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实时荧光定量PCR

实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限,实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度,并记录在电脑软件之中,通过对每个样品Ct值的计算,根据标准曲线获得定量结果。因此,实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的: 1)Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时,刚刚进入真正的指数扩增期(对数期),此时微小误差尚未放大,因此Ct值的重现性极好,即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增,得到的Ct值是恒定的。 2)Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系,可利用标准曲线对未知样品进行定量测定,因此,实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。 外标准曲线的定量方法相比内标法是一种准确的、值得信赖的科学方法。利用外标准曲线的实时荧光定量PCR是迄今为止定量最准确,重现性最好的定量方法,已得到全世界的公认,广泛用于基因表达研究、转基因研究,药物疗效考核、病原体检......阅读全文

实时荧光定量PCR

聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)可对特定核苷酸片断进行指数级的扩增。在扩增反应结束之后,我们可以通过凝胶电泳的方法对扩增产物进行定性的分析,也可以通过放射性核素掺入标记后的光密度扫描来进行定量的分析。无论定性还是定量分析,分析的都是PCR终产物。但是在许多

新冠病毒战疫主力设备PCR采购中标信息汇总统计

  分析测试百科网讯,根据《新型冠状病毒肺炎防控方案(第五版)》,作为新型冠状病毒肺炎诊断的“金标准”,除湖北地区在核酸检测基础上增加CT检测外,全国其它地区以及全球各地区,目前都以核酸检测阳性为确诊依据。核酸检测除了100多家试剂盒企业推出产品,主要比拼产能、灵敏度、获得医疗器械注册证的速度外,所

实时荧光定量PCR在人感染猪流感诊断中的作用

实时荧光定量PCR在人感染猪流感诊断中的作用彭年才12  张镇西1  兰邹然3  黄兵3  李红东2  李明2   苗保刚2 1西安交通大学生物医学分析技术与仪器研究所 2西安天隆科技有限公司 3山东省动物疾病预防与控制中心200

实时荧光定量PCR(Real-time PCR,QPCR,荧光定量)分类以...

实时荧光定量PCR(Real-time PCR,QPCR,荧光定量)分类以及实验步骤介绍实时荧光定量PCR(Real-time PCR,QPCR,荧光定量)技术(Real-time quantitative PCR),是指在(QPCR,荧光定量)反应体系中加入荧光基因,

实时荧光定量pcr结果分析

  实时荧光定量PCR技术是指在PCR反应体系中加入荧光染料或荧光集团,利用荧光信号来实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板浓度进行定量分析。  病原学检测是动物疾病确诊的关键点,而聚合酶链式反应(PCR)是目前病原检测的最常用的分子生物学技术,具有高敏感性的特征。PCR技术发展已日趋完

实时荧光定量PCR一种科学准确的定量方法

实时荧光定量PCR——一种科学准确的定量方法实时荧光定量PCR技术于1996年由美国Applied Biosystems公司推出,由于该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃,而且与常规PCR相比,它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点,目前已得到广泛应用。本文试就其定量原理、

实时荧光定量PCR技术及在我国卫生应急中的应用

实时荧光定量PCR技术(Real-time quantitative Polymerase Chain Reaction简称Real Time PCR,如果用于RNA检测,这被称为逆转录实时PCR即Real-time RT-PCR)是实时PCR法,它是指对DNA或经过反转入(RT-PCR

实时荧光PCR检测技术及其优势

众所周知,PCR(聚合酶链反应)技术自从1985年问世以来,经过十几年的发展,已成为实验室的常规技术。它是现代分子生物学研究中不可缺少的手段,是一种极为敏感的放大系统。相比于传统的临床诊断方法,核酸诊断是分子水平上的诊断技术,可以弥补传统临床诊断方法的某些缺陷,比如,核酸诊断能直接揭示病原体的存在,

浅析乳制品中高危害食源性致病菌——阪崎肠杆菌的快速...

浅析乳制品中高危害食源性致病菌--阪崎肠杆菌的快速检测摘   要:2006年国家出台的《婴幼儿配方乳粉生产许可证审查细则》中明确要求采用国际通行的“荧光PCR仪”作为出厂检验必备设备,此要求已成为乳品企业生产许可证核发的必要条件。本文简单综述了国际通行的保证食品安全的食

实时荧光PCR检测技术

实时荧光PCR检测技术众所周知,PCR(聚合酶链反应)技术自从1985年问世以来,经过十几年的发展,已成为实验室的常规技术。它是现代分子生物学研究中不可缺少的手段,是一种极为敏感的放大系统。相比于传统的临床诊断方法,核酸诊断是分子水平上的诊断技术,可以弥补传统临床诊断方法的某些缺陷,比如,核酸诊断能

知识分享:PCR仪的原理、分类、常见问题汇总!

