ELISA法手工测定的影响因素
ELISA法具有灵敏度高、特异性强、重复性好的特点,并具有操作简便、无放射性危害的优点,因而多年来广泛应用于血站和医院的实验室中,但在测定中常会出现一些误差和问题。我们通过几年的实验观察,认为影响结果的因素有如下方面。 1 试剂盒 (1)抗原、抗体活性对效价的影响:主要是试剂中抗体(或抗原)的效价降低或失活,结果不易判断。再有ELISA法灵敏度高,对杂质的反应灵敏度也高,实验中空白对照OD值偏高或假阳性。(2)酶结合物浓度过高,也会导致OD值假性增高。 2 试验仪器 (1)加样器是否经过校正,酶免测定血清用血量很少,如手工加样器的性能不好,吸取样品不精确,会使结果忽高忽低。(2)......阅读全文
ELISA法手工测定的影响因素
ELISA法具有灵敏度高、特异性强、重复性好的特点,并具有操作简便、无放射性危害的优点,因而多年来广泛应用于血站和医院的实验室中,但在测定中常会出现一些误差和问题。我们通过几年的实验观察,认为影响结果的因素有如下方面。 1 试剂盒 (1)抗原、抗体活性对效价的影响:主要是试剂中抗体
ELISA法手工测定的影响因素
ELISA法具有灵敏度高、特异性强、重复性好的特点,并具有操作简便、无放射性危害的优点,因而多年来广泛应用于血站和医院的实验室中,但在测定中常会出现一些误差和问题。我们通过几年的实验观察,认为影响结果的因素有如下方面。 1 试剂盒 (1)抗原、抗体活性对效价的影响:主要是试
ELISA法手工测定的影响因素
ELISA法具有灵敏度高、特异性强、重复性好的特点,并具有操作简便、无放射性危害的优点,因而多年来广泛应用于血站和医院的实验室中,但在测定中常会出现一些误差和问题。我们通过几年的实验观察,认为影响结果的因素有如下方面。 1 试剂盒 (1)抗原、抗体活性对效价的影响:主要是试剂中
血清对ELISA测定的影响因素
血清对ELISA测定的影响做如下讨论。 血清是常用的ELISA标本,血浆一般可视为与血清同等的标本,标本引起的假阳性和假阴性结果主要是干扰性物质所致,分为内源性物质和外源性物质两种: 1. 内源性物质 有人认为大约40%的人血清标本中含有非特异性干扰物质,可以不同程度影响检测结
酶联免疫(ELISA)法的影响因素
酶联免疫(ELISA)是如今检验科常用的免疫学检测方法之一,其操作简单,无须特殊设备,使其在各级医院都有应用。但是,如果忽视了影响其结果的因素,难免会造成假阴性或假阳性,因此,了解影响实验的因素,减少差错事故的发生是极其必要的。素质因素实验室人员的素质主要包括五个方面:思想素质、文化素质、技术素质、
ELISA法检测HIV抗体的影响因素
酶联免疫吸附实验(ELISA)是一种常用的固相免疫测定方法,被广泛应用于各种抗原和抗体的测定。《全国艾滋病检测技术规范》(2009年修订版)中要求:各筛查实验室在进行抗体检测时,先用第一种筛查试剂(高敏感性ELISA)检测,出现阴性反应报告“HIV抗体阴性”,出现阳性反应时不可直接报告阳性结果,则用
ELISA法检测的影响因素及其对策(二)
二、 操作的影响因素2.1 试剂的准备试剂的质量如抗原抗体的纯度及亲和力、标记物的比活性、滴度及特异性等直接影响检测结果,为保证检测质量,所有试剂必需经国家食品药品监督管理总局注册批准、批检测合格,临床评估特异性、敏感性、稳定性较高且在有效期内才有使用价值。不同厂家试剂敏感性、特异性不尽相同,有报道
ELISA法检测的影响因素及其对策(一)
酶联免疫吸附试验(ELISA)是目前临床实验室检测免疫学指标最受欢迎、应用范围最广泛的方法之一,广泛应用于乙肝、丙肝、梅毒、艾滋病以及结核等传染类疾病的诊断及激素的检测,具有灵敏度高、特异性强、快速简便、重复性好、成本低、环保且适合大批量人群筛查等优点,虽然操作简单,但是一些影响因素不容小觑,临床待
ELISA测定试剂盒手工操作
ELISA测定试剂盒操作技术的影响:1)应保证清洁,整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸,以上的措施可以使“花板”降至低限度,从而提高检测的特异性,并得到更准确。 2)合理安排检测量,ELISA试剂盒以免反应板过多造成洗板等待时间长。3)加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。4)用洗板机洗板时,保
