荧光偏振免疫测定的方法评价

荧光偏振免疫测定样品用量少; 荧光素标记结合物稳定,使用寿命长; 方法重复性好; 快速,易自动化; 试剂盒专属性强,适于检测小分子和中等分子物质,不适宜测定大分子物质; 灵敏度较非均相荧光免疫测定法低。......阅读全文

荧光偏振免疫测定的方法评价

  荧光偏振免疫测定样品用量少;  荧光素标记结合物稳定,使用寿命长;  方法重复性好;  快速,易自动化;  试剂盒专属性强,适于检测小分子和中等分子物质,不适宜测定大分子物质;  灵敏度较非均相荧光免疫测定法低。

荧光偏振免疫测定是什么?方法评价是什么?

利用抗原抗体竞争反应原理,根据荧光素标记抗原与其抗原抗体复合物的荧光偏振程度的差异,测定体液中小分子物质的含量。(一)基本原理荧光偏振免疫测定常用异硫氰酸荧光素(FITC)标记小分子抗原。(二)方法评价荧光偏振免疫测定样品用量少;荧光素标记结合物稳定,使用寿命长;方法重复性好;快速,易自动化;试剂盒

荧光酶免疫测定的方法评价

  固相荧光酶免疫测定法,避免了血清和其他生物样品的背景荧光会干扰。

荧光偏振免疫测定的原理及主要用途

利用荧光物质在溶液中被单一平面的偏振光照射后,可吸收光能而产生另一单一平面的偏振发射荧光,该荧光强度与荧光标记物质在溶液中旋转的速度与分子大小成反比,主要用于测定小分子药物浓度。

荧光酶免疫测定的基本原理和方法评价

  基本原理  以碱性磷酸酶(ALP)标记抗体(或抗原),以固相载体包被抗原(或抗体),碱性磷酸酶分解荧光底物4-甲基伞酮磷酸盐(4-MUP)形成4-MU,经360nm激发光的照射,发出450nm的荧光。  方法评价  固相荧光酶免疫测定法,避免了血清和其他生物样品的背景荧光会干扰。

免疫测定法方法学评价

免疫测定法几乎可以用于所有细胞因子的检测。优点:①特异性高,使用特异的单克隆抗体,可用于单一细胞因子的检测;②操作简便、快速,无需依赖细胞株,故不需维持培养,可操作性增加,容易推广和便于普查;③影响因素相对较少且容易控制,重复性好,方法容易标准化。缺点:①所测定的只是细胞因子的蛋白含量,与其生物活性

荧光偏振的用途

荧光偏振免疫分析常用于测定半抗原的药物浓度。反应系统内除待测抗原外,同时加入一定量用荧光素标记的小分子抗原,使二者与有限量的特异性大分子抗体竞争结合。当待测抗原浓度高时,经过竞争反应,大部分抗体被其结合,而荧光素标记的抗原多呈游离的小分子状态。由于其分子小,在液相中转动速度较快,测量到的荧光偏振程度

偏振荧光分析

任何物质都处于不断运动中,液体环境中的荧光分子也不例外。因此当受到偏振光激发时,荧光分子的运动状态(如旋转或翻转)、荧光分子与其他因子相互作用(如相互结合或排斥)、其所处环境的性质(如溶液的黏度、温度_等因素都可能对荧光分子受激发后发出的偏振光的性质产生影响。对此进行分析比较,就可能揭开物质活动的内

荧光偏振简介

Perrin于1926年首先描述了荧光偏振理论,他观察到溶液中的荧光分子在受到偏振光激发时,如果在激发时分子保持静止,该分子将发出固定偏振平面的发射光(发射光仍保持偏振性)。然而,如果分子旋转或翻转那么发射光的偏振平面将不同于初始激发光的偏振平面。分子的偏振性与分子旋转驰豫时间成比例,分子旋转驰豫时

FPA荧光偏振仪器

  哨兵Sentry 200 是一款坚固,轻便,便携的单管仪器,专为进行荧光偏振分析而设计。所有必要的光学,电子和计算能力都包含在仪器中,可以独立于计算机使用。哨兵 Sentry 200 采用由Diachemix LLC 开创的革命性 LCD 光偏振技术(LCDp)。LCDp比传统的过滤开关技术运行

