3D细胞培养:干细胞微载体的应用
干细胞培养方法 当前干细胞最主要的培养方法仍是2D培养,2D培养仅在一个平面上支持干细胞生长,无法再现生物体内细胞真实的3D立体微环境。2D培养环境在生物活性、培养基结构、营养物质的释放等很多方面均远不及3D培养,使干细胞逐渐丧失其原有的性状、形态、结构和功能,导致其研究结果与体内试验结果经常不一致,精确性较低,所提供的培养环境与生物体内微环境差距甚大,必然对干细胞的增殖分化产生负面作用。同时,2D培养增殖效率低,已经无法满足临床干细胞大剂量应用的需求。正是由于2D培养局限性太多,促使国内外学者对3D培养技术和3D培养体系进行深入探索。 (A)在2D培养中生长的从上面(顶部面板)观察图像,细胞表面保持正常形态; (B)在3D培养中生长的从上面(......阅读全文
3D细胞培养:干细胞微载体的应用
干细胞培养方法 当前干细胞最主要的培养方法仍是2D培养,2D培养仅在一个平面上支持干细胞生长,无法再现生物体内细胞真实的3D立体微环境。2D培养环境在生物活性、培养基结构、营养物质的释放等很多方面均远不及3D培养,使干细胞逐渐丧失其原有的性状、形态、结构和功能,导致其
3D细胞培养:干细胞微载体的应用(二)
3D干细胞培养材料需要具备的特点: (1) 三维多孔结构 适宜的空间结构和孔隙率,有利于干细胞的黏附、生长增殖。 (2) 较好的生物相容性 材料对干细胞无毒性作用,可以和干细胞稳定结合,且干细胞在生物体内不会诱发排斥或炎症反应等。 (3) 具备生物可
微载体细胞培养技术及应用原理
微载体细胞培养技术是细胞培养过程中常见的一种细胞培养技术。关于微载体细胞培养技术,以动物细胞为例,具体介绍如下: 一、微载体培养技术的应用 微载体培养技术于1967年被用于动物细胞大规模培养。经过三十余年的发展,该技术目前已渐日趋完善和成熟,并广泛应用于生产疫苗、基因工程产品等。
微载体细胞培养技术及应用原理(二)
5.微载体培养操作要点• 培养初期:保证培养基与微球体处于稳定的PH与温度水平,接种细胞(对数生长期,而非稳定期)至终体积1/3的培养液中,以增加细胞与微载体接触的机会。不同的微载体所用浓度及接种细胞密度是不同的。常使用2-3g/L的微载体含量,更高的微载体浓度需要控制环境或经常换液。• 贴壁阶
微载体细胞培养技术及应用原理(一)
微载体细胞培养技术是细胞培养过程中常见的一种细胞培养技术。关于微载体细胞培养技术,以动物细胞为例,具体介绍如下: 一、微载体培养技术的应用微载体培养技术于1967年被用于动物细胞大规模培养。经过三十余年的发展,该技术目前已渐日趋完善和成熟,并广泛应用于生产疫苗、基因工程产品等。微载体培养是目前公认的
微载体的应用原理
1.原理:其原理是将对细胞无害的颗粒-微载体加入到培养容器的培养液中,作为载体,使细胞在微载体表面附着生长,同时通过持续搅动使微载体始终保持悬浮状态。 贴壁依赖性细胞在微载体表面上的增殖,要经历黏附贴壁、生长和扩展成单层三个阶段。细胞只有贴附在固体基质表面才能增殖,故细胞在微载体表面的贴附是进一步
微载体细胞培养法介绍
(1)微载体选择:先用利用三种小量微载体做培养实验,观察细胞在一定时间内细胞的吸着率和计算细胞数,以得到最大量细胞为佳。(2)水化:称一定量的微载体放入容器中,按每克微载体加50~100ml的比例,加入无Ca2+和Mg2+的磷酸缓冲液(PBS),室温下放置应不少于3小时,并不时轻微搅动,然后再用新鲜
特殊细胞培养实验_微载体细胞培养法
实验方法原理微载体细胞培养开始于60年代末期,最早使用离子交换凝胶作为载体,轻微搅动即可悬液在培养基中,因而可增加细胞附着的面积,达到大量培养细胞的目的。后来,根据细胞附着生长的特点,对微载体进行了改良,使其带有电荷或其它介质,更利于细胞附着和生长。这一方法亦可用于常规量的培养,也可用于大规模的培养
微载体的主要应用方向
