荧光免疫技术常用荧光色素有哪些?
①异硫氰酸荧光素,呈现明亮的黄绿色荧光。②四乙基罗丹明,呈橘红色荧光。③四甲基异硫氰酸罗丹明,呈橙红色荧光。④藻红蛋白,呈明亮的橙色荧光。......阅读全文
荧光免疫技术常用荧光色素有哪些?
①异硫氰酸荧光素,呈现明亮的黄绿色荧光。②四乙基罗丹明,呈橘红色荧光。③四甲基异硫氰酸罗丹明,呈橙红色荧光。④藻红蛋白,呈明亮的橙色荧光。
荧光免疫技术常用荧光色素有哪些?
①异硫氰酸荧光素,呈现明亮的黄绿色荧光。②四乙基罗丹明,呈橘红色荧光。③四甲基异硫氰酸罗丹明,呈橙红色荧光。④藻红蛋白,呈明亮的橙色荧光。
疫荧光技术常用的荧光有哪些?
荧光素1)FITC2)RB2003)TRITC4)镧系:Eu、Tb5)PE6)其它常见荧光素的特性1)FITC:黄色结晶粉末,吸收光:490~495nm,发射光:520~530nm,明亮的黄绿色荧光。2)RB200:橘红色粉末,吸收光570nm,发射光595~600nm,橘红色荧光。3)TRITC:
荧光素有哪些种类?
异硫氰酸荧光素:最大发射波长为520~530nm,呈现明亮的黄绿色荧光,适用于所有配备488nm氩离子激光器的流式细胞仪。 藻红蛋白:最大发射波长为575nm,适用于所有配备488nm氩离子激光器的流式细胞仪。 德州红:一种串联荧光素,由PE和TexasRed组合而成,最大发射波长为615n
常见荧光素有哪些?
荧光素1)FITC2)RB2003)TRITC4)镧系:Eu、Tb5)PE6)其它常见荧光素的特性1)FITC:黄色结晶粉末,吸收光:490~495nm,发射光:520~530nm,明亮的黄绿色荧光。2)RB200:橘红色粉末,吸收光570nm,发射光595~600nm,橘红色荧光。3)TRITC:
荧光免疫技术的荧光物质有哪些?
(一)荧光色素1.异硫氰酸荧光素(FITC):呈现明亮的黄绿色荧光。2.四乙基罗丹明(RB200):呈橘红色荧光。3.四甲基异硫氰酸罗丹明(TRITC):呈橙红色荧光。4.藻红蛋白(R-RE):呈明亮的橙色荧光。(二)其他荧光物质1.镧系螯合物:其中以Eu3+应用最广。Eu3+螯合物的激发光波长范围
荧光免疫技术的荧光物质有哪些?
(一)荧光色素1.异硫氰酸荧光素(FITC):呈现明亮的黄绿色荧光。2.四乙基罗丹明(RB200):呈橘红色荧光。3.四甲基异硫氰酸罗丹明(TRITC):呈橙红色荧光。4.藻红蛋白(R-RE):呈明亮的橙色荧光。(二)其他荧光物质1.镧系螯合物:其中以Eu3+应用最广。Eu3+螯合物的激发光波长范围
免疫荧光技术的常用酶作用生物质有哪些?
酶 底物 产物 激发光 发射光Β-G MUG MU 360 450AP MUP MU 360 450HRP HPA 二聚体 317 414
免疫荧光技术的常见荧光剂有哪些?
1)FITC2)RB2003)TRITC4)镧系:Eu、Tb5)PE6)其它
免疫荧光标记最常用的荧光染料有哪些条件呢
用于免疫荧光染色的染料需具备以下几个条件: 荧光染料应有较高的量子产额和消光系数; 荧光染料对488nm的激发光波长有较强的吸收; 发射光波长与激发光波长之间应有较大的波长差; 容易与被标记的单克隆抗体结合而不影响抗体自身的特异性。 1.异硫氰酸荧光素(FITC):可产生亮绿色荧光。F
荧光免疫技术
荧光免疫技术是标记免疫技术中发展最早的一种。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术(fluorescentantibod
常用的免疫荧光素主要有哪些?
