冷冻电镜样本制备新技术在新冠病毒结构解析的应用1
前言近日,由新型冠状病毒引起的肺炎疾病在武汉和全国各地都形成了一定规模的爆发,已经引起了中国甚至全球的高度重视,那么这个冠状病毒究竟是什么?冠状病毒在系统分类上属冠状病毒科(Coronaviridae),是具外套膜(envelope) 的正链单股RNA病毒,直径约80~120nm。冠状病毒可以引起中东呼吸综合征、严重急性呼吸综合征以及目前正在爆发的新型肺炎。近日,国家病原微生物资源库发布了由中国疾控制中心病毒预防控制所成功分离的我国第一株病毒的电镜照片。 下图中(电子显微镜下的新型冠状病毒武汉株01),黑色箭头所示就是新型冠状病毒,可以看出,病毒的大小约为100纳米。 解析冠状病毒结构,助力疫苗和药物研发目前,我们已知新型冠状病毒是RNA病毒,它的蛋白结构序列还没有确定出来,在分离完毒株之后,则要用冷冻电镜来全面解析病毒的三维结构,从而为开发疫苗和相关的药物奠定基础。2019年,中国科学家利用冷冻电镜技术......阅读全文
冷冻电镜样本制备新技术在新冠病毒结构解析的应用1
前言近日,由新型冠状病毒引起的肺炎疾病在武汉和全国各地都形成了一定规模的爆发,已经引起了中国甚至全球的高度重视,那么这个冠状病毒究竟是什么?冠状病毒在系统分类上属冠状病毒科(Coronaviridae),是具外套膜(envelope) 的正链单股RNA病毒,直径约80~120nm。冠状病毒可以引
冷冻电镜样本制备新技术在新冠病毒结构解析的应用2
现有冷冻电镜样本制备技术的缺陷然而,传统冷冻电镜样本制备方法存在缺陷:1. 以手工或半自动设备,操作复杂,依赖较高的技巧 2. 采用blot方式,大量样品被浪费在滤纸 3. 实验的稳定性和可重复性较差 4. 样品存放的可追溯性差,容易导致样品丢失 总体而言,冷冻电镜的样品制备技术
mosquito在解析新冠病毒复合物结构的应用
2020年2月18日,清华大学生命学院王新泉课题组和医学院张林琦课题组紧密合作,利用X射线衍射技术,解析了新型冠状病毒(2019-nCoV)表面刺突糖蛋白受体结合区(receptor-binding domain, RBD)与人受体ACE2蛋白复合物的晶体结构,准确定位出新冠病
让病毒无所遁形徕卡电镜解决方案在新冠肺炎病毒鉴...1
让病毒无所遁形-徕卡电镜解决方案在新冠肺炎病毒鉴定的应用徕卡显微系统应用专家 肖丽国 2020年,似乎来得更艰难一点。从去年12月份开始,新冠肺炎疫情(COVID-19)就像龙卷风一样席卷全球,当前已在217个国家地区蔓延,全球确诊超2402万例,死亡破82万例。新冠肺炎疫情构成大流行的威胁“已经变
冷冻电镜三维重构解析揭示丝状病毒IKe结构
清华大学医学院向烨研究组与以色列特拉维夫大学Amir Goldbourt组合作于2019年2月28日在《美国科学院院报》(Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, PNAS)杂
清华联合团队曝光“新冠病毒”3D高清结构照
对人类来说,新冠病毒是个“既熟悉又陌生”的存在。它和严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒、中东呼吸综合征(MERS)冠状病毒同属冠状病毒大家庭,是过去18年里第三种导致人类大规模感染的冠状病毒。然而,冠状病毒到底长什么样,一直是个未解之谜。 1月21日,由清华大学生命科学学院李赛实验室和奥地
病毒透射电镜病毒标本制备实验1
悬滴标本法实验方法原理病毒等微小颗粒标本可取其培养物经稀释或分离提纯后直接滴于附有支持膜的载网上用电镜观察。实验材料病毒试剂、试剂盒稀释液仪器、耗材透射电镜实验步骤悬液应尽量除去杂质如培养基残渣,细胞碎片、糖类及各种盐类的结晶等,这些杂质的存在会干扰染色及电镜观察。用该法的缺点是由于电子穿透能力很弱
我国学者使用高分辨冷冻电镜首次解析人类疱疹病毒结构
从中国科学技术大学获悉,该校生命科学学院毕国强教授课题组与同行合作,利用高分辨冷冻电镜单颗粒分析技术首次解析了人类疱疹病毒6B型的近原子分辨率结构。相关研究成果日前在线发表在国际著名期刊《自然·通讯》上。 人类疱疹病毒6型(HHV-6)属于疱疹病毒家族β疱疹病毒亚家族,根据其表面抗原不同,又被
美国研究所基于冷冻电镜揭示新冠病毒的恐怖亲和力
