酶联免疫吸附试验及其应用(三)
如采用改良过碘酸钠简化法制备酶结合物,比原法更简便、快速,所获制品质量良好。其方法是取10mg HRP加1ml0.1 mol/L醋酸钠或水溶解,充分混匀,约5分钟后加0.08 mol/L NaIO4,水溶液1.0ml混合后,置冰箱内20分钟,加0.4 mol/L乙二醇溶液0.5ml终止氧化反应,30分钟后加21% NaCL溶液0.3ml,再加1.2ml冰冷的无水乙醇(AR)沉淀醛化酶,离心去上清,沉淀酶再用6ml 80%冰冷的乙醇溶液浸泡洗涤一次后,离心倾去乙醇(尽量去除乙醇),沉淀用PH9.6的0.05 mol/L碳酸钠缓冲液2ml溶解,然后加入2ml羊或马抗人IgG(内含蛋白量20mg左右),搅拌均匀,置冰箱内过夜,次日取出加10mg NaBH4 混匀,3小时后加等量饱和硫酸铵沉淀酶结合物,离心,去上清,沉淀用50%饱和硫酸铵洗涤一次,离心,再去上清,沉淀用0.01 mol/L PBS 3ml......阅读全文
酶联免疫反应吸附试验(ELISA)共有几种类型
(一)双抗体夹心法双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法,操作步骤如下:(1)将特异性抗体与固相载体连接,形成固相抗体:洗涤除去未结合的抗体及杂质。(2)加受检标本:使之与固相抗体接触反应一段时间,让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合,形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。(3)加酶标抗体:使固
酶联免疫斑点试验的概念
中文名称酶联免疫斑点试验英文名称enzyme-linked immunospot assay;ELISPOT assay定 义一种酶联免疫技术。用于测定分泌特异性抗体或细胞因子的单个细胞对特异性抗原的应答能力,及产生应答的细胞数量。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断
什么是酶联免疫斑点试验
常用于类风湿因子、IFN-γ等细胞因子分泌细胞的定量测定。 在作ELISPOT时,选择的特异性抗体应该具有高亲和力、高特异性、低内毒素的特性。选用的细胞激活物必须不影响细胞的分泌功能。
酶联免疫斑点试验的实验目的
中文名称酶联免疫斑点试验英文名称enzyme-linked immunospot assay;ELISPOT assay定 义一种酶联免疫技术。用于测定分泌特异性抗体或细胞因子的单个细胞对特异性抗原的应答能力,及产生应答的细胞数量。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断
斑点酶免疫吸附试验的优点是什么?
加少量抗原于硝酸纤维素(NC)膜上,干燥后进行封闭;然后滴加样品血清;洗涤后再滴加酶标二抗,最后滴加能形成不溶有色物的底物溶液(如HRP标志物,常用二氨基联苯胺);阳性者即可在膜上出现肉眼可见的染色斑点。 优点:灵敏度较普通ELISA高,试剂用量少,操作简单,NC膜可长期保存不影响活性。
酶联免疫法简介
酶联免疫法(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay,ELISA)是将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法,用血清来进行检测。 酶联免疫法是利用抗体与酶复合物结合显色的原理,并保持抗体免疫活性,其已成为分析化学领域中的前沿课题。
酶联免疫分析缺点
①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。 ②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗
什么是酶联免疫
酶联免疫法简介 酶联免疫吸附剂测定法,简称酶联免疫法,或者ELISA法。 它的中心就是让抗体与酶复合物结合,然后通过显色来检测。步骤 ELISA用血清来检测,首先血液要经过至少半个小时的凝集,然后取血清。将酶复合物用稀释液稀释后,加血清及阴性、阳性对照,还有就是质控品(这是严格的要求,它的范
什么是酶联免疫
酶联免疫法,简称ELISA。它的中心就是让抗体与酶复合物结合,然后通过显色来检测。步骤其实很简单:ELISA用血清来检测,首先血液要经过至少半个小时的凝集,然后取血清(这是有些网友不理解为什么医院抽完了血对血置之不理的原因,其实是误会)。将酶复合物用稀释液稀释后,加血清及阴性、阳性对照,还有就是质控
酶联免疫斑点实验(ELIspot)——酶联免疫斑点实验(ELIspot)
实验材料血液样品细胞样品试剂、试剂盒70%乙醇PBS脱脂奶粉链霉亲和素检测抗体包被抗体仪器、耗材PVDF膜96孔培养板硝基纤维素底板免疫斑点板酶标板实验步骤一、包被96孔板 用70%乙醇浸润96孔板中的PVDF膜30 s 加入捕获抗体(PBS稀释),4℃过夜 倒空板中包被液,轻轻在纸上拍干,用PBS
酶联免疫吸附试验
酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immune sorbent aay, ELISA)是Engvall和Van weemen于1971年提出的。该法是以固相载体吸附技术和免疫酶技术相结合建立的一种检测方法,其操作简便,无需特殊设备,并具有高度的敏感性和准确性,所以受到大家的广泛重视,
酶联免疫斑点实验(ELIspot)_酶联免疫斑点实验(ELIspot)2
实验方法原理ELISPOT技术原理,一句话概括就是:用抗体捕获培养中的细胞分泌的细胞因子,并以酶联斑点显色的方式将其表现出来。实验材料细胞试剂、试剂盒PBSPBST乙醇包被抗体封闭液抗体稀释液检测抗体酶联亲和素AEC显色液PHA刺激物U-Cytech无血清培养基仪器、耗材ELISPOT读数仪超净工作
丙型肝炎病毒的酶联免疫试验法检测介绍
即:放射免疫诊断(RIA)或酶联免疫试验(ELISA)检测血清中抗HCV1989年,Kuo等建立了抗-C-100放射免疫试验方法(RIA),随后 Ortho公司又研制成功酶联免疫试验方法(ELISA)检测抗-C-100。这两种方法均用重组酵母表达的病毒抗原(C-100-3,为NS4编码的蛋白,含
技术答疑:放免和酶联免疫试验的区别
先说区别:(1)放射免疫分析(RIA)通过放射活性分子共价交联至抗体或抗原上,免疫反应后测定放射活性分子的放射信号来定量检测相应抗体或抗原等,可用于测定包括病毒、细菌、寄生虫、肿瘤以及小分子药物等的多种抗原和抗体。由于该方法特异性好,灵敏度高,且仪器自动化,操作简便,样品制备简单等,因而自50年代末
人ATP酶(ATPase)酶联免疫分析
人ATP酶(ATPase)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中ATP酶(ATPase)的含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人ATP酶(ATPase)水平。用纯化的人ATP酶(ATPase)抗体包被微孔板,
