薄层色谱仪斑点洗脱后测定法
薄层经展开后用刮刀或捕集器将斑点的吸附剂捕集后,再用适当有机溶剂洗脱,然后用可见、紫外分光光度法、荧光分光光度法测定含量。但样品斑点不能喷显色剂,以免影响测定,斑点位置的确定方法。样品在紫外线下发射荧光的,可在紫外灯下观察斑点并用针划去斑点位置。用碘蒸汽显色,在组分处理出棕色斑点(碘吸附后会挥发)。用标准物对照,将标准点于边上一测显色时,盖住样品,定出斑点位置。......阅读全文
薄层色谱仪斑点洗脱后测定法
薄层经展开后用刮刀或捕集器将斑点的吸附剂捕集后,再用适当有机溶剂洗脱,然后用可见、紫外分光光度法、荧光分光光度法测定含量。但样品斑点不能喷显色剂,以免影响测定,斑点位置的确定方法。样品在紫外线下发射荧光的,可在紫外灯下观察斑点并用针划去斑点位置。用碘蒸汽显色,在组分处理出棕色斑点(碘吸附后会挥发
薄层层析的洗脱测定法介绍
洗脱测定法,将展开后的组分斑点处的吸附剂刮下,用适宜溶剂将组分洗脱溶出,然后用适当方法进行定量测定。常用方法为比色法、紫外-可见分光光度法,也可用电化学分析法等。
薄层层析的定量测定
薄层层析的定量测定: 1)直接测定法:色谱分离后,直接用肉眼观察比较或用仪器扫描斑点而测定其含量。 a.目测法样品经色谱分离后,直接观察所得斑点的大小和颜色的深浅,并与标准品在相同条件下展开所得到的一系列已知不同浓度的标准斑点相比较,而近似地判断样品中所测成分的含量。 b.测面积法
薄层色谱怎么点出带状的斑点
2005版药典第一部附录部分的薄层色谱法主要用于限量检查,而第二部附录部分的薄层色谱法主要用于杂质检查。第一部中的薄层色谱法会使用薄层色谱扫描仪进行扫描,将扫描得到的谱图和积分数据用于物质定性或定量,而第二部中的薄层色谱法则不使用此仪器。第一部的薄层色谱法点样一般为圆点状或窄细的条带状,点样基线距底
薄层色谱怎么点出带状的斑点
2005版药典第一部附录部分的薄层色谱法主要用于限量检查,而第二部附录部分的薄层色谱法主要用于杂质检查。第一部中的薄层色谱法会使用薄层色谱扫描仪进行扫描,将扫描得到的谱图和积分数据用于物质定性或定量,而第二部中的薄层色谱法则不使用此仪器。第一部的薄层色谱法点样一般为圆点状或窄细的条带状,点样基线距底
荧光薄层检测斑点的原理是什么
薄层色谱法(TLC), 是将固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上,形成一均匀薄层。待点样、展开后,根据比移值(Rf)与适宜的对照物按同法所得的色谱图的比移值(Rf)作对比,也就是薄层色谱法中原点到斑点中心的距离与原点到溶剂前沿的距离的比值,用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法。薄层色谱法是快速
薄层色谱法的定量
定量分析1.目视比较法取标准物配制系列浓度的试样,将样品与标准物试样在同一薄层板上点样 ( 点样体积相同 ) ,展开,显色后用目视的方法比较样品斑点和标准斑点面积大小和颜色深浅,取与标样zui接近的斑点,按标准物质的含量进行定量计算,误差为±10%。2.洗脱法洗脱法是将展开后被分离化合物斑点区的吸附
酶联免疫斑点(ELISPOT)测定法
酶联免疫斑点(ELISPOT)测定法是一种在单细胞悬液中检测分泌某种特定蛋白质的细胞和定量分析产生该特定蛋白质的细胞频率的有力工具。1983年,Crekinsky等运用ELISPOT技术成功检出分泌特异性抗体的细胞频率,经过不断发展,目前该技术已广泛用于检测产生、分泌多种其他效应分子的细胞(如细胞因
酶联免疫斑点(ELISPOT)测定法
酶联免疫斑点(ELISPOT)测定法是一种在单细胞悬液中检测分泌某种特定蛋白质的细胞和定量分析产生该特定蛋白质的细胞频率的有力工具。1983年,Crekinsky等运用ELISPOT技术成功检出分泌特异性抗体的细胞频率,经过不断发展,目前该技术已广泛用于检测产生、分泌多种其他效应分子
薄层色谱法斑点拖尾的原因
