要正确评价和应用稀释法和扩散法细菌药敏试验

药敏试验结果,敏感(S)、中介度(I)、耐药(R)是临床医师治疗细菌性感染、合理选用药物、提高疗效和避免滥用抗菌药物的重要依据。美国临床标准化委员会(NCCLS)推荐两种药敏试验方法:稀释法(琼脂或肉汤稀释法)和纸片扩散法。扩散法S、I、R分界点值是根据稀释法测得的Log 2最小抑菌浓度(MIC μg/ml)与扩散法测量抑菌环直经(mm)呈直线负相关的原理转换而来的,因此从理论上讲稀释法要比扩散法结果准确。但在日常工作中,由于稀释法固有的缺点和操作技术误差等原因,在某一特定的条件下扩散法可能比稀释法准确。一、药敏试验实验室评价1.稀释法药敏试验是定量试验,可确定被检菌对某抗菌药物的MIC和杀菌浓度(MBC)。稀释法可作为评价标准,特别是琼脂稀释法被誉为金标准。其他方法必须与稀释法比较才能确定其可靠性。肉汤稀释法被检菌必须分别接种一种含不同浓度抗菌药物系列管,工作量大,只适用于小量标本。琼脂稀释法则几十个被检菌可同时接种在......阅读全文

琼脂扩散试验的分类和试验方法

利用可溶性抗原与抗体在半固体琼脂内进行扩散,若抗原与抗体对应,并且比例适当,就会出现白色沉淀线,此为阳性反应。琼脂扩散试验可在试管内、平皿中以及玻片上的琼脂中进行。又可分为双向琼脂扩散试验和单向琼脂扩散试验两类。1、双向琼脂扩散试验双向琼脂扩散试验是将半固体琼脂倾注于平皿内或玻片上,待其凝固后,在琼

阿莫西林/克拉维酸在细菌药敏试验中需要注意的问题

 在2004年度北京市临床微生物室间质控活动中,我们发放了一株产超广谱β内酰胺酶的大肠埃希菌,要求做抗菌素阿莫西林/克拉维酸的敏感性试验。132个参加室间质控单位中的45个单位(大部分为三级甲等医院)做了阿莫西林/克拉维酸对大肠埃希菌的最小抑菌浓度(MIC)测定;45家单位中主要以3种不同的方法进行

正确应用药敏标准,-向临床报告准确的药敏结果

为了遏制我国的抗菌药物滥用及细菌耐药率的不断攀升,原卫生部于2012年5月8日发布了《抗菌药物临床应用管理办法》(卫生部令第84号),标志着我国抗菌药物临床应用管理已迈入了法制化、制度化轨道,明确了临床微生物室职责是提供病原学诊断和细菌耐药技术支持,参与抗菌药物临床应用管理工作[1]。目前我国参照全

正确应用药敏标准,-向临床报告准确的药敏结果

    为了遏制我国的抗菌药物滥用及细菌耐药率的不断攀升,原卫生部于2012年5月8日发布了《抗菌药物临床应用管理办法》(卫生部令第84号),标志着我国抗菌药物临床应用管理已迈入了法制化、制度化轨道,明确了临床微生物室职责是提供病原学诊断和细菌耐药技术支持,参与抗菌药物临床应用管理工作[1]

细菌内毒素检测实验_鲎试验法

实验方法原理鲎是一种海洋节肢动物,血液中含有一种变形细胞,此细胞的裂解物可与微量细菌内毒素起凝胶反应,即细胞裂解物中的一种酶被内毒素激活,使细胞裂解物中蛋白质形成凝胶。鲎试验具有快速、简便、灵敏等优点。  实验材料鲎试剂试剂、试剂盒生理盐水无菌水内毒素仪器、耗材安瓶习惯水浴箱实验步骤一、材料 1.