  一、PCR的基本原理  聚合酶链反应(polymerasechain reaction,PCR)PCR反应过程与细胞内的DNA复制相似,但PCR的反应体系要简单的多,主要包括DNA靶序列、引物、4种单核苷酸dNTP、耐热DNA聚合酶以及合适的缓冲液体系。  PCR反应过程有以下3个步骤:1、变性

荧光定量PCR检查的影响

  1.实时荧光定量PCR无需内标实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限,实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度,并记录在电脑软件之中,通过对每个样品Ct值的计算,根据标准曲线获得定量结果。因此,实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的:  1)Ct值的重现性PCR循

实时荧光定量PCR原理、特点和应用领域(三)

1、Ct值的定义在荧光定量PCR技术中,有一个很重要的概念--Ct值。C代表Cycle,t代表threshold,Ct值的含义是:每个反应管内的荧光信号到达设定的域值时所经历的循环数。2、荧光域值(threshold)的设定PCR反应的前15个循环的荧光信号作为荧光本底信号,荧光域值的缺省设置是3-

实时荧光定量PCR原理、特点和应用领域(一)

聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)可对特定核苷酸片断进行指数级的扩增。在扩增反应结束之后,我们可以通过凝胶电泳的方法对扩增产物进行定性的分析,也可以通过放射性核素掺入标记后的光密度扫描来进行定量的分析。无论定性还是定量分析,分析的都是PCR终产物。但是在

PCR原理分类应用及国内外主要品牌汇总

PCR概念PCR,中文名是聚合酶链反应(基因扩增)基本原理 类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR是模拟体内DNA复制过程,在体外特异性扩增DNA片段的一种技术。PCR的应用领域:1、遗传病和某些疑难病的诊断2、病原体的检测。某些恶性疾病一般用微生

定 量 P C R

定量PCR 定义 以参照物为标准对PCR终产物进行分析或对PCR过程的进行监测,来评估样本中靶基因的拷贝数,称为定量PCR相对定量→绝对定量, 手工操作→自动化检测, 灵敏度与特异性多有很大的提高。 定量PCR的可行性 定量一般是在PCR扩增的指数期进行的。 特定的待扩增基因片段 起

定 量 P C R

定量PCR 定义 以参照物为标准对PCR终产物进行分析或对PCR过程的进行监测,来评估样本中靶基因的拷贝数,称为定量PCR相对定量→绝对定量, 手工操作→自动化检测, 灵敏度与特异性多有很大的提高。 定量PCR的可行性 定量一般是在PCR扩增的指数期进行的。 特定的待扩增基因片段 起始含量越大,则指

乳酸菌饮料中嗜酸乳杆菌的实时荧光定量PCR检测方法

  嗜酸乳杆菌是重要的益生菌,被大量应用在食品中。研究表明嗜酸乳杆菌能在乳制品中产生乳酸,并能通过氨基酸代谢增加风味。嗜酸乳杆菌主要作用有降低pH值、产生抗菌素(如嗜酸菌素和乳酸杀菌素等),在一定程度上抑制肠道中有害微生物的有害作用。有研究发现嗜酸乳杆菌对大肠杆菌、腹泻致病菌等均有抑制作用;大量的嗜

什么是阪崎肠杆菌?

一、阪崎肠杆菌是肠杆菌科的一种:1980年由黄色阴沟肠杆菌更名为阪崎肠杆菌。阪崎肠杆菌能引起严重的新生儿脑膜炎、小肠结肠炎和茵血症,死亡率高达50% 以上。目前,微生物学家尚不清楚阪崎肠杆菌的污染来源,但许多病例报告表明婴儿配方粉是目前发现的主要感染渠道。阪崎肠杆茵的生物学性状及其对人群的健

阪崎肠杆菌及实时荧光定量PCR检测

一、阪崎肠杆菌是肠杆菌科的一种:1980年由黄色阴沟肠杆菌更名为阪崎肠杆菌。阪崎肠杆菌能引起严重的新生儿脑膜炎、小肠结肠炎和茵血症,死亡率高达50% 以上。目前,微生物学家尚不清楚阪崎肠杆菌的污染来源,但许多病例报告表明婴儿配方粉是目前发现的主要感染渠道。阪崎肠杆茵的生物学性状及其对人群的健康危