影响卡尔费休法水分测定的因素
1:卡氏液标定:中国药典是选用纯化水进行卡氏液的标定。要标定三次以上,且三次连续标定的结果的相对标准偏差应小于1%。其标定的F值放能作为水分测定的F值使用。中国药典要求水的加入量应为10-25mg。但是作为实际使用考虑。个人建议,消耗卡氏液的量最好不要超过滴定管的一次加入量,如果超过滴定管的一次加入
ELISA的优点和影响因素
ELISA检测技术的优点近二十几年来,免疫学分析方法发展很快,特别是在使用标记了的抗原和抗体的分析技术以后,使原来许多经典的分析方法在敏感性和特异性方面都不能相比。继50年代的免疫荧光(IFA)和60年代的放射免疫(RIA)分析技术之后,在70年代初期又建立了用酶来标记抗原或抗体的分析技术。由于酶的
ELISA的优点和影响因素
ELISA检测技术的优点近二十几年来,免疫学分析方法发展很快,特别是在使用标记了的抗原和抗体的分析技术以后,使原来许多经典的分析方法在敏感性和特异性方面都不能相比。继50年代的免疫荧光(IFA)和60年代的放射免疫(RIA)分析技术之后,在70年代初期又建立了用酶来标记抗原或抗体的分析技术。由于酶的
ELISA法检测乙肝五项的影响因素及临床应用
乙肝两对半又称乙肝五项 ,为国内常用的乙肝病毒(HBV)感染的检测血清标志物。乙肝病毒免疫学标记有表面抗原(HBsAg)、表面抗体(抗-HBs或HBsAb)、e抗原(HBeA g)和e抗体(抗-HBe或HBeAb)、核心抗原(HBcAg)和核心抗体(抗-HBc或HBcAb)”。可检测患者是否感染乙肝
乙肝五项(ELISA法)手工操作不当结果分析
随着现代临床免疫学不断发展,ELISA法比较灵敏,不需特殊设备,可以定性分析,所以应用发展迅速。ELISA手工法已成为医学检验领域的现实。但在实际工作中,可能会因操作不当而出现一些异常指标。近几年来笔者在免疫室工作中获得一些经验和体会,现介绍如下[1,2]。 (1)待检血清应新鲜或
乙肝五项(ELISA法)手工操作不当结果分析
随着现代临床免疫学不断发展,ELISA法比较灵敏,不需特殊设备,可以定性分析,所以应用发展迅速。ELISA手工法已成为医学检验领域的现实。但在实际工作中,可能会因操作不当而出现一些异常指标。近几年来笔者在免疫室工作中获得一些经验和体会,现介绍如下[1,2]。 (1)待检血清应新鲜或冰冻保存,不
旋光法的影响因素
1、浓度:大多数光学活性物质的比旋光度都或多或少地受浓度的影响;2、溶剂:溶剂对比旋光度的影响差别很大,和溶剂分子与溶质分子之间的作用有关。因此在报道比旋光度时,均需注明所用的溶剂和浓度,如“c=1,CHCl3”表明系在氯仿中配成1%浓度的溶液进行测量的。3、温度:进行测量时应保持在恒定温度并标明之
影响ELISA实验的因素和对策(二)
参考ELISA#加样 温 育: 不好的操作原因: 温育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗彻底; 温育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗彻底。 解决办法: 贴封片或加盖:为避免蒸发,板上应加盖,也可用塑料贴封纸或保鲜膜复盖板孔,反应板不宜叠放,
实验操作因素对ELISA结果的影响
ELISA测定一般遵循以下步骤:固相包被→加样品→温育→洗涤→加酶结合物→温育→洗涤→加底物→温育→显色→终止显色→比色正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。ELSIA操
影响ELISA试剂盒操作的因素
一、酶免ELISA试剂盒特异性要素1、固相载体的挑选.ELISA中常用的固相载体有微量滴定板、小珠和小试管三种,以微量滴定板最为常见.它具有杰出的吸附功能,孔底透明度高,空白值低,各板之间、同一板各孔之间功能附近.聚苯乙烯ELISA板因为质料的不一样和制造技能的不同,各商品的质量区别很大.因而,在挑