美国国家过敏和传染病研究所疫苗研究中心最近提交的一篇论文对新冠病毒结构进行了研究,并验证了一个结论:新冠病毒 S 蛋白与细胞 ACE2 的亲和力是 SARS 的 10 到 20 倍。 这可能意味着新冠病毒肺炎(COVID-19)的传染性相比 SARS 要高出很多。 这篇最新论文目前被发布在
冷冻电镜新突破!袁曙光团队解析膜蛋白靶标三维结构
近日,中国科学院深圳先进技术研究院医药所计算机辅助药物设计中心袁曙光课题组与德国马普生物物理所合作,利用真实细胞膜冷冻电镜技术,解析了血清素受体5-HT3离子通道的高分率三维精细结构,并通过生物计算系统阐述了其信号转导的分子原理。相关成果发表于《自然—通讯》。袁曙光和Mikhail Kudrya
利用冷冻电镜成功解析神经突触超微结构
记者从中国科大获悉,该校合肥微尺度物质科学国家研究中心与生命科学学院毕国强、刘北明与周正洪教授合作课题组的研究成果——利用冷冻电子断层三维重构技术(cryoET)与冷冻光电关联显微成像技术解析神经突触超微结构。图片来源网络 2月7日,美国神经科学学会会刊《神经科学杂志》以封面形式报道了这一成果
新冠病毒混合样本核酸检测的争议与出路
截至5月22日,SARS-COV-2导致的COVID-19在全球范围内已经确诊超过501万人,SARS-COV-2核酸检测目前依旧是进行COVID-19诊断的金标准,同样也是无症状感染人群的必要筛查手段。 4月30日,国家提出了强化新冠病毒核酸检测的要求,要求各地应当加强医疗机构实验室建设,对所有
冷冻电镜解析朊病毒蛋白病理聚集多态性
中国科学院上海有机化学研究所生物与化学交叉中心刘聪课题组与武汉大学梁毅课题组合作在Science Advances上在线发表题为Genetic prion disease–related mutation E196K displays a novel amyloid fibril structu
西湖大学:找到了新冠病毒细胞入侵细胞的“门把手”
近日,西湖大学周强实验室利用冷冻电镜技术成功解析此次新冠病毒的受体——ACE2的全长结构。这是世界上首次解析出ACE2的全长结构。相关研究内容于北京时间2月19日凌晨3点左右在预印版平台bioRxiv上线。这也是西湖大学承担的浙江省新型冠状病毒肺炎防治应急科研攻关任务的重要成果。周强 新型冠状
让病毒无所遁形徕卡电镜解决方案在新冠肺炎病毒鉴...2
同时还发现S1和S2边界处存在四个氨基酸残基插入,从而引入了新的蛋白酶切位点。这就可能会增强病毒的可传播性,更加科学地解释了新冠病毒传染力强的问题。2月19日,西湖大学周强教授团队获得了ACE2的全长三维结构,同时解析了S蛋白RBD和ACE2的复合物三维结构,看清楚了它们的相互作用方式,这一步正式揭
冷冻电镜解析了哪种蛋白的三维结构
近日,中国科学技术大学微尺度物质科学国家研究中心和生命科学与医学部教授陈宇星和周丛照课题组与孙林峰课题组合作,利用冷冻电镜技术首次解析了人类溶酶体维生素B12外排蛋白ABCD4的近原子分辨率三维结构,为深入理解该类膜蛋白转运的分子机制以及其突变引发疾病的致病机理提供了基础。该研究成果以Cryo-
扫描电镜透射电镜样本制备步骤
射电镜制备注意事项(细胞)1、细胞数量: > 1*10的6次方;2、消化细胞时要注意不要过度,及时用含血清的培养液终止消化;3、终止消化后,预冷的PBS (pH 7.4 )洗细胞1-2次离心(1500rpm, 5min)弃上清(细胞收集在1.5ml的EP管中) ;4、加入1mL 2.5%戊二醛溶液(
中国学者解析人类疱疹病毒近原子分辨率冷冻电镜结构
人类疱疹病毒6型(HHV-6)属于疱疹病毒家族β疱疹病毒亚家族,根据其表面抗原不同,又被分为HHV-6A和HHV-6B两类密切相关的病毒类型。很多幼儿都会被HHV-6病毒感染,并可能产生发烧、腹泻、红疹等临床症状;HHV-6病毒能够在人体中终身潜伏,并在免疫力低下的人群中引发严重疾病,它在脑组织
推动电镜技术新发展-看2020北京电镜年会
分析测试百科网讯 2020年12月19日,由北京理化分析测试技术学会电镜专业委员会主办的2020年度北京市电子显微学年会隆重举行。本次会议旨在推动北京及周边省市广大电子显微学的学术及技术水平,促进电子显微学工作者在材料科学、生命科学等领域的应用、发展和交流。本次会议共有近200人出席、参与。分析
“CT检查”揭露真容-走近新冠病毒“摄影师”