稀释培养测数法(MPN)

一、实验目的通过对好气性自生固氮菌的计数,了解稀释培养计数(MPN)的原理和方法。二、实验原理        最大或然数(most probable  number,MPN)计数又称稀释培养计数,适用于测定在一个混杂的微生物群落中虽不占优势,但却具有特殊生理功能的类群。其特点是利用待测微生物的特殊生

病毒的滴定实验——稀释法

实验步骤1.  以维持液(0.5% 水解乳蛋白Hank's 液)将病毒作连续10 倍稀释(每一稀释度换一新吸管)。2.  如选择滴定的稀释度为l0-6~10-8,则于试管架上排列8 支试管。l0-1~10-5共5 支管,每管如入1.8 毫升维持液;l0-6~10-8共3 管,每支加入4.5

稀释培养测数法(MPN)

一、实验目的通过对好气性自生固氮菌的计数,了解稀释培养计数(MPN)的原理和方法。二、实验原理   最大或然数(most probable  number,MPN)计数又称稀释培养计数,适用于测定在一个混杂的微生物群落中虽不占优势,但却具有特殊生理功能的类群。其特点是利用待测微生物的特殊生理功能的选

稀释涂布平板法计数原理

稀释平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落,即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法,即一个菌落代表一个单细胞。计数时,首先将待测样品制成均匀的系列稀释液,尽量使样品中的微生物细胞分散开,使成单个细胞存在(否则一个菌落就不只是代表 一个细胞),再取一定稀释度、一定量的稀释液接种

有限稀释法的基本介绍

  有限稀释法是一种常用的克隆方法,是指将需要再克隆的细胞株自培养孔内吸出并作细胞计数,计出1mL的细胞数。常用来筛选融合的动物细胞。  用HT培养液稀释, 使细胞浓度为50~60个/mL,于96孔培养板中每孔加0.1mL(5.5个细胞/孔)。接种2排,剩余细胞悬液用HT培养液作倍比稀释,再接种2排

石油产品闪点测定法为什么要分为闭口杯法和开口杯法

 石油产品测定法之所以分成闭口杯法和开口杯法,主要决定于石油产品的性质和使用条件。通常闭口杯法多用于正方形较大的轻质石油产品,如溶剂油、煤油等,由于测定条件与轻质油品的实际储存和使用条件相似,可以作为防火安全控制指标的依据。开口杯法多用于润滑油及重质石油产品。因为用开口杯法测定时,石油产品受热后所形

微生物实验室规范化质量控制

质量是临床的生命,正确的鉴定和药敏报告对医生的诊断和治疗有重要的参考价值,反之会误导医生。所以实验室应建立完善的制度以保证检验质量的正确和稳定。 一、实验室要建立质量控制的基本范围和内容         室内是室间质控的基础,而室间质控是对室内质控的验证,质量是临床微生物实验室的生命。在新发感染性疾

细菌的药物敏感性实验(一)

药物敏感试验简称药敏试验(或耐药试验)。旨在了解病原微生物对各种抗生素的敏感(或耐受)程度,以指导临床合理选用抗生素药物的微生物学试验。 一种抗生素如果以很小的剂量便可抑制、杀灭致病菌,则称该种致病菌对该抗生素“敏感”。反之,则称为“不敏感”或“耐药”。为了解致病菌对哪种抗菌素敏感,以合理用药,减少

关于注射用替加环素的药敏试验方法介绍

  在可能时,临床微生物学实验室应该为临床医生提供关于医院获得性及社区获得性病原菌的药敏概况的定期报告,此报告应当是当地医院及执业地区所用抗菌药物体外药敏试验结果的总结。这些报告有助于临床医生选择最有效的抗菌药物。  1、稀释法  抗菌药物最低抑菌浓度(MICs)的测定采用定量法。这些MICs 可用

微生物检验仪器的工作原理

  随着科学技术的发展,微生物仪器有逐步取代手工操作的趋势,尤其在血液自动化培养、细菌的自动化鉴定和药敏分析已经取得了突破性的进步。但是,现阶段仍不能完全取代 手工操作。跟据是否需要分离培养分为自动化培养系统和非培养系统[2]。  自动化培养系统自动化培养系统按照功能的不同又分为自动化血培养检测分析

微生物检测仪器有逐步取代手工操作的趋势

 病原性微生物是引起临床感染性疾病的重要因素。传统微生物检验一直沿用由革兰氏、巴斯德等科学家创造的传统方法,从培养基制备、样本接种、细菌培养、鉴定以及药敏试验等各个环节,很大程度上依赖手工操作,结果的判定和解释等方面受主观因素影响较大,难以进行质量控制。   随着微生物检验技术和相关学科的进步,操作

细菌的药物敏感性实验

实验材料大肠杆菌试剂、试剂盒普通营养琼脂培养基百病消青霉素蒸馏水酒精仪器、耗材药敏试纸接种环酒精灯打孔器牛津杯移液器滴头青霉素空瓶滤纸接种环培养皿镊子酒精灯温箱不锈钢圆管超净台药物敏感试验简称药敏试验(或耐药试验)。旨在了解病原微生物对各种抗生素的敏感(或耐受)程度,以指导临床合理选用抗生素药物的微

