外培养。这种直接从离体组织获得的细胞,更接近于生物体内的生活状态,且生物性状尚未发生很大改变,因此在药物筛选、细胞移植、类器官培养、肿瘤研究等众多领域备受欢迎。但组织消化过程中常遇到多种问题,例如消化不完全、细胞死亡率高等。如何克服这些问题
如何选择合适细胞的消化酶重组胰酶和动物源胰酶
培养细胞的老师们都知道细胞的生命是极其脆弱的在培养过程中有哪些行为是比较伤害细胞的呢?在培养贴壁细胞过程中消化过程在一定程度上是对细胞的一种折磨但是又不得不进行这个过程所以如何做好细胞消化善待细胞们是我们一定要了解的步骤~ 胰酶的作用原理胰酶是一种蛋白酶,酶切位点是肽链的Lys或Arg两个残基的羧基
几种常用的转染方法
一、物理-化学方法 脂质体转染法:采用脂质体转染试剂,将遗传物质如质粒, siRNA等转移至细胞内。 此种方法易于操作且不需要许多步骤或特殊的专业知识。通常情况下,你只需要一种转染试剂和一种兼容的生长培养基 (通常是低血清且具有良好的缓冲作用,使细胞在转染过程中保持活性)。不同的厂商有自己的
常用的几种电桥介绍
由电阻、电容、电感等元件组成的四边形测量电路叫电桥。人们常把四条边称为桥臂。作为测量电路,在四边形的一条对角线两端接上电源,另一条对角线两端接指零仪器。调节桥臂上某些元件的参数值,使指零仪器的两端电压为零,此时电桥达到平衡。利用电桥平衡方程Z1Z3=Z2Z4,即可根据桥臂中已知元件的数值求得被测
常用的几种分子标记
RAPD利用 10 个碱基的一个或几个随机引物非定点地扩增 DNA 片段,一般一个引物可扩增 6-12 条 DNA 片段,利用凝胶电泳分开扩增的片段,从而进行基因多态性研究。 RAPD 是一种能快速进行基因多态性研究的技术,并且由于不涉及印迹杂交、放射性自显影等技术,因此简便易行。 SSR 真核生物
Western-Blot细胞组织裂解液的选择
裂解液是**普遍使用的蛋白提取试剂,可根据文献或经验自行配制,也可购买商业化的产品。常见的细胞裂解液有 NP40、Triton X-100、RIPA buffer 等。下表是根据目的蛋白的不同定位选择裂解液的建议。虽然裂解液的使用范围比较广泛,能够满足总蛋白的提取,但是无法做到特异蛋白的提取,特别是
关于酶消化法的胰蛋白酶消化的基本介绍
1、加入消化液:小心吸出旧培养液,用PBS清洗(冲洗),加入适量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以盖住细胞最好,在37℃培养箱消化2min。 2、显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察消化细胞,若细胞质回缩,细胞间不再连接成片,表明此时细胞消化适度。 3、加入培养液:更换吸管,加入新鲜的培养
如何选择合适的消化炉?