人Apelin酶联免疫分析
人Apelin酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中Apelin的含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人Apelin水平。用纯化的人Apelin抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次
酶联免疫法的原理
①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。 ②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原
人Neuritin酶联免疫分析
人Neuritin酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中Neuritin的含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人Neuritin水平。用纯化的Neuritin抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被
什么是酶联免疫法?
酶联免疫法是将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法,即酶联免疫吸附测定法。 1971年瑞典学者Engvall和Perlmann,荷兰学者Van Weerman和Schuurs分别报道将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法,即酶联免疫吸附测定法 (Enzyme-Lin
酶联免疫法的原理
①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。 ②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原
人(ASD)酶联免疫分析
人(ASD)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中雄烯二酮(ASD)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人雄烯二酮(ASD)水平。用纯化的人雄烯二酮(ASD)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加
什么是酶联免疫法
酶联免疫法是将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法,即酶联免疫吸附测定法。1971年瑞典学者Engvall和Perlmann,荷兰学者Van Weerman和Schuurs分别报道将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法,即酶联免疫吸附测定法 (Enzyme-Linked
猪酶联免疫分析(ELISA)
猪酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定猪血清,血浆及相关液体样本中胰岛素(Insulin)的含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪胰岛素(Insulin)水平。用纯化的猪胰岛素(Insulin)抗体包被微孔板,制成固
人(TotalT)酶联免疫分析
人(TotalT)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中总**(TotalT)的含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人总**(TotalT)水平。用纯化的人总**(TotalT)抗体包被微孔板,制成固相抗体,
什么是酶联免疫法
酶联免疫法是将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法,即酶联免疫吸附测定法。1971年瑞典学者Engvall和Perlmann,荷兰学者Van Weerman和Schuurs分别报道将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法,即酶联免疫吸附测定法 (Enzyme-Linked
鸭(T)酶联免疫分析
鸭(T)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定鸭血清,粪便及相关液体样本中**(T)的含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸭**(T)水平。用纯化的鸭**(T)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入**(T),再与HR
什么是酶联免疫法
酶联免疫法是将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法,即酶联免疫吸附测定法。1971年瑞典学者Engvall和Perlmann,荷兰学者Van Weerman和Schuurs分别报道将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法,即酶联免疫吸附测定法 (Enzyme-Linked
什么是酶联免疫法
酶联免疫法是将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法,即酶联免疫吸附测定法。1971年瑞典学者Engvall和Perlmann,荷兰学者Van Weerman和Schuurs分别报道将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法,即酶联免疫吸附测定法 (Enzyme-Linked
人(DHT)酶联免疫分析
人(DHT)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中双氢睾酮(DHT)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人双氢睾酮(DHT)水平。用纯化的人双氢睾酮(DHT)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加
人酶联免疫分析(ELISA)
人酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中邻氨基苯甲酸合成酶(ASA)的含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人邻氨基苯甲酸合成酶(ASA)水平。用纯化的人邻氨基苯甲酸合成酶(ASA)抗体包被微孔板,