RTqPCR常用的SYBR@GreenI双链DNA结合染料的应用
随着新冠病毒肆虐全球，聊病毒是个敏感话题。今天我们就从这个敏感话题着手，好好聊一聊。 病毒是一种个体微小，结构简单，只含一种核酸（DNA或RNA）。我们现在提起来就咬牙切齿的的新冠病毒（COVID-19），就是一种RNA病毒。当然除了COVID-19，我们常听到的其他臭名昭著之辈，如艾滋病病毒、流感病毒、登革热病毒、烟草花叶病毒、噬菌体等均属于RNA病毒。这些RNA病毒让之所以让我们谈虎色变，是因为很多RNA病毒具有非常强的侵略能力，会严重影响宿主生命活动。如何精准地检测到病毒（定性）？如何有效判定出样本中的病毒含量（定量）？借助分子生物学技术可以精准检测病原体，其中的一步法RT-qPCR技术可被广泛用于RNA病毒类型判定、病毒亚型判定、病毒定量及病毒突变体等方面，广泛用于食品安全、动物疫病、疾病诊断与治疗效果......阅读全文
RTqPCR常用的SYBR@Green－I双链DNA结合染料的应用
随着新冠病毒肆虐全球，聊病毒是个敏感话题。今天我们就从这个敏感话题着手，好好聊一聊。 病毒是一种个体微小，结构简单，只含一种核酸（DNA或RNA）。我们现在提起来就咬牙切齿的的新冠病毒（COVID-19），就是一种RNA病毒。当然除了COVID-19，我们常听到的其他臭
双链DNA结合域的结构和作用
双链DNA结合域，DNA结合蛋白中与双链DNA结合的结构域。 双杂交系统的基础是在一些转录因子上发现的模域(modular domains)：一个DNA结合域，它可以结合一段特异的DNA序列，和一个转录激活域，这个转录激活域与基础转录机制相作用。
细胞化学词汇双链DNA结合域
中文名称：双链DNA结合域外文名称：dsDNA-binding domain定 义：双链DNA结合域，DNA结合蛋白中与双链DNA结合的结构域。作 用：双杂交系统的基础是在一些转录因子上发现的模域(modular domains)：一个DNA结合域，它可以结合一段特异的DNA
双链RNA结合域的特点
中文名称双链RNA结合域英文名称dsRNA-binding domain定 义双链RNA或RNA中的双链区能被特异蛋白质所结合的区域。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级学科）
双链DNA的结构特点
中文名称双链DNA英文名称double-stranded DNA;dsDNA定 义由两条DNA单链通过碱基互补作用而构成的DNA分子。应用学科遗传学（一级学科），分子遗传学（二级学科）
双链DNA的结构特点
中文名称双链DNA英文名称double-stranded DNA;dsDNA定 义由两条DNA单链通过碱基互补作用而构成的DNA分子。应用学科遗传学（一级学科），分子遗传学（二级学科）
DNA双链末端的概念
中文名称平端英文名称blunt end定 义DNA双链末端平齐而无突出单链。应用学科遗传学（一级学科），分子遗传学（二级学科）
双链互补DNA的定义
中文名称双链互补DNA英文名称double-strand cDNA;dscDNA定 义以双链互补DNA为模板合成的双链DNA。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级学科）
大肠杆菌－DNA－－I－Klenow－片段及单链－DNA－模板进行双脱氧实验
试剂、试剂盒 dATP 去离子蒸馏水 EDTA 延伸 终止混合液 和示踪混合液 甲酰胺上样缓冲液 Tris-Cl
单链DNA结合蛋白的功能简介
单链DNA结合蛋白（Single-stranded DNA-binding protein，缩写SSB或SSBP）又称单链结合蛋白，是专门负责与DNA单链区域结合的一种蛋白质，为DNA复制、重组和修复所必需的成分。 防止两条互补单链再次结合为双螺旋，维持单链状态。防止单链区域形成链内二级结构。
