酶活性和质量测定方法及其评价

酶测定包括酶量测定和酶活性测定。酶在体液中含量极微,因此临床上大都采用酶活性测定,以酶活性间接表示酶量。酶活性的概念:酶活性指酶催化反应的能力即酶促反应速度。反应速度是指在规定条件下单位时间内底物的减少量或产物的生成量。1.酶活性测定方法(1)按反应时间分类法1)定时法:(两点法) 通过测定酶反应开始后某一时间段内(t1到t2)产物或底物浓度的总变化量来求取酶反应初速度的方法。其中t1往往取反应开始的时间。2)连续监测法:(动力学法或速率法、连续反应法)酶反应过程中,用仪器监测某一反应产物或底物浓度随时间的变化所发生的改变,通过计算求出酶反应初速度。3)平衡法:(终点法) 通过测定酶反应开始至反应达到平衡时产物或底物浓度总变化量来求出酶活力的方法。(2)按监测方法分类法①分光光度法②旋光法③荧光法④电化学方法⑤化学反应法⑥核素测定法⑦量热法2.酶质量测定法利用酶的抗原性,通过抗原、抗体反应来直接测定酶的质量,直接用质量单位ng/......阅读全文

临床化学检查方法介绍抗凝血酶Ⅲ活性和抗凝血酶Ⅲ抗原

抗凝血酶Ⅲ活性和抗凝血酶Ⅲ抗原介绍:  人体内与凝血系统功能相拮抗的是抗凝血系统,在正常情况下,两者保持动态平衡,从而维持血液在血管内的正常流动。抗凝血酶Ⅲ是抗凝系统中最重要的成分,它由肝脏合成,为一种多功能的丝氨酸蛋白酶抑制物,可抑制凝血酶生成,具有强大的抗凝活性,占血浆抗凝酶活性的70%。抗凝血

ELISA-临床质量评价与质量管理

ELISA 试剂的评价(evaluation )分两个方面:一是试剂本身的质量评价,符合一定要求后才能生产供应;一是在临床应用中效果的评价。以肝炎ELISA 诊断试剂为例,首先必须通过中国药品生物制品检定,以得到生产的许可。检定内容除包装、标签、说明书等外,对试剂的性能,如特异性、灵敏度、精

ELISA质量控制室间质量评价

室间质量评价(external quality aement, 简称EQA)简称室间质评,是由质控中心采用一系列的办法连续地、客观地评价各实验室的试验结果,并发现室内质控不易发现的不准确性,了解各实验室之间结果的差异,并帮助校正,使具有可比性。各实验室试验结果报到质控中心,经过统计分析,得出相互

酶及其作用

酶是一种由活细胞产生的生化反应的蛋白质催化剂,在动物体内消化与新陈代谢过程中起着非常重要的作用。生物体内生化代谢途径中的酶可分为氧化还原酶类、转移酶类、水解酶类、裂合酶类、异构酶类和合成酶类共6类。工业上应用的酶制剂大多数为水解酶,按作用底物的不同,可分为淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、果胶酶、木聚糖酶、β

荧光偏振免疫测定的方法评价

  荧光偏振免疫测定样品用量少;  荧光素标记结合物稳定,使用寿命长;  方法重复性好;  快速,易自动化;  试剂盒专属性强,适于检测小分子和中等分子物质,不适宜测定大分子物质;  灵敏度较非均相荧光免疫测定法低。

含量测定方法的评价(Analytical-performance-parameters)

   a、精密度(precision)   系指用该法测定同一匀质样品的一组测量值彼此符合的程度。它们越接近就越精密。在药物分析中,常用 标准(偏)差(standard deviation,SD或S); 相对标准(偏)差(relative standard   deviation,RSD),也称

钾钠氯测定的方法学评价

钾、钠的测定方法:火焰光度法、离子选择电极法、冠醚法(化学测定法)和酶法。氯的测定方法:离子选择电极法、硫氰酸汞比色法、硝酸汞滴定法和电量分析法(库仑滴定法)。(1)火焰光度法:原理:火焰光度法是一种发射光谱分析法,利用火焰中激发态原子回降至基态时发射的光谱强度进行含量分析。该方法属于经典的标准参考

精密度测定方法的评价

  精密度(precision)  系指用该法测定同一匀质样品的一组测量值彼此符合的程度。它们越接近就越精密。在药物分析中,常用 标准(偏)差(standard deviation,SD或S); 相对标准(偏)差(relative standard  deviation,RSD),也称变异系数(co

土壤养分测定仪评价海南岛土壤养分质量

土壤养分质量的评判是依据土壤资源调查的数据及其利用(如农业)对土壤的要求, 针对土壤资源的利用价值和潜力进行的评估与测算。由于学科发展和技术条件的限制,土壤养分质量的评价以往一般采用定性评价方法,即利用各种定性词汇评价土壤在生产利用中的表现。随着信息技术在土壤研究中的应用,越来越依赖于定量的数学方法