深度解读荧光定量PCR仪所运用的技术

   深度解读荧光定量PCR仪所运用的技术  荧光定量PCR仪所用到的实时荧光定量PCR技术是通过对PCR扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测,而实现对起始模板定量及定性分析的目的。在实时荧光定量PCR反应中,引入了一种荧光化学物质,随着PCR反应的进行,PCR反应产物不断累计,荧光

深度解读荧光定量PCR仪所运用的技术

 深度解读荧光定量PCR仪所运用的技术  荧光定量PCR仪所用到的实时荧光定量PCR技术是通过对PCR扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测,而实现对起始模板定量及定性分析的目的。在实时荧光定量PCR反应中,引入了一种荧光化学物质,随着PCR反应的进行,PCR反应产物不断累计,荧光信号强度也等比

深度解读荧光定量PCR仪所运用的技术

  深度解读荧光定量PCR仪所运用的技术  荧光定量PCR仪所用到的实时荧光定量PCR技术是通过对PCR扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测,而实现对起始模板定量及定性分析的目的。在实时荧光定量PCR反应中,引入了一种荧光化学物质,随着PCR反应的进行,PCR反应产物不断累计,荧光信号强度也等

深度解读荧光定量PCR仪所运用的技术

   深度解读荧光定量PCR仪所运用的技术  荧光定量PCR仪所用到的实时荧光定量PCR技术是通过对PCR扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测,而实现对起始模板定量及定性分析的目的。在实时荧光定量PCR反应中,引入了一种荧光化学物质,随着PCR反应的进行,PCR反应产物不断累计,荧光

实时荧光定量 PCR技术原理与应用

聚合酶链式反应 ( PCR) 可对特定核苷酸片断进行指数级的扩增 。在扩增反应结束之后,我们可以通过凝胶电泳的方法对扩增产物进行定性的分析,也可以通过 放射性核素掺入标记后的光密度扫描来进行定量的分析 。无论定性还是定量分析,分析的都是 PCR 终产物。但是在许多情况下,我们所感兴趣的是未经 PCR

乐枫纯水为您解读实时荧光定量PCR实验用水

文章要点:上海乐枫市场部对目前疫情防控工作中的荧光定量PCR的核酸检测技术做了深入浅出地阐述,并为该实验中使用的纯水设备做了解析和介绍。转载请注明原文出处 目前疫情的防控工作取得了阶段性的成效,基于实时荧光定量PCR的核酸检测技术在新冠病毒快速鉴定及确诊中发挥了重要作用。 什么是

如何选定qPCR实验用纯水仪?

目前疫情的防控工作取得了阶段性的成效,基于实时荧光定量PCR的核酸检测技术在新冠病毒快速鉴定及确诊中发挥了重要作用。什么是实时荧光定量PCR?实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR)技术,简称qPCR,是在PCR反应体系中加入荧光物质(荧光染料或荧光标记的特异性探针

荧光标记基团的选择及其在荧光定量PCR中的应用

PCR实验室产品选择指南 荧光  基团是吸收一定波长的光子后发射特定波长的光波,可以作为抗体等分子的标记物,实时荧光定量PCR中的Taqman探针常用荧光基团FAM标记荧光基团和TAMRA标记。 荧光基团 吸收特定波长的光子后荧光染料(通常称为“荧光基团”或简称为“荧光

乳酸菌饮料中嗜酸乳杆菌的实时荧光定量PCR检测方法

嗜酸乳杆菌是重要的益生菌,被大量应用在食品中。研究表明嗜酸乳杆菌能在乳制品中产生乳酸,并能通过氨基酸代谢增加风味。嗜酸乳杆菌主要作用有降低pH值、产生抗菌素(如嗜酸菌素和乳酸杀菌素等),在一定程度上抑制肠道中有害微生物的有害作用。有研究发现嗜酸乳杆菌对大肠杆菌、腹泻致病菌等均有抑制作用;大量的嗜酸乳

普通PCR仪与荧光定量PCR仪有什么差异?

PCR仪根据DNA扩增的目的和检测的标准可以将PCR仪分为普通PCR仪,梯度PCR仪,原位PCR仪,实时荧光定量PCR仪四类,其中普通PCR仪与荧光定量PCR仪有什么差异?上海巴玖实业有限公司请到了刘师傅来讲述普通PCR仪与荧光定量PCR仪的差异。普通的PCR仪比荧光定量PCR仪少了荧光信号采集系统