DNA结合染料对细胞核的多色标记技术的多种应用
DNA结合染料对细胞核的多色标记技术 细胞核是动物细胞器中最大的。在哺乳动物细胞中，核的平均直径约为6μm，约占总细胞体积的10％。核包含细胞的大部分遗传物质，组织成多个长线性DNA分子，与多种蛋白质（例如组蛋白）复合形成染色体。这些染色体内的基因是细胞的核基因组。核的功能是维持这些基因的完整性，并
单链DNA结合蛋白的基本内容
单链结合蛋白（SSB，single strand DNA-binding protein）：结合于螺旋酶沿复制叉方向向前推进产生的单链区，防止新形成的单链DNA重新配对形成双链DNA或被核酸酶降解的蛋白质。 螺旋酶沿复制叉方向向前推进产生了一段单链区，但是这种单链DNA不会长久存在，会很快重新
抗双链DNA抗体(aniDNA)的简介
抗DNA抗体包括抗双链DNA抗体、抗单链DNA抗体和抗zDNA抗体。 检验中一般是指与双链DNA和单链DNA都反应的抗双链DNA抗体。 抗双链DNA抗体阳性是系统性红斑狼疮的标志，阳性率达90%以上，有较高的特异性，因而抗双链DNA抗体对系统性红斑狼疮的诊断和治疗监控极重要。抗双链DNA抗体在其
细胞化学词汇双链DNA
中文名称：双链DNA英文名称：double-stranded DNA;dsDNA定 义：由两条DNA单链通过碱基互补作用而构成的DNA分子。应用学科：遗传学（一级学科），分子遗传学（二级学科）
双链DNA探针标记法
分子生物研究中，最常用的探针即为双链DNA探针，它广泛应用于基因的鉴定、临床诊断等方面。 双链DNA探针的合成方法主要有下列两种:切口平移法和随机引物合成法。 1.切口平移法(nick translation) 当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可将核苷酸连
DNA双链体的结构和功能
中文名称DNA双链体英文名称DNA duplex定 义两条以3′，5′-磷酸二酯键相连而成的反向多核苷酸链通过沿着其轴向的互补碱基对的氢键交联在一起形成的双链DNA，通常形成双螺旋的结构。可以共价闭合成环状分子，形成超螺旋DNA。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级学科）
限制酶切割双链DNA的方式
限制酶切割双链DNA的方式有两种，产生的末端也有两种：第一种是交错切割，即两条链的切点不在同一水平而是相隔数个碱基，故断口产生两小段自身互补的单链，这种末端容易互补连接，称为粘性末端（cohesive terminus）；第二种为平整切割。
双链DNA探针标记法的介绍
分子生物研究中,最常用的探针即为双链DNA探针,它广泛应用于基因的鉴定、临床诊断等方面。 双链DNA探针的合成方法主要有下列两种:切口平移法和随机引物合成法。 切口平移法(nick translation) 当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可将核苷酸连接到
抗双链DNA抗体的检测方法
检测抗DNA抗体的方法有多种，如ELISA、IIF、金标法、免疫印记法、放免法等。其中最特异敏感的是应用锥虫或血鞭毛虫（如绿蝇短膜虫）作基质测定抗dsDNA抗体。因为这些血寄生虫的动基体内含大量的纯dsNDA，无其他抗原干扰；在阳性结果时，可见鞭毛一端的动基体显示清晰的荧光。因此该试验用于测定抗
细胞化学词汇双链RNA结合域
中文名称；双链RNA结合域英文名称：dsRNA-binding domain定 义：双链RNA或RNA中的双链区能被特异蛋白质所结合的区域。应用学科：生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级学科）
如何判断提取的DNA是高纯度的双链DNA