消化炉是定氮仪的重要组成部分,对于蛋白质的检测也有非常重要的作用,因此选择一胎合适的消化炉,是准确开展蛋白质检测的前提,那么对于企业而言,如何去选择合适的消化炉呢?要想选择一台合适的消化炉,那么就首先要了解消化炉指标有哪些,需要注意什么,比如:1.能有效的控制温度变化的过程,以免消化时的样品挂壁。2
消化酶的作用
消化酶就是辅助肠,胃等器官消化```所有的消化器官就组成了消化道,食物在消化道中,所以消化酶只有分泌到消化道中才起作用,消化道和其他不一样,如果消化酶分泌到了其他器官,他们会承受不住消化酶的酸性,就会损害。消化酶只有分泌到消化道中才起作用 ,同时,只有消化道腺体才分泌消化酶。
几种常用的蛋白鉴定方法
传统的蛋白鉴定方法,如免疫印迹法、内肽的化学测序、已知或未知蛋白的comigration分析,或者在一个有机体中有意义的基因的过表达通常耗时、耗力,不适合高流通量的筛选。 目前,所选用的技术包括对于蛋白鉴定的图象分析、微量测序、进一步对肽片段进行鉴定的氨基酸组分分析和与质谱相关的技术。
几种常用的蛋白鉴定方法
传统的蛋白鉴定方法,如免疫印迹法、内肽的化学测序、已知或未知蛋白的comigration分析,或者在一个有机体中有意义的基因的过表达通常耗时、耗力,不适合高流通量的筛选。 目前,所选用的技术包括对于蛋白鉴定的图象分析、微量测序、进一步对肽片段进行鉴定的氨基酸组分分析和与质谱相关的技术。 1
几种分析电路的常用方法
常用分析电路的方法有以下几种: 1、直流等效电路分析法 在分析电路原理时,要搞清楚电路中的直流通路和交流通路。直流通路是指在没有输入信号时,各半导体三极管、集成电路的静态偏置,也就是它们的静态工作点。交流电路是指交流信号传送的途径,即交流信号的来龙去脉。 在实际电路中,交流电路与直流电路共
几种常用的蛋白鉴定方法
几种常用的蛋白鉴定方法 传统的蛋白鉴定方法,如免疫印迹法、内肽的化学测序、已知或未知蛋白的 comigration分析,或者在一个有机体中有意义的基因的过表达通常耗时、耗力,不适合高流通量的筛选。 目前,所选用的技术包括对于蛋白鉴定的图象分析、微量测序、进一步对肽片段进行鉴定的氨基
菌种保存的几种常用方法
微生物具有容易变异的特性,因此,在保藏过程中,必须使微生物的代谢处于zui不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。 低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素,所以,菌种保藏方法虽多,但都是根据这三个因素而设计的。 保藏方法大致可分为以下几种:
多肽常用的几种水解方法
虽然多肽合成的氨基酸组成分析方法较多,且趋向更灵敏、更精确、更简便、更快速,但还没有一种方法可以单独适用于所有氨基酸残基的检测,并且很多因素如温度、时间、水解试剂、水解方法及多肽合成样品中添加剂等对水解程度均有影响。常用的水解方法作简要介绍如下: 1.酸性水解酸性水解是应用最为广泛水解方法,可以使大
几种常用的灭菌方法汇总
物理灭菌法(一)加热灭菌法加热可破坏微生物中酶、蛋白质和核酸,导致微生物死亡。加热灭菌又分干热灭菌法和湿热灭菌法。在同一温度下,湿热灭菌的效果比干热灭菌好。主要是因湿热灭菌时,有水分存在,蛋白质容易变性。水分又易使微生物膜壁润湿,湿热的穿透力比干热大。干热灭菌法 常用的有火焰灭菌法与干热空气灭菌法
菌种保藏的几种常用方法
基本原理 微生物具有容易变异的特性,因此,在保藏过程中,必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。 低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素,所以,菌种保藏方法虽多,但都是根据这三个因素而设计的。 保藏方法大致可
常用的几种流量计
污水流量计按计量原理分类: 1、流量计有节省式流量计、毕保管流量计、均速管流量计、转子流量计、靶式流量计,这些流量计是运用伯努利方程原理,经过丈量流体差压信号反映流量;(延伸阅览…文丘里流量计) 2、流量计有涡轮流量计、涡街流量计、电磁流量计、多普勒超声波流量计、测速流量计,这些是经过丈量流体流速来
几种常用的蛋白鉴定方法