COD-测定方法的分类及其研究

COD 测定方法的分类及其研究COD 测定方法可分为化学法和仪器法 。 化学法 根据氧化剂的不同又分为重铬酸钾法和高锰酸钾法,两种方法从建立至今己有 100多年的历史 。 在我国, COD 指标己成为每一个监测站必备的监测手段 。

土壤水分及其测定方法

土壤水分是指保持在土壤孔隙中的水分,又称土壤湿度。通常可以通过把土样放在电烘箱内烘干(温度控制在105~110℃),然后从土壤孔隙中测得释放的水量作为土壤水分含量。土壤水分并 非纯水,而是稀薄溶液,还含有胶体颗粒。土壤水分主要来源是大气降水和灌溉水,此外尚有近地面水气的凝结、地下水位上升及土壤矿物质

面粉的白度及其测定方法

    无论是国家标准,还是行业标准,乃至发达国家标准,都未将白度作为评价面粉质量的指标,然而崇尚蒸煮食品的国人却很重视这一指标,继而导致面粉厂将白度作为企业内控指标参与市场竞争,面粉增白剂也就应运而生。小麦胚乳中含有的类胡萝卜素是造成面粉呈淡黄色的主要因素,在自然陈化过程中出现的氧化反应能使色素慢

容重的概念及其测定方法

粮食容重是指粮食籽粒在一定容器内的质量,它是与孔隙度密切相关的物理量,容重与孔隙度成反比。在粮食流通过程中,它是检验小麦质量品质的一项重要指标.在我国,许多粮食,如小麦、玉米等现行质量标准中都以容重作为定等基础指标。容重器是测定粮食容重的专业仪器。世界各小麦主产国如美国、加拿大、澳大利亚等国小麦质量

蛋白质测定方法及其比较

目前常用的有四种古老的经典方法,即定氮法,双缩尿法(Biuret法)、Folin-酚试剂法(Lowry法)和紫外吸收法。另外还有一种近十年才普遍 使用起来的新的测定法,即考马斯亮蓝法(Bradford法); 还有近来广为应用的蛋白定量方法——BCA法。其中Bradford法和Lowry法灵敏度较高,

酶法测定血糖原理及其临床意义

原理葡萄糖氧化酶将葡萄糖氧化为葡萄糖酸,同时释放过氧化氢。过氧化氢酶催化过氧化氢氧化色素原,并使色素原氧化成红色醌类化合物,即Trinder反应。红色醌类化合物的生成量与葡萄糖含量成正比。临床意义1.生理性高血糖可见摄入高糖食物后,或情绪紧张肾上腺分泌增加时。2.病理性高血糖a.糖尿病:病理性高血糖

丝氨酸蛋白酶活性的调节方法

宿主生物必须确保丝氨酸蛋白酶的活性得到充分调节。这是通过对初始蛋白酶激活和抑制剂分泌的要求来实现的。酶原激活酶原是酶的通常无活性的前体。如果消化酶在合成时活跃,它们会立即开始咀嚼合成器官和组织。急性胰腺炎就是这样一种情况,其中胰腺中的消化酶过早激活,导致自我消化(自溶)。它还使死后调查复杂化,因为胰

临床化学检查方法介绍端粒酶活性

端粒酶活性介绍:  端粒是真核生物染色体末端的一种特殊结构,由一富含鸟嘌呤的重复DNA序列及其相关蛋白组成。端粒是保护染色体末端稳定必不可少的结构。端粒长度的维持需要端粒酶活性的存在。永生细胞和肿瘤细胞能够长期生存,端粒酶起到了重要的作用。端粒酶是由RNA和蛋白体组成的复合体,属一种专一的依赖RNA

砻谷机测试和评价方法

按照《粮食检测仪器测试大纲》和《评审办法》,对粮食收购用的砻谷机的参评仪器的使用性能进行测评方法如下:选用不同产地、类型的稻谷样品20份,按相同的测试要求,对7种14台砻谷机的一次脱壳率、出糙总量、碎糙米率、脱壳时间、壳中含糙米、糙米中含壳量以及操作繁简程度、运行稳定性、外观质量等指标进行全面测试。

血涂片评价和分类计数的质量控制流程

 血涂片评价    血涂片的显微镜检查是血液细胞学检查的基本方法,临床上应用极为广泛,制备厚薄适宜,分布均匀,染色良好的血涂片是血液学检查的重要基本技术之一。    一、  血涂片制作    取末梢血1滴,置载玻片一端,取另一边缘光滑的推片,放在血滴前面慢慢后移,接触血滴后稍停。血液即沿推片散开