荧光免疫测定技术

荧光免疫测定技术的概念:将试剂抗原或试剂抗体用荧光素进行标记,试剂与标本中相应的抗体或抗原反应后,测定复合物中的荧光素,这种免疫技术,称为免疫荧光测定技术。荧光免疫测定技术分类:荧光抗体技术(荧光显微镜技术):抗原抗体反应后,利用荧光显微镜判定结果的检测方法。免疫荧光测定技术:抗原抗体反应后,利用特

荧光偏振技术的相关概述

  荧光偏振(FP)检测技术是一种以荧光标记的检测技术,它把荧光物质标记在特定物质上,使原本微弱的反应信号转化成较强的荧光信号,起到信号增强的作用。与此同时,在检测系统中加上起偏器和检偏器,当从光源发出的一束光线经垂直起偏器后成为垂直偏振光, 样品被垂直偏振光激发而产生偏振荧光, 此荧光经检偏器后可

荧光偏振免疫分析的作用

荧光偏振免疫分析,是一种定量免疫分析技术,其基本原理是荧光物质经单一平面的蓝偏振光(485nm)照射后,吸收光能跃入激发态,随后回复至基态,并发出单一平面的偏振荧光(525nm)。适宜检测小至中等分子物质,常用于药物、激素的测定。荧光偏振免疫分析法(fluorescence polarization

荧光偏振免疫分析的作用

荧光偏振免疫分析,是一种定量免疫分析技术,其基本原理是荧光物质经单一平面的蓝偏振光(485nm)照射后,吸收光能跃入激发态,随后回复至基态,并发出单一平面的偏振荧光(525nm)。适宜检测小至中等分子物质,常用于药物、激素的测定。荧光偏振免疫分析法(fluorescence polarization

荧光偏振技术的原理简介

  将磷酸化底物进行荧光标记,蛋白激酶产生的磷酸化产物不进行荧光标记。让两种磷酸化产物与抗丝氨酸抗体(丝氨酸和苏氨酸是最常见的磷酸化位点,因为其结构末端含有羟基,羟基很活泼,可以与磷酸基团结合)相竞争结合。当反应液中没有蛋白激酶产生的磷酸化产物时,荧光标记的磷酸化物与抗体相结合形成复合体,由于复合体

荧光偏振度和荧光强度

荧光偏振免疫分析法(fluorescencepolarizationimmunoassay,FPIA)是一种定量免疫分析技术,其基本原理是荧光物质经单一平面的蓝偏振光(485nm)照射后,吸收光能跃入激发态,随后回复至基态,并发出单一平面的偏振荧光(525nm)。荧光强度,指发射荧光的光的强度。荧光

荧光偏振度和荧光强度

荧光偏振免疫分析法(fluorescencepolarizationimmunoassay,FPIA)是一种定量免疫分析技术,其基本原理是荧光物质经单一平面的蓝偏振光(485nm)照射后,吸收光能跃入激发态,随后回复至基态,并发出单一平面的偏振荧光(525nm)。荧光强度,指发射荧光的光的强度。荧光

时间分辨荧光免疫测定的意义

时间分辨荧光免疫测定(TRFIA)是一种非同位素免疫分析技术,它用镧系元素标记抗原或抗体,根据镧系元素螯合物的发光特点,用时间分辨技术测量荧光,同时检测波长和时间两个参数进行信号分辨,可有效地排除非特异荧光的干扰,极大地提高了分析灵敏度。

荧光免疫测定的缺点有哪些?

  非特异性干扰:FICA可能受到样品中非特异性物质的干扰,影响检测结果的准确性。  荧光猝灭:荧光信号可能因多种原因而减弱,称为荧光猝灭,这可能导致信号减弱和灵敏度降低。  需要特殊设备:FICA需要特殊的荧光检测设备,如荧光显微镜或荧光酶标仪。  背景噪音:可能会有一定的背景荧光,影响检测结果的

荧光免疫测定的优点有哪些?