拖尾现象产生之原因及解决方法:1、点样量太多,展开剂不能全部负载。解决方法:寻出合适之点样量后,再进行层析。2、展开剂pH值偏高。如以中性展开剂层析酸性物质时,常形成斑点拖尾。解决方法:在展开剂中加入酸,使解离受到抑制,即可防止斑点拖尾。3、展开剂的pH值偏低。如以中性展开剂层析生物碱和其它弱碱时,
薄层色谱法斑点拖尾的原因
拖尾现象产生之原因及解决方法:1、点样量太多,展开剂不能全部负载。解决方法:寻出合适之点样量后,再进行层析。2、展开剂pH值偏高。如以中性展开剂层析酸性物质时,常形成斑点拖尾。解决方法:在展开剂中加入酸,使解离受到抑制,即可防止斑点拖尾。3、展开剂的pH值偏低。如以中性展开剂层析生物碱和其它弱碱时,
薄层色谱法斑点拖尾的原因
拖尾现象产生之原因及解决方法:1、点样量太多,展开剂不能全部负载。解决方法:寻出合适之点样量后,再进行层析。2、展开剂pH值偏高。如以中性展开剂层析酸性物质时,常形成斑点拖尾。解决方法:在展开剂中加入酸,使解离受到抑制,即可防止斑点拖尾。3、展开剂的pH值偏低。如以中性展开剂层析生物碱和其它弱碱时,
薄层色谱法斑点拖尾的原因
拖尾现象产生之原因及解决方法:1、点样量太多,展开剂不能全部负载。解决方法:寻出合适之点样量后,再进行层析。2、展开剂pH值偏高。如以中性展开剂层析酸性物质时,常形成斑点拖尾。解决方法:在展开剂中加入酸,使解离受到抑制,即可防止斑点拖尾。3、展开剂的pH值偏低。如以中性展开剂层析生物碱和其它弱碱时,
薄层色谱法斑点拖尾的原因
拖尾现象产生之原因及解决方法:1、点样量太多,展开剂不能全部负载。解决方法:寻出合适之点样量后,再进行层析。2、展开剂pH值偏高。如以中性展开剂层析酸性物质时,常形成斑点拖尾。解决方法:在展开剂中加入酸,使解离受到抑制,即可防止斑点拖尾。3、展开剂的pH值偏低。如以中性展开剂层析生物碱和其它弱碱时,
薄层色谱法斑点拖尾的原因
拖尾现象产生之原因及解决方法:1、点样量太多,展开剂不能全部负载。解决方法:寻出合适之点样量后,再进行层析。2、展开剂pH值偏高。如以中性展开剂层析酸性物质时,常形成斑点拖尾。解决方法:在展开剂中加入酸,使解离受到抑制,即可防止斑点拖尾。3、展开剂的pH值偏低。如以中性展开剂层析生物碱和其它弱碱时,
薄层色谱法,样品为什么不出斑点
TLC不出斑点,无非是这样几种原因:量太少、没有展开(或者展开过头都集中到前沿了)、显色方法不对,等等。如果你的对照正常,那么后两个原因就可以排除,第一个原因的可能性最大。一般第一次展开显色的时候,同一个样品可以点上几个不同量的点,判断需要点多少的量最合适。
薄层色谱法,样品为什么不出斑点
TLC不出斑点,无非是这样几种原因:量太少、没有展开(或者展开过头都集中到前沿了)、显色方法不对,等等。如果你的对照正常,那么后两个原因就可以排除,第一个原因的可能性最大。一般第一次展开显色的时候,同一个样品可以点上几个不同量的点,判断需要点多少的量最合适。
薄层色谱法斑点拖尾的原因
拖尾现象产生之原因及解决方法:1、点样量太多,展开剂不能全部负载。解决方法:寻出合适之点样量后,再进行层析。2、展开剂pH值偏高。如以中性展开剂层析酸性物质时,常形成斑点拖尾。解决方法:在展开剂中加入酸,使解离受到抑制,即可防止斑点拖尾。3、展开剂的pH值偏低。如以中性展开剂层析生物碱和其它弱碱时,
薄层色谱法斑点拖尾的原因
拖尾现象产生之原因及解决方法:1、点样量太多,展开剂不能全部负载。解决方法:寻出合适之点样量后,再进行层析。2、展开剂pH值偏高。如以中性展开剂层析酸性物质时,常形成斑点拖尾。解决方法:在展开剂中加入酸,使解离受到抑制,即可防止斑点拖尾。3、展开剂的pH值偏低。如以中性展开剂层析生物碱和其它弱碱时,
薄层色谱法斑点拖尾的原因
拖尾现象产生之原因及解决方法:1、点样量太多,展开剂不能全部负载。解决方法:寻出合适之点样量后,再进行层析。2、展开剂pH值偏高。如以中性展开剂层析酸性物质时,常形成斑点拖尾。解决方法:在展开剂中加入酸,使解离受到抑制,即可防止斑点拖尾。3、展开剂的pH值偏低。如以中性展开剂层析生物碱和其它弱碱时,