土壤环境质量和重金属污染评价

土壤环境质量的定义    是指特定类型的土壤在自然或农业生态系统边界内保持动植物生产能力、大气和水的质量以及人类健康的能力,它是综合表征土壤维持生产力,环境净化能力以及保障动植物健康能力的量度。土壤质量主要包括三个方面:1、土壤提供植物养分和生产物质的能力,是保障粮食生产的根本;2、土壤容纳、吸收、

使用气相色谱法测定苯系物测定方法质量保证和质量控制

质量保证和质量控制①采样器采样前或采样过程中发现流量有较大的波动时,均应使用皂膜流量让进行流量校正。如果采样前后流量变化大于10%,分析结果应为可疑数据。②每次样品分析前后必须进行中间浓度检验,如果样品多于10个时,每10个样品进行一次前后的中间浓度检验,中间浓度的实际值与曲线所得值的偏差≤15%,

什么是酶活性?

酶活力(enzyme activity)也称酶活性,是指酶催化一定化学反应的能力。酶活力的大小可以用在一定条件下,它所催化的某一化学反应的转化速率来表示,即酶催化的转化速率越快,酶的活力就越高; 反之,速率越慢,酶的活力就越低。所以,测定酶的活力就是测定酶促转化速率。酶转化速率可以用单位时间内单位体

NK细胞活性测定实验——乳酸脱氢酶释放法

实验方法原理乳酸脱氢酶(LDH)存在于细胞内,正常情况下,不能透过细胞膜。当细胞受到损伤时,由于细胞膜通透性改变,LDH可从细胞内释放至培养液中。释放出来的LDH再催化乳酸的过程中,使氧化型辅酶Ⅰ(NAD+)变成还原型辅酶(NADH2),后者再通过递氢体-吩嗪二甲酯硫酸盐(PMS)还原碘硝基氯化氮唑

过氧化氢酶活性的测定

过氧化氢酶的活性测定——紫外吸收法【原理】H2O2在240nm波长下有强烈吸收,过氧化氢酶能分解过氧化氢,使反应溶液吸光度(A240)随反应时间而降低。根据测量吸光率的变化速度即可测出过氧化氢酶的活性。【仪器与用具】紫外分光光度计;离心机;研钵;250ml容量瓶1个;0.5ml刻度吸管2支,2ml刻

单胺氧化酶活性测定_高效液相色谱法

实验材料大鼠试剂、试剂盒苯胺β-苯乙胺优降宁过氯酸苯甲醛磷酸钠缓冲液甲醇仪器、耗材HPLC紫外检测器制冰机水浴锅离心机离心管移液枪试管试管架比色皿酶标仪微量注射器单胺氧化酶(monoamine oxidase )为催化单胺氧化脱氨反应的酶。缩写MAO,也有称为含黄素胺氧化酶的。EC1.4.3.4。作

谷胱甘肽S转移酶活性测定_比色法

实验材料肝微粒体蛋白试剂、试剂盒二硝基氯苯乙醇谷胱甘肽硝酸钾缓冲液三氯醋酸仪器、耗材石英杯双光束分光光度计比色池紫外分光光度计试管培养箱离心机离心管试管架谷胱甘肽S-转移酶是指催化具有亲电取代基的外源性化合物与内源的还原谷胱甘肽(GSH)反应的酶。 可催化多种反应包括烃基、芳基、芳烃基、烯基和氧基的

多酚氧化酶活性的测定(氧电极法)

  原理   多酚氧化酶是一种含铜的氧化酶,能使一元酚和二元酚氧化生成醌。多酚氧化酶活性可以用氧电极测量反应耗氧的速度,或用比色法测量产物的形成,常用的底物如儿茶酚(邻苯二酚)和多巴(3,4-二羟苯丙氨酸)。     仪器药品     测氧仪        

葡萄糖醛酸转移酶活性的测定

葡萄糖醛酸转移酶是指能催化间接胆红素与葡萄糖醛酸结合形成葡萄糖醛酸酯(即直接胆红素)的酶。  

葡萄糖醛酸转移酶活性的测定

分光光度法 实验材料 肝微粒体蛋白 试剂、试剂盒 氯化镁 维生素C

连续监测法测定乳酸脱氢酶(LD)总活性

  乳酸脱氢酶是一种含锌的氧化还原酶类,人体以心、肾、骨骼肌含量最丰富,其次为肝、脾、胰及肺组织含量亦较多。  1. 原理    340nm处吸光度的增加速率与样品中LD活性成正比。  2. 生理变异  血清LD高低和性别关系不大,婴儿酶活性可达成年人两倍,儿童和少年活性比成年人高10%~l5%。