  高灵敏度:FICA具有很高的灵敏度,可以检测到微量的物质,包括抗原、抗体和半抗原。  宽线性范围:FICA的线性范围较宽,对于不同浓度的待测物,能够保持较好的线性关系。  标记物质稳定:用于标记的荧光素相对稳定,不易受到外界因素的影响。  适合自动化和标准化:FICA技术适用于自动化和标准化操作

时间分辨荧光免疫测定原理

时间分辨荧光免疫(TR-FIA)测定基本原理是以镧系元素如铕(Eu)螯合物作为荧光标记物,利用这类荧光物质有荧光寿命长的特点,延长荧光测量时间,待短寿命的自然本底荧光完全衰退后再行测定,所得信号完全为长寿命镧系螯合物的荧光,从而可以有效地消除非特异性本底荧光的干扰,可以用于定量测定。

时间分辨荧光免疫测定原理

时间分辨荧光免疫(TR-FIA)测定基本原理是以镧系元素如铕(Eu)螯合物作为荧光标记物,利用这类荧光物质有荧光寿命长的特点,延长荧光测量时间,待短寿命的自然本底荧光完全衰退后再行测定,所得信号完全为长寿命镧系螯合物的荧光,从而可以有效地消除非特异性本底荧光的干扰,可以用于定量测定。

关于免疫荧光技术—荧光免疫测定的基本介绍

  荧光免疫测定与酶免疫测定一样,可分均相和非均相法。均相法常利用荧光的某些特性,如荧光的激发、吸收、猝灭等设计试验,无需作结合的与游离的标记物分离。双标记法即为均相荧光免疫测定的一种类型,检测试剂为FITC标记的抗原和罗丹明标记的抗体,当两种标记物标记的抗原和抗体特异性结合后使两种荧光素靠近,由于

时间分辨荧光免疫测定的应用介绍

1.激素:甲状腺激素、甾体类激素。2.病毒性肝炎标志物。3.肿瘤相关抗原、胃蛋白酶原(PG)。4.药物。5.多肽类。

时间分辨荧光免疫测定的仪器原理

普通物质荧光光谱分为激发光谱和发射光谱,在选择荧光物质作为标记物时,必须考虑激发光谱和发射光谱之间的波长差,即Stokes位移的大小。如果Stokes位移小,激发光谱和发射光谱常有重叠,相互干扰,影响检测结果的准确性。镧系元素的荧光光谱有较大的Stokes位移,最大可达290nm,激发光谱和发射光谱

时间分辨荧光免疫测定的应用原理

解离增强镧系元素荧光免疫分析(DELFIA)是时间分辨荧光免疫分析中的一种。它用具有双功能基团结构的螯合剂,使其一端与铕(Eu)连接,另一端与抗体/抗原分子上的自由氨基连接,形成EU标记的抗体/抗原,经过免疫反应之后生成免疫复合物。由于这种复合物在水中的荧光强度非常弱,因此加入一种增强剂,使Eu从复

荧光免疫测定的优缺点有哪些?

  优点:  高灵敏度:FICA具有很高的灵敏度,可以检测到微量的物质,包括抗原、抗体和半抗原。  宽线性范围:FICA的线性范围较宽,对于不同浓度的待测物,能够保持较好的线性关系。  标记物质稳定:用于标记的荧光素相对稳定,不易受到外界因素的影响。  适合自动化和标准化:FICA技术适用于自动化和

时间分辨荧光免疫测定的分析原理

在生物流体和血清中的许多复合物和蛋白本身就可以发荧光,因此使用传统的发色团进而进行荧光检测的灵敏度就会严重下降。大部分背景荧光信号是短时存在的,因此将长衰减寿命的标记物与时间分辨荧光技术相结合,就可以使瞬时荧光干扰减到最小化。时间分辨荧光分析法(TRFIA)实际上是在荧光分析(FIA)的基础上发展起

什么是时间分辨荧光免疫测定?

时间分辨荧光免疫测定(TRFIA)是一种非同位素免疫分析技术,它用镧系元素标记抗原或抗体,根据镧系元素螯合物的发光特点,用时间分辨技术测量荧光,同时检测波长和时间两个参数进行信号分辨,可有效地排除非特异荧光的干扰,极大地提高了分析灵敏度。

均相荧光免疫测定(homogeneous-fluorescence-immunoassay)

均相荧光免疫测定(homogeneous fluorescence immunoassay)是根据1972年Rubenstein等建立的均相酶免疫测定法(HEI)发展形成的一种新型免疫荧光分析技术。所谓“均相”是指在反应结束后无须对游离和结合的标记物进行分离,直接测定即可。均相荧光免疫测定是利用