薄层色谱法斑点拖尾的原因
拖尾现象产生之原因及解决方法:1、点样量太多,展开剂不能全部负载。解决方法:寻出合适之点样量后,再进行层析。2、展开剂pH值偏高。如以中性展开剂层析酸性物质时,常形成斑点拖尾。解决方法:在展开剂中加入酸,使解离受到抑制,即可防止斑点拖尾。3、展开剂的pH值偏低。如以中性展开剂层析生物碱和其它弱碱时,
薄层层析的定量分析方法介绍
洗脱测定法①洗脱测定法,将展开后的组分斑点处的吸附剂刮下,用适宜溶剂将组分洗脱溶出,然后用适当方法进行定量测定。常用方法为比色法、紫外-可见分光光度法,也可用电化学分析法等。原位扫描法②原位扫描法,将展开后的薄层板放在光密度计内,以一定波长的光照射,同时使斑点移过光路,由于斑点对光的吸收,可绘出峰形
薄层色谱样品斑点有尾巴是怎么回事
根据我做薄层这块的经验,我觉得吧,第一,你要检查看下你的层析板厚度,如果你按照药典要求制成样品、点样点上规定的量,但是铺制的板厚度不够,展开了,拖尾就出来了,;第二,点样量过大,也会拖尾。这两种情况都叫超载。如果前面两种情况都可以排除的话,那么还有一种情况,就是展开剂问题,适当加些酸或者碱,一般用乙
液固吸附色谱仪的操作步骤
液固吸附色谱仪的操作包括装柱、上样、洗脱、检测和收集等步骤。一、装柱:装柱是液固吸附色谱仪能否成功分离纯化物质的关键步骤之一。装柱的主要问题是保证固定相在色谱柱中均匀紧凑,不能有气泡和裂痕出现。一般色谱柱的直径与长度比为1:10~1:50,硅胶量是样品量的30~40倍,具体的选择要具体分析。装柱步骤
液固吸附色谱仪洗脱剂的洗脱能力
液固吸附色谱仪洗脱剂的洗脱能力:一、氧化铝和硅胶吸附剂:洗脱剂的洗脱能力为石油醚<已烷<苯<甲苯<乙酸乙酯<丙酮<乙醇<甲醇<水。二、聚酰胺吸附剂:洗脱剂的洗脱能力为二甲基甲酰胺<稀NaOH水溶液或稀氨水<丙酮<95%乙醇<30%乙醇<水。三、活性炭吸附剂: 洗脱剂的洗脱能力为水<10%乙醇<30%
薄层层析定量方法
可分为洗脱测定法、薄层层析法和原位扫描法:洗脱测定法①洗脱测定法,将展开后的组分斑点处的吸附剂刮下,用适宜溶剂将组分洗脱溶出,然后用适当方法进行定量测定。常用方法为比色法、紫外-可见分光光度法,也可用电化学分析法等。原位扫描法②原位扫描法,将展开后的薄层板放在光密度计内,以一定波长的光照射,同时使斑
罂粟果提取物的鉴别步骤及含量测定
鉴别步骤 (1)取本品约0.1g,加5%醋酸溶液5ml,振摇2分钟,用氨水调pH值约为9,用三氯甲烷-乙醇(9:1)10ml提取1次,分取有机层,置蒸发皿中,水浴蒸干,残留物加稀铁氰化钾试液,即显蓝绿色。 (2)取本品约0.1g,加水2ml与氨试液数滴,用三氯甲烷10ml,振摇10分钟,分取
氨苄西林的鉴别检查方法
鉴别(1)照薄层色谱法(通则0502)试验。供试品溶液取本品适量,加磷酸盐缓冲液(取无水磷酸氢二钠0.50g与磷酸二氢钾0.301g,加水溶解使成1000mlpH值为7.0)溶解并稀释制成每1ml中约含1mg的溶液。对照品溶液取氨苄西林对照品适量,加上述磷酸盐缓冲液(pH7.0)溶解并稀释制成每1m
氨苄西林的性状鉴别检查方法
性状本品为白色结晶性粉末;味微苦。本品在水中微溶,在乙醇、乙醚或不挥发油中不溶;在稀酸溶液或稀碱溶液中溶解。比旋度取本品,精密称定,加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含2.5mg的溶液,在60℃水浴上加热使溶解,冷却依法测定(通则0621),比旋度为+280°至+305°。鉴别(1)照薄层色谱法(通
薄层色谱法斑点“拖尾”现象的原因分析
1、产生原因及克服方法(1)点样过量在薄层色谱过程中化合物在薄层板上进行吸附———解吸附的移动过程中,任何一类吸附剂,它们的负载化合物的能力是有一定限度的,因点样过量而超载后,过剩的化合物被抛在后面,形成拖尾现象。(2)重复点样样点虽在同一垂直线而样点圆心未重合,致使样点呈近椭圆形,也是形成拖尾现象