影响ELISA实验的因素和对策(一)
ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在科研上得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。 下面将操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下: 操作步骤: 目录 [隐藏] 1 选择试剂: 2 标本收集与保存: 3 试剂
ELISA检测抗HCV影响因素分析
ELISA检测抗HCV已是血站、医院的常规检测项目,虽然该方法操作简单,灵敏度高,但在实际操作中,ELISA检测抗HCV结果假阴性、假阳性问题还是比较常见,该临床诊断给治疗带来很大困难。影响ELISA检测抗HCV因素众多[1]。现就比较常见的影响因素加以分析总结。 1 试剂影响因素
ELISA检测抗HCV影响因素分析
ELISA检测抗HCV已是血站、医院的常规检测项目,虽然该方法操作简单,灵敏度高,但在实际操作中,ELISA检测抗HCV结果假阴性、假阳性问题还是比较常见,该临床诊断给治疗带来很大困难。影响ELISA检测抗HCV因素众多[1]。现就比较常见的影响因素加以分析总结。 1 试剂影响因素 目
ELISA检测抗HCV影响因素分析
ELISA检测抗HCV已是血站、医院的常规检测项目,虽然该方法操作简单,灵敏度高,但在实际操作中,ELISA检测抗HCV结果假阴性、假阳性问题还是比较常见,该临床诊断给治疗带来很大困难。影响ELISA检测抗HCV因素众多[1]。现就比较常见的影响因素加以分析总结。 1 试剂影响因
酶活力测定的影响因素
影响酶活性的因素包括底物的浓度、酶浓度、酶反应的最适pH、最适温度、酶的激活剂、抑制作用,另外还包括试剂中表面活性剂的作用等因素。1.反应速度:大多数酶促反应是可逆反应,其速度既受底物浓度的影响,也受产物生成量的影响。酶反应动力学中所指速度是反应的初速度。当底物浓度较高时,在反应的初期,其浓度变化甚
影响溶测定的若干因素
药物溶出度仪是在体外对体内药物生物利用度进行研究和评价的有效的替代方法, 也是保证和衡量固体口服制剂生产工艺及质量是否合理和稳定的一项重要手段。药物溶出度测定是制药行业工作者们,实验测定的重要的工作环节之一。 RT612药物溶出度仪主要特点: 1.符合《中国药典》和《美国药典》及《药
影响氨氮测定的因素
苏爱梅等[13]实验发现,当水样呈酸性时,氨氮测定值为 0236mg/L,呈碱性时测定值为 1035 mg/L,呈中性时测定值为 0920 mg/L,酸碱度对氨 氮测定有影响.采用纳氏试剂测定氨氮时,加入 不同量的 NaOH 溶液对纳氏试剂反应影响较大, 经过多次实验,肖福东[34]认为当加入 05
免疫浊度测定的影响因素
1.抗原与抗体的比例 2.抗体的质量 3.抗原抗体反应的溶液 4.增浊剂
影响溶测定的若干因素
药物溶出度仪是在体外对体内药物生物利用度进行研究和评价的有效的替代方法, 也是保证和衡量固体口服制剂生产工艺及质量是否合理和稳定的一项重要手段。药物溶出度测定是制药行业工作者们,实验测定的重要的工作环节之一。 RT612药物溶出度仪主要特点: 1.符合《中国药典》和《美国药典》及《药物溶出度仪
操作因素对ELISA试剂盒的影响
操作要素对ELISA试剂盒的影响ELISA试剂盒测定过程:固相包被→加待测样品→温育→洗刷+加酶标物→温育→洗刷→加底物→温育一加停止液→比色→断定成果。ELISA试剂盒操作较冗杂,在操作中应留意以下5个方面。跟着病况的发展或由其他要素影响,某些抗体在机体内的含量发作大幅动摇,因此有必要对标本进行预
逆流色谱法的影响因素
由于高速逆流色谱是无需任何固态载体支撑的液-液色谱,其中作为固定相的液体在色谱柱中的保留程度对于高速逆流色谱的分离过程是十分重要。首先,所选择的溶剂体系对固定相保留率有很大的影响,如两相密度差、粘度、界面张力等。两相的密度差对固定相保留率的影响最大,固定相保留率和密度差基本呈线性关系。其次,还存