传统的蛋白鉴定方法,如免疫印迹法、内肽的化学测序、已知或未知蛋白的comigration分析,或者在一个有机体中有意义的基因的过表达通常耗时、耗力,不适合高流通量的筛选。 目前,所选用的技术包括对于蛋白鉴定的图象分析、微量测序、进一步对肽片段进行鉴定的氨基酸组分分析和与质谱相关的技术。
几种常用的蛋白鉴定方法
传统的蛋白鉴定方法,如免疫印迹法、内肽的化学测序、已知或未知蛋白的comigration分析,或者在一个有机体中有意义的基因的过表达通常耗时、耗力,不适合高流通量的筛选。 目前,所选用的技术包括对于蛋白鉴定的图象分析、微量测序、进一步对肽片段进行鉴定的氨基酸组分分析和与质谱相关的技术。1 图象
几种常用的热电偶
1、铂铑10-铂热电偶组成: 由φ0)5mm的纯铂丝和直径相同的铂铑丝制成,分度号为S。铂铑丝为正极,纯铂丝为负极。 2)特点:热电性能好,抗氧化性强,宜在氧化性、惰性气氛中连续使用。长期适用的温度为1400℃,超过此温度时,即使在空气中纯铂丝也将再结晶而使晶粒增大。短期使用温度为
食品检测中常用的消化方法
在实际工作中,除了单独使用硫酸的消化方法外,经常采取几种不同的氧化性酸类配合使用,利用各种酸的特点,取长补短,以达到安全、快速、完全破坏有机物的目的。几种食品检测常用的消化方法如下:(1)单独使用硫酸的消化方法此法在样品消化时,仅加入硫酸,在加热的情况下,依靠硫酸的脱水炭化作用,破坏有机物。由于硫酸
几种常用生理盐溶液的配制
生理性溶液为代体液,用于维持离体的组织、器官及细胞的正常生命活动。它必须具备下列条件:⑴渗透压与组织也相等;⑵应含有组织、器官维持正常机能所必需的比例适宜的各种盐类离子;⑶酸碱度应与血浆相同,并具有充分的缓冲能力;⑷应含有氧气和营养物质。1.常用生理溶液的配制方法动物实验中常用的生理盐溶液有生理盐水
几种常用生理盐溶液的配制
生理性溶液为代体液,用于维持离体的组织、器官及细胞的正常生命活动。它必须具备下列条件:⑴渗透压与组织也相等;⑵应含有组织、器官维持正常机能所必需的比例适宜的各种盐类离子;⑶酸碱度应与血浆相同,并具有充分的缓冲能力;⑷应含有氧气和营养物质。1.常用生理溶液的配制方法动物实验中常用的生理盐溶液有生理盐水
常用的比色法有几种?
常用的比色法有两种:目视比色法和光电比色法,前者用眼睛观察,后者用光电比色计测量,两种方法都是以朗伯-比尔定律(见紫外-可见分光光度法)为基础。
常用的物理镀膜方法有几种
一.光学镀膜材料(纯度:99.9%-99.9999%) 1. 高纯氧化物: 一氧化硅、SiO,二氧化铪、HfO2,二硼化铪,氯氧化铪,二氧化锆、ZrO2,二氧化钛、TiO2,一氧化钛、TiO,二氧化硅、SiO2,三氧化二钛、Ti2O3,五氧化三钛、Ti3O5,五氧化二钽、Ta2O5,五氧化二铌、
常用的几种细胞破碎方法介绍
细胞破碎方法简述 随着重组DNA技术得到广泛应用以来,生物技术发生了质的飞跃。很多基因工程产物都是胞内物质,必须将细胞破壁,使产物得以释放,才能进一步提取,因此细胞破碎是提取胞内产物的关键步骤,破碎方法的得当与否,直接影响到所提取产品的产量、质量和生产成本。现将近年来常用的几种细胞破碎方法介绍一
常用的液位计有哪几种
液位计有连通器式、吹泡式、差压式、电容式等,测量物位的有超声波物位计和放射性物位计等。连通器式就是应用最普通的玻璃液位计,它的特点是结构简单、价廉、直观,适于现场使用,但易破损,内表面沾污,造成读数困难,不便于远传和调节。超声波物位计是利用超声波在气体、液体或固体中的衰减、穿透能力和声阻抗不同的性质
关于污水COD常用的几种分类
污水COD的分类有很多种,不同的分类有不同的叫法。 按污水来源分类,污水处理一般分为生产污水处理和生活污水处理。生产污水包括工业污水、农业污水以及医疗污水等,而生活污水就是日常生活产生的污水,是指各种形式的无机物和有机物的复杂混合物,包括:①漂浮和悬浮的大小固体颗粒;②胶状和凝胶状扩散物;③纯
几种常用的样品前处理方法
一、溶剂提取法 同一溶剂中,不同物质具有不同的溶解度。利用混合物中各物质溶解度的不同将混合物组分完全或部分分离的过程称为萃取,也称提取,常用方法有以下几种: 1.浸提法: 浸提法又称浸泡法。用于从固体混合物或有机体中提取某种物质,所采用的提取剂,应既能大量溶解被提取的物质,又要不破坏被提取