ELISA法手工测定的影响因素
ELISA法具有灵敏度高、特异性强、重复性好的特点,并具有操作简便、无放射性危害的优点,因而多年来广泛应用于血站和医院的实验室中,但在测定中常会出现一些误差和问题。我们通过几年的实验观察,认为影响结果的因素有如下方面。 1 试剂盒 (1)抗原、抗体活性对效价的影响:主要是试剂中抗体(或抗原)的效价降低或失活,结果不易判断。再有ELISA法灵敏度高,对杂质的反应灵敏度也高,实验中空白对照OD值偏高或假阳性。(2)酶结合物浓度过高,也会导致OD值假性增高。 2 试验仪器 (1)加样器是否经过校正,酶免测定血清用血量很少,如手工加样器的性能不好,吸取样品不精确,会使结果忽高忽低。(2)每次洗板前,应检查洗板机针孔有无堵塞。......阅读全文
ELISA法
ELISA法是建立在抗原与抗体免疫学反应的基础上,因而,具有特异性。由于测定中需要酶标记抗原或抗体,酶分子与抗原或抗体分子的结合物可以催化底物分子发生反应,产生放大作用,正因为此种放大作用而使本法具有很高的敏感性。常用的ELISA分析1) 测定抗原A 将抗体吸附于固相表面,这个过程叫包被。B
ELISA法介绍
经典的化学分析方法(如滴定分析、重量分析、分光光度法)能对化学体系组分进行常量或微量分析,而对复杂生物体系的微量成分的测定往往力不从心。在此背景下,科学家研发了一系列测定生物体系成分含量的方法,其中免疫化学法(如酶联免疫法、免疫荧光法、放射免疫法)因具有高特异性、超微量分析生物体有机成分的特点而得到
间接-ELISA法
实验概要Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA。指将可溶性的抗原或抗体吸附到聚苯乙烯等固相载体上,进行免疫反应的定性和定量方法。1971年瑞典学者Engvail和Perlmann,荷兰学者Van Weerman和Schuurs分别报道将免疫技术发展为检测
直接-ELISA法
实验概要ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的
间接-ELISA法
实验概要Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA。指将可溶性的抗原或抗体吸附到聚苯乙烯等固相载体上,进行免疫反应的定性和定量方法。1971年瑞典学者Engvail和Perlmann,荷兰学者Van Weerman和Schuurs分别报道将免疫技术发展为检测
直接ELISA法
实验概要ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的
ELISA法检测立克次体
ELISA法检测立克次体 立克次体(Rickettsia)是一类专性活细胞内寄生的原核细胞微生物,具有细胞壁,含有RNA和DNA,以二分裂繁殖。需在细胞内繁殖,不能在无细胞的人工培养基中生长。它是属于人兽共患的自然疫源性疾病。临床上常见的有普氏立克次体、莫氏立克次体、恙虫病立克次体和Q热立克次体
什么是布ELISA法?
(C-ELISA) C-ELISA(Cloth-ELISA)是加拿大学者Blais,B. W.等于1989年建立的一种新型免疫检测技术。该方法是以疏水性聚脂布(Hydrophobic Polyester Cloth)即涤纶布为固相载体,这种大孔径的的疏水布具有吸附样品量大,可为免疫反应提供较大的表面
大鼠Ghrelin-ELISA检测法
大鼠Ghrelin ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 Ghrelin 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 Ghrelin与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠Ghrelin,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化
ELISA法检测细胞凋亡
(一) 原理细胞凋亡的发生,是由于钙-镁依赖性核酸酶进入核小体间切割DNA,产生180bp~200bp或其倍数的核小体片段。而核小体由于与组蛋白H2A、H2B、H3和H4形成紧密复合物而不被核酸内切酶切割。采用双抗体夹心酶免疫法,应用小鼠抗DNA和抗组蛋白的单克隆抗体,与核小体片段形成夹心结构,可特
ELISA法测细胞凋亡
细胞凋亡时,Ca2+,Mg2+离子依靠的内源性核酸内切酶将双链DNA从各核小体间连接区裂断,发生单或寡合苷酸小体,各核小体的DNA与核组蛋白H2A,H2B,H3,H4构成严密的复合物而对内源性核酸酶有抵抗使之不被内源性核酸酶裂解。主要运用单克隆抗DNA抗体和抗组蛋白抗体直接检测DNA和组蛋白。愈加安
ELISA法检测丝虫抗体
丝虫病(filariasis)在我国是由斑氏和马来丝虫寄生于人体淋巴系统所引起的慢性寄生虫病,通过蚊虫传播。早期临床特征主要为淋巴管炎和淋巴结炎,晚期为淋巴管阻塞形成象皮肿。常用的检查方法是用ELISA 法检测丝虫抗体。 [检测方法] ELISA法 [方法学原理] 将微丝蚴固定在玻片上制
免疫测定ELISA法
ELISA法是细胞因子首选检测法,可作定性或定量分析。双抗体夹心法是用于细胞因子测定的最常用方法,该法使用的抗体可以是针对同一抗原的多克隆抗体,也可以是针对同一抗原的不同抗原表位的单克隆抗体。 细胞因子测定的标本主要包括两大类,一是血清(血浆)、关节液等体液,可用于细胞因子和可溶性黏附分子的检
ELISA常用检测法——竞争法原理介绍
做ELISA实验,有几种常见的实验方法,他们分别是竞争法、捕获法、间接法、夹心法、而夹心法又可以分为双抗体夹心法和双抗原夹心法!在今天的文章中,将详细得跟大家讲述竞争法的实验原理!竞争法一般分为直接竞争法和间接竞争法,这里我们以直接竞争法为例进行原理讲解。直接竞争法,其基本原理是:将合适浓度的包被抗
大鼠缓激肽(Bradykinin)ELISA检测法
大鼠缓激肽(Bradykinin)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 Bradykinin 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 Bradykinin与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠Bradykinin,形成
大鼠Chemerin(Chemerin)ELISA检测法
大鼠Chemerin(Chemerin)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 Chemerin 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 Chemerin与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠Chemerin,形成免疫复
大鼠多巴胺(Dopamine)ELISA检测法