●在细胞方面,如细胞群体、状态和类型。 ●在微载体方面,如微载体表面状态、吸附的大分子和离子;微载体表面光滑时细胞扩展快,表面多孔则扩展慢。 ●在培养环境中,如培养基组成、温度、pH、DC以及代谢废物等均明显影响细胞在微载体上的生长。如果所处条件最优,则细胞生长快;反之生长速度慢。 5. 微载
微载体的定义和应用
中文名称:微载体英文名称:microcarrier定义:细胞培养中所使用的一类无毒性、非刚性、密度均一、通常是透明的小颗粒。能使依赖贴壁的细胞在悬浮培养时贴附在颗粒表面单层生长,从而增加细胞贴附生长的面积,有利于细胞的大规模培养和收集。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科);方法与技术(二级学科
高通量药筛必备神器:3D干细胞套装的应用
前面两期我们给大家介绍了我们我们的ZL产品,目前市面上唯一一款获批医疗器械注册资质、药用辅料资质、GMP生产资质的“干细胞摇篮”3D微载体,以及配套的细胞扩增套装和生物反应器,从而形成了一整套的3DFloTrix™干细胞扩增工艺,可以实现干细胞的稳定性,均一,无损的批量生产。
使用3D-FloTrix™细胞扩增套装培养细胞的多种用法(一)
上一期我们给大家介绍了我们全新一代的3D细胞培养材料——市面上唯一一款药用级别原料的微载体,好马配好鞍,只有微载体怎么行?我们还为您准备了一整套适用于细胞大规模扩增的3D FloTrix™细胞扩增套装和3D FloTrix™生物反应器,我们一起来瞧瞧吧! 3D Flo
微载体
实验方法原理 以高浓度接种细胞和微珠,然后按照要求进行稀释、搅拌和取样。 实验材料 起始培养物
微载体
实验方法原理 以高浓度接种细胞和微珠,然后按照要求进行稀释、搅拌和取样。 实验材料 起始培养物
微载体
实验方法原理以高浓度接种细胞和微珠,然后按照要求进行稀释、搅拌和取样。实验材料起始培养物仪器、耗材生长培养基微载体搅拌培养瓶磁力搅拌器实验步骤1. 按照所需最终培养液量的 1/3,以 2~3 g/L 混悬微珠。2. 用胰蛋白酶消化和计数细胞,以正常接种浓度的 3~5 倍将细胞接种到微珠悬液中。3.
3D细胞培养应用领域
1. 高通量药物筛选实验2. 肿瘤球体检测3. 器官再生研究4. 宿主和病原体之间感染模型的研究5. 胚胎干细胞(ES)细胞和诱导式多能性6. 干细胞(iPS)细胞的扩张和分化
微载体实验
实验方法原理 以高浓度接种细胞和微珠,然后按照要求进行稀释、搅拌和取样。实验材料 起始培养物仪器、耗材 生长培养基微载体搅拌培养瓶磁力搅拌器实验步骤 1. 按照所需最终培养液量的 1/3,以 2~3 g/L 混悬微珠。2. 用胰蛋白酶消化和计数细胞,以正常接种浓度的 3~5 倍将细胞接种到微珠悬液中
微载体的分类系统
生物反应器系统此技术大规模培养,细胞扩增的效率受到诸多因素的影响和限制,其中主要的限制性因素包括:细胞对剪切力的敏感性、氧的传递以及传代和扩大培养等。而研制的各种类型生物反应器系统则可针对上述限制性因素,为微载体细胞培养与扩增提供低剪切力、高氧传递效率、易于细胞传代等适宜的外部环境。已较多使用的微载
微载体的基本介绍
自Van Wezel用DEAE-Sephadex A 50 研制的第一种微载体问世以来,国际市场上出售的微载体商品的类型已经达十几种以上,包括液体微载体、大孔明胶微载体、聚苯乙烯微载体、PHEMA微载体、甲壳质微载体、聚氨酯泡沫微载体、藻酸盐凝胶微载体以及磁性微载体等。常用商品化微载体有三种:Cyt
微载体培养的原理
微载体培养技术(micro-carrierculturetechnique)于1967年被用于动物细胞大规模培养。经过三十余年的发展,该技术日趋完善和成熟,广泛应用于生产疫苗、基因工程产品等。 微载体是指直径60-250μm,能适用于贴壁细胞生长的微珠。一般是由天然葡聚糖或者各种合成的聚
什么是微载体?