首先：可以通过分光光度计A 260 / A 280的比值,用于评估样品的纯度,因为蛋白的吸收峰是 280 nm.纯净的样品,比值大于 1.8（DNA）或者2.0（RNA）.如果比值低于 1.8 或者2.0,表示存在蛋白质或者酚类物质的影响.A 230表示样品中存在一些污染物,如碳水化合物,多肽,苯酚
Realtime－qPCR手册手把手教你从菜鸟到高手
3.3 SYBR@Green 法SYBR@Green I是一种结合于小沟中的双链DNA结合染料，与双链DNA结合后，其荧光大大增强。这一性质使其用于扩增产物的检测非常理想。SYBR@Green I 的最大吸收波长约为497nm，发射波长最大约为520nm。在PCR反应体系中，加入过量SYBR@Gre
压片法常用的染料
压片法常用的染料(1) 醋酸洋红 为压片法中最常用的染料。配制方法是：先将100 毫升45% 醋酸水溶液放于烧瓶中煮沸，移去火焰，停止加热。然后缓慢加入1 克洋红粉末，全部加入后再煮沸1-2 分钟。此时可将一枚生锈铁钉用棉线悬入溶液中约1 分钟后取出（铁为媒染剂）。静置12 小时后经过过滤，放入磨口
关于抗双链DNA抗体的基本介绍
抗双链DNA抗体是抗DNA抗体中的一种，是系统性红斑狼疮（SLE）的血清学标志物，而且是临床上最常进行的一项实验室检测指标。SLE是一种常见的慢性自身免疫性疾病，其发病原因和机制尚未明确，通常认为，是由于细胞和体液免疫紊乱，机体正常的免疫耐受性受损，导致对自身组织产生免疫反应而出现组织损害。抗d
抗双链DNA抗体的临床意义
抗dsDNA自身抗体是SLE的最重要的自身抗体，检出率40%～70%.高滴度抗dsDNA的存在是SLE诊断的重要依据，也是疾病活动性特别是肾脏损伤的标志。除用于SLE的诊断外，也可用于临床病程和治疗效果的监测，对判断预后也有一定价值。但也有人报道在肝脏疾病、青少年型类风湿性关节炎，乃至正常人中发
简述抗双链DNA抗体的检测方法
1、间接免疫荧光法（IIF）：以绿蝇短膜虫虫体为包被基质，其上只含有一个单纯的、完整的dsDNA分子，不含有任何其他物质，特异性好；由于只结合血清中的高亲和力抗体，故灵敏度有一定限制。 2、免疫印迹法（LIA）：综合了十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳高分辨率和酶免疫吸附技术的高特异度，广泛用于
标记双链DNA的3突出端
实验材料限制性内切核酸酶小牛胸腺末端转移酶模板 DNA试剂、试剂盒乙酸铵乙醇酚氯仿末端转移酶缓冲液仪器、耗材Sephadex G-50 离心柱实验步骤一、材料1. 缓冲液和溶液乙酸铵（10 mol/L )乙醇酚：氯仿（1:1，V/V)2. 酶和缓冲液适当的限制性内切核酸酶小牛胸腺末端转移酶5X 末端
解旋酶打开DNA双链过程破解
美国温安洛研究所近日发布公告称，该所科学家和洛克菲勒大学合作，成功破解CMG解旋酶参与真核生物内DNA（脱氧核糖核酸）复制的结构过程，并首次观察到其与DNA间的相互作用。这项发表在美国《国家科学院学报》上的最新研究，为生命繁殖之谜提供了全新注解。 温安洛研究所教授李慧琳（音译）从酵母生物体内提
双链DNA探针切口平移法
当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可将核苷酸连接到切口的3'羟基末端。同时该酶具有从5'→3'的核酸外切酶活性,能从切口的5'端除去核苷酸。由于在切去核苷酸的同时又在切口的3'端补上核苷酸,从而使切口沿着DNA链移动,用
双链DNA探针切口平移法
当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可将核苷酸连接到切口的3'羟基末端。同时该酶具有从5'→3'的核酸外切酶活性,能从切口的5'端除去核苷酸。由于在切去核苷酸的同时又在切口的3'端补上核苷酸,从而使切口沿着DNA链移动,