1 .异硫氰酸荧光素 (FITC) ,最大吸收光谱为 490~495nm ,最大发射光谱为 520~530nm ,呈黄绿色荧光。2 .四乙基罗丹明 (RB200) ,最大吸收光谱为 570nm ,最大发射光谱为 595~600nm ,呈明亮橙色荧光。3 .四甲基异硫氰酸罗丹明 (TRITC) ,最大
免疫荧光技术的特点有哪些?
该技术的主要特点是:特异性强、敏感性高、速度快。主要缺点是:非特异性染色问题尚未完全解决,结果判定的客观性不足,技术程序也还比较复杂。 荧光免疫法按反应体系及定量方法不同,还可进一步分做若干种。与放射免疫法相比,荧光免疫法无放射性污染,并且大多操作简便,便于推广。国外生产的TDM用试剂盒,有相
免疫荧光技术的优点有哪些?
高灵敏度:免疫荧光技术对抗原的检测具有很高的灵敏度,即使在极微量的抗原存在下也能进行检测。 高特异性:由于抗体与抗原的特异性结合,免疫荧光技术可以准确地定位和检测特定的蛋白质或抗原。 可视化:该技术允许直接在细胞或组织中观察靶标抗原,提供了直观的视觉信息,有利于了解抗原的分布和定位。 双重
免疫荧光技术的缺点有哪些?
信号衰减:荧光信号会随时间衰减,尤其是在长时间曝光于激发光下,这要求在实验过程中及时捕获图像。 非特异性背景:可能会发生非特异性结合,需要通过适当的封闭和对照实验来减少背景信号。 荧光淬灭:在某些条件下,荧光标记可能会淬灭,影响结果的可靠性。 需要特殊设备:免疫荧光显微镜和相关设备相对昂贵
常用的荧光免疫自动化分析有哪些类型
常用的荧光免疫自动化分析主要是将抗原抗体反应与荧光物质发光分析和计算机技术有机结合的一项自动化免疫分析技术。最常用的有时间分辨荧光免疫测定(TR-FIA)和荧光偏振免疫测定二种类型。TR-FIA应用:①激素:甲状腺激素、甾体类激素的检测;②病毒性肝炎标志物(如抗-HCV)的检测;③肿瘤标志物的检测;
免疫荧光技术
免疫荧光技术1) 直接法1.标本经固定后,PBS洗涤3×3分钟。2.加荧光素标记的抗体,湿盒内37℃孵育50分钟。3.PBS洗涤3×3分钟。4.0.1%伊文氏兰复染。5.PBS洗3次,蒸馏水洗2次,每次3分钟,以除去NaCl结晶。6.缓冲甘油封片,镜检。 2) 间接法1.标本固定后,PBS洗涤3
免疫荧光技术
基本原理 将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高,非特异性荧光染色少。缺点是敏感性偏低;而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体。此法常用于细菌、病毒等微生物的快速检查和肾炎活检、皮肤活检的免疫病理检查。试剂与仪器l 磷酸盐缓冲盐水(PBS):
荧光免疫技术介绍
荧光免疫技术是标记免疫技术中发展最早的一种。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术(fluorescentantib
免疫荧光技术
免疫荧光技术是标记免疫技术中发展最早的一种.它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记抗体获得成功。经过几十年的发展,该技术已相当成熟。 用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法;用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的
免疫荧光技术