是指直径在60-250μm,能适用于贴壁细胞生长的微珠。一般是由天然葡聚糖或者各种合成的聚合物组成。
双光子微纳3D打印典型应用
全新推出的QuantumX是世界上基于双光子灰度光刻(2GL®)用于折射和衍射微光学的工业级打印系统。该技术将灰度光刻的优良性能与双光子聚合的准确性和灵活性完美结合在一起,使得同时具备高速打印,最大设计自由度和高精度的特点。 典型应用 1、超材料和先进材料 微纳3D打印为超材料、复合材料、功
微载体技术的培养优点
●表面积/体积(S/V)大,因此单位体积培养液的细胞产率高;●把悬浮培养和贴壁培养融合在一起,兼有两者的优点;●可用简单的显微镜观察细胞在微珠表面的生长情况;●简化了细胞生长各种环境因素的检测和控制,重现性好;●培养基利用率较高;●放大容易;●细胞收获过程不复杂;●劳动强度小;●培养系统占地面积和空
微载体培养的技术特点
●表面积/体积(S/V)大,因此单位体积培养液的细胞产率高; ●把悬浮培养和贴壁培养融合在一起,兼有两者的优点; ●可用简单的显微镜观察细胞在微珠表面的生长情况; ●简化了细胞生长各种环境因素的检测和控制,重现性好; ●培养基利用率较高; ●放大容易; ●细胞收获过程不复杂; ●劳动强
微载体培养的技术方法
微载体培养是指微载体以微小颗粒作为细胞贴附的载体,可提供相当大的贴附面积,由于载体体积很小,比重较轻,在轻度搅拌下即可使得细胞悬浮在培养液内,最终能够使细胞在载体表面繁殖成单层的一种细胞培养技术。
微载体的主要类型介绍
国际市场上出售的微载体商品的类型已经达十几种以上,包括液体微载体、大孔明胶微载体、聚苯乙烯微载体、PHEMA微载体、甲壳质微载体、聚氨酯泡沫微载体、藻酸盐凝胶微载体以及磁性微载体等。常用商品化微载体有三种:Cytodex1、2、3,Cytopore和Cytoline。
微载体的原理与操作
1.原理:其原理是将对细胞无害的颗粒-微载体加入到培养容器的培养液中,作为载体,使细胞在微载体表面附着生长,同时通过持续搅动使微载体始终保持悬浮状态。贴壁依赖性细胞在微载体表面上的增殖,要经历黏附贴壁、生长和扩展成单层三个阶段。细胞只有贴附在固体基质表面才能增殖,故细胞在微载体表面的贴附是进一步铺展
WAVETM-生物反应器中的-Cytodex™-微载体细胞培养工艺(六)
Vero细胞在转瓶 (Spinner Flask)中无血清条件下的微载体培养 Vero细胞也可以在转瓶中进行微载体培养。如图 14 所示,在无血清条件下,WAVE 和转瓶这两种培养系统中可以获得基本相同的最大细胞密度。相比 Cytodex3,Cytodex 1 具有更大的表面积,
WAVETM-生物反应器中的-Cytodex™-微载体细胞培养工艺(三)
结果和讨论 微载体培养的最佳工作体积和混合速度的确定当我们使用 20%到 80%的Cellbag最大工作体积时,微载体培养可以产生均匀的微载体混合分布(图 2)。图 2. 微载体培养的最佳工作体积 在工作体积小于 20%的 Cellbag 最大工作体积时,部分微载体有可能粘在 Cel
WAVETM-生物反应器中的-Cytodex™-微载体细胞培养工艺(五)
MDCK细胞的生长和放大(2% FBS) 为了研究在 Cellbag 生物反应器中 MDCK细胞扩增的可放大性,在两种不同大小的袋子之间比较最大细胞密度和细胞生长速率 Cellbag-10 L和 Cellbag-50 L。 袋子的工作培养体积采用最大工作体积的40%(即Cellbag-1