大鼠多巴胺(Dopamine)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 Dopamine 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 Dopamine与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠Dopamine,形成免疫复合物连接在
大鼠催乳素(PRL)ELISA检测法
大鼠催乳素(PRL)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 PRL 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 PRL与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠PRL,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Strepta
大鼠脑啡肽(Enkephalin)ELISA检测法
大鼠脑啡肽(Enkephalin)ELISA试剂盒原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 Enkephalin 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 Enkephalin与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠Enkephalin,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Strept
大鼠甘丙肽(Galanin)ELISA检测法
大鼠甘丙肽(Galanin)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 Galanin 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 Galanin与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠Galanin,形成免疫复合物连接在板上,辣
大鼠Apelin(Apelin)ELISA检测法
大鼠Apelin(Apelin)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 Apelin 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 Apelin与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠Apelin,形成免疫复合物连接在板上,辣根
ELISA法检测干扰素
干扰素(IFN)是一类具有广谱抗病毒活性的蛋白质,仅在同种细胞上发挥作用。根据其来源、理化及生物学性质的不同,可分为IFN-α、IFN-β、IFN-γ3种干扰素。其中,IFN-α主要由白细胞产生,IFN-β由成纤维细胞产生,IFN-γ主要由T细胞在免疫应答中受到抗原或丝裂原活化后分泌产生。3种干扰素
ELISA法检测肺炎衣原体
ELISA法检测肺炎衣原体 肺炎衣原体感染广泛存在于全世界,以隐性感染为主。其临床表现多样,主要引起人非典型肺炎,还可引起咽炎、支气管炎、虹膜炎、肝炎、心内膜炎及结节性红斑等,亦是艾滋病、白血病等疾病继发感染的重要病原,且与冠心病的发生相关,严重威胁人类健康。常见检查方法为ELISA法检测肺炎衣
狗心钠素(ANP)ELISA检测法
狗心钠素(ANP)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗狗 ANP 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的ANP与单抗结合,加入生物素化的抗狗ANP,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin
大鼠谷胱甘肽-(GSH)ELISA检测法
大鼠谷胱甘肽 (GSH)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 GSH 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 GSH与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠GSH,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptav
大鼠孕酮(PROG)ELISA检测法
大鼠孕酮(PROG)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 PROG 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 PROG与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠PROG,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Strep
布ELISA法的主要程序
⑴ 首先把抗布氏杆菌的血清包被(吸附)在聚脂布上,并经洗涤及封闭;⑵ 加被检样品并于室温下感作30分钟,然后洗5次;⑶ 加酶标记的抗布氏杆菌抗体,于室温下感作30分钟,然后洗涤5次;⑷ 加入底物液显色;⑸ 测定OD值。
大鼠MK(Midkine)ELISA检测法
大鼠MK(Midkine)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 Midkine 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 Midkine与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠Midkine,形成免疫复合物连接在板上,辣根
大鼠GRO(GRO)ELISA检测法
大鼠GRO(GRO)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 GRO/CINC-1/KC(CXCL1) 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 GRO与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠GRO,形成免疫复合物连接在板上,
大鼠Copeptin(Copeptin)ELISA检测法
大鼠Copeptin(Copeptin)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 Copeptin 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 Copeptin与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠Copeptin,形成免疫复合