实验方法原理 直接法是以荧光素标记的抗体直接与标本内的抗原反应,形成抗原—荧光素标记抗体复合物。根据荧光的分布位置及强度,确定相应抗原的存在与否及其所在部位。实验材料 抗体试剂、试剂盒 PBS伊文氏兰仪器、耗材 显微镜实验步骤 1. 标本经固定后,PBS洗涤3×3 分钟;2. 加荧光素标记的抗体,湿
三色荧光级联荧光共振能量转移技术
荧光共振能量转移(fluorescence resonance energytransfer,FRET),是指能量从一种受激发的荧光基团(fluorophore)以非辐射的方式转移到另一种荧光基团的物理现象.FRET的能量转移效率是两个荧光基团间距离的函数,并对此距离十分敏感,它的有效响应距离一
荧光强度的影响因素有哪些
1.荧光的减退。荧光物质经紫外线长时间照射及空气的氧化作用,会使荧光逐渐减退。2.荧光强度与溶液浓度的关系。在稀溶液中: F=Kc。F 为荧光强度K—检测效率(由仪器决定) c 为液体的浓度高浓度时,荧光物质发生熄灭和自吸收现象,使F与c不呈线性关系。3.温度的影响。温度对荧光强度的影响较敏感。溶液
影响物质荧光发射的因素有哪些
1、辐射与物质的非吸收作用引起的误差;2、荧光与光化学反应的影响,一般说来,荧光对分光光度测量产生的误差可以忽略,多数情况下显色体系的荧光效率很小,而且荧光发射是各向同性,只有一小部分沿着透射光方向进入检测器,使测量吸光度偏低,产生负偏离。荧光对吸收测量的影响极大程度上决定于仪器的吸收池和检测器光学
荧光强度的影响因素有哪些
1.荧光的减退。荧光物质经紫外线长时间照射及空气的氧化作用,会使荧光逐渐减退。2.荧光强度与溶液浓度的关系。在稀溶液中: F=Kc。F 为荧光强度K—检测效率(由仪器决定) c 为液体的浓度高浓度时,荧光物质发生熄灭和自吸收现象,使F与c不呈线性关系。3.温度的影响。温度对荧光强度的影响较敏感。溶液
荧光强度的影响因素有哪些
1.荧光的减退。荧光物质经紫外线长时间照射及空气的氧化作用,会使荧光逐渐减退。2.荧光强度与溶液浓度的关系。在稀溶液中: F=Kc。F 为荧光强度K—检测效率(由仪器决定) c 为液体的浓度高浓度时,荧光物质发生熄灭和自吸收现象,使F与c不呈线性关系。3.温度的影响。温度对荧光强度的影响较敏感。溶液
荧光强度的影响因素有哪些
1.荧光的减退。荧光物质经紫外线长时间照射及空气的氧化作用,会使荧光逐渐减退。2.荧光强度与溶液浓度的关系。在稀溶液中: F=Kc。F 为荧光强度K—检测效率(由仪器决定) c 为液体的浓度高浓度时,荧光物质发生熄灭和自吸收现象,使F与c不呈线性关系。3.温度的影响。温度对荧光强度的影响较敏感。溶液
荧光强度的影响因素有哪些
1.荧光的减退。荧光物质经紫外线长时间照射及空气的氧化作用,会使荧光逐渐减退。2.荧光强度与溶液浓度的关系。在稀溶液中: F=Kc。F 为荧光强度K—检测效率(由仪器决定) c 为液体的浓度高浓度时,荧光物质发生熄灭和自吸收现象,使F与c不呈线性关系。3.温度的影响。温度对荧光强度的影响较敏感。溶液
荧光强度的影响因素有哪些
1.荧光的减退。荧光物质经紫外线长时间照射及空气的氧化作用,会使荧光逐渐减退。2.荧光强度与溶液浓度的关系。在稀溶液中: F=Kc。F 为荧光强度K—检测效率(由仪器决定) c 为液体的浓度高浓度时,荧光物质发生熄灭和自吸收现象,使F与c不呈线性关系。3.温度的影响。温度对荧光强度的影响较敏感。溶液
荧光强度的影响因素有哪些
1.荧光的减退。荧光物质经紫外线长时间照射及空气的氧化作用,会使荧光逐渐减退。2.荧光强度与溶液浓度的关系。在稀溶液中: F=Kc。F 为荧光强度K—检测效率(由仪器决定) c 为液体的浓度高浓度时,荧光物质发生熄灭和自吸收现象,使F与c不呈线性关系。3.温度的影响。温度对荧光强度的影响较敏感。溶液