在看清新冠病毒纳米级细微生物结构的瞬间,中国清华大学生命科学学院研究员李赛无比兴奋。他23日对记者说:“那种感觉如同爬上珠穆朗玛峰俯瞰世界一样。” 第一次,包括中国科研人员在内的国际团队“拍摄”到了新冠病毒的3D影像。在纳米尺度的图像上,平均直径不到100纳米的新冠病毒像一颗奇异星球,表面分布
首届冷冻电镜与药物发现创新峰会
2020年是特别的一年,新冠疫情笼罩全球,各国医药研发同仁众志成城,共抗疫情,同时各方同道积极通过线上方式展开学术活动,推进相关领域学术发展。首届冷冻电镜与药物发现创新峰会(1st GCDD Summit)将于8月15日13:00-17:00以网络直播的形式召开。本届大会将秉承学术性、国际性的原则,
研究解析新冠病毒RNA聚合酶三维精细结构
由饶子和院士/娄智勇教授/王权教授等组成的“上海科技大学-清华大学抗新冠病毒联合攻关团队”率先在国际上成功解析了新型冠状病毒转录复制机器核心单元“RdRp-nsp7-nsp8”复合体的三维空间结构,整体分辨率达到2.9 埃(Å)。 该研究揭示了该病毒遗传物质转录复制机器核心“引擎”的结构特征,
1月29日疫情通报:变异新冠病毒在巴西扩散
1月28日0—24时,31个省(自治区、直辖市)和新疆生产建设兵团报告新增确诊病例52例,其中境外输入病例16例(上海9例,广东5例,天津1例,湖南1例),本土病例36例(黑龙江21例,吉林13例,北京1例,河北1例);无新增死亡病例;新增疑似病例2例,其中境外输入病例1例(在上海),本土病例1
Nature:基于冷冻电镜的新技术MicroED确定微小晶体结构
α-突触核蛋白(α-synuclein)是路易小体(Lewy body)的主要成分,与帕金森病和其他神经退行性病变密切相关。日前,科学家们使用尖端技术MicroED(micro-electron diffraction)解析了α-突触核蛋白的毒性核心,获得了分辨率超高的晶体结构。程亦凡博士在九月
冷冻电镜在结构生物学中的战绩
冷冻电镜在结构生物学中的战绩从NSC等顶刊的发文情况及源源不断的生物大分子结构被解析出来,冷冻电镜在结构生物学领域取得的巨大成功无需赘述。单单以中国大陆为例,基于冷冻电镜技术在结构生物学领域取得的重大进展就十分可观,具体如表1所示[5](2016年)。而随着冷冻电镜技术的大热,国内的许多高校、科研院
微滴芯片数字PCR技术在检测新冠病毒的应用
国家卫健委发布了《新型冠状病毒肺炎防控方案(第五版)》,其中在实验室检测技术指南中明确提出,核酸检测结果阴性不能排除新型冠状病毒感染。3月4日,国家卫健委发布的《新型冠状病毒肺炎诊疗方案(试行第七版)》 中提到了以下两点:对疑似病例要尽可能采取包括快速抗原检测和多重PCR核酸检测等方法对呼吸道病
重磅!冠状病毒首个刺突糖蛋白解析成功
冠状病毒的刺突糖蛋白(Spike glycoprotein, S glycoprotein)是Ⅰ型跨膜糖蛋白,也是病毒最大的结构蛋白,其包含了病毒的主要抗原决定簇,能够刺激机体产生中和抗体和介导免疫反应,通常包括由球状的受体结合亚基S1和棒状的融合亚基S2两部分。同时,S蛋白的S1亚基决定了受体
高分辨率冷冻电镜成功解析人类疱疹病毒6B型结构
近日,中国科学技术大学合肥微尺度物质科学国家研究中心、生命科学学院教授毕国强课题组、美国加州大学洛杉矶分校教授周正洪课题组与华东师范大学研究员梅晔合作,利用高分辨冷冻电镜单颗粒分析技术首次解析了人类疱疹病毒6B型的近原子分辨率结构。相关研究成果以Atomic structure of the h
冷冻电镜发威!解析人类疱疹病毒6B型近原子分辨率结构
记者从中国科学技术大学获悉,该校生命科学学院毕国强教授课题组与同行合作,利用高分辨冷冻电镜单颗粒分析技术首次解析了人类疱疹病毒6B型的近原子分辨率结构。相关研究成果日前在线发表在国际著名期刊《自然·通讯》上。 人类疱疹病毒6型(HHV-6)属于疱疹病毒家族β疱疹病毒亚家族,根据其表面抗原不同,
我国冷冻电镜再发Nature-三维结构解析免疫机制
10月2日,《自然》杂志在线发表了我国科学家的一项关于免疫系统如何发挥作用的重要成果。通过海量的实验与计算,来自中国科学院物理所、中国医学科学院等单位的研究人员,成功解析与原核短Ago系统相关的高分辨率三维蛋白结构,同时彻底弄清楚了原核短Ago系统在病毒入侵前后所发生的结构变化。原核短Ago中辅酶I