薄层色谱法的概念和应用方向

薄层色谱,或称薄层层析(thin—layer chromatography),是以涂布于支持板上的支持物作为固定相,以合适的溶剂为流动相,对混合样品进行分离、鉴定和定量的一种层析分离技术。这是一种快速分离诸如脂肪酸、类固醇、氨基酸、核苷酸、生物碱及其他多种物质的特别有效的层析方法,从50年代发展起来

差示扫描量热法分类和应用

分类1. 功率补偿型DSC2. 热流型DSCDSC是动态量热技术,对DSC仪器重要的校正就是温度校正和量热校正。应用差示扫描量热法(DSC)是一种热分析法。在程序控制温度下,测量输入到试样和参比物的功率差(如以热的形式)与温度的关系。差示扫描量热仪记录到的曲线称DSC曲线,它以样品吸热或放热的速率,

免疫吸附法的概念和应用特点

免疫吸附(immunoadsorption,IA)疗法是近15年发展而来的一种血液净化技术,是将高度特异性的抗原、抗体或有特定物理化学亲和力的物质(配体)与吸附材料(载体)结合制成吸附剂(柱),选择性或特异地清除血液中的致病因子,从而达到净化血液,缓解病情的目的。免疫吸附疗法不同于一般非特异的血液灌

荧光分析法的特点和应用介绍

特点:灵敏度更高g/ml,应用不如UV广泛。应用:①直接荧光光度法②作为HPLC的检测器(用的多)根据物质分子吸收光谱和荧光光谱能级跃迁机理,具有吸收光子能力的物质在特定波长光(如紫外光)照射下可在瞬间发射出比激发光波长长的光,即荧光。分子受特定光照射后处于激发态的分子返回基态时发出荧光, 其荧光强

电导分析法的定义和应用

是基于分析测量溶液的电导或电导改变为基础以确定待测物含量的分析方法。直接电导法是通过测量被测组分的电导值以确定其含量的分析方法;电导滴定法是根据滴定过程中电导的变化来确定滴定终点的分析方法。

冷原子吸收法的测定原理和应用

冷原子吸收法:本法适用于生活饮用水及其水源水中的总汞的测定。汞蒸气对波长253. 7 nm的紫外光具有最大吸收,在一定的汞浓度范围内,吸收值与汞蒸气的浓度成正比。水样经消解后加入氯化亚锡将化合态的的汞转为元素态汞,用载气带入原子吸收仪的光路中,测定吸光度。所用设备、耗材:锥形瓶、容量瓶:、汞蒸气发生

磷酸钙法的特点和应用介绍

磷酸钙法是磷酸钙共沉淀转染法,因为试剂易取得,价格便宜而被广泛用于瞬时转染和稳定转染的研究,先将DNA和氯化钙混合,然后加入到PBS中慢慢形成DNA磷酸钙沉淀,最后把含有沉淀的混悬液加到培养的细胞上,通过细胞胞膜的内吞作用摄入DNA。磷酸钙似乎还通过抑制血清中和细胞内的核酸酶活性而保护外源DNA免受

考马斯亮兰法的起源和应用

双缩脲法(Biuret法)和Folin—酚试剂法(Lowry法)的明显缺点和许多限制,促使科学家们去寻找更好的 蛋白质溶液测定的方法。 1976年由Bradford建立的考马斯亮兰法(Bradford法),是根据蛋白质与染料相结合的原理设计的。这种蛋白质测定法具有超过其他几种方法的突出优点,因而正在

质谱分析法的特点和应用

质谱分析法的特点是测试速度快,结果jing确。广泛用于地质学、矿物学、地球化学、核工业、材料科学、环境科学、医学卫生、食品化学、石油化工等领域以及空间技术和G安工作等特种分析方面。

压差法透气仪应用行业和标准

  GT-V03压差法气体渗透测试仪是一款专业的膜片类材料气体透过率测试仪,适用于塑料薄膜、复合膜、共挤膜、工程材料、金属箔片等多种材料在多种温度下的气体透过率、溶解度系数、扩散系数、渗 透系数的测定。    压差法透气仪应用标准   该仪器满足多项国家和国际标准:GB/T 1038-2000、

细胞斑点印迹法的原理和应用

应用类似检测细菌菌落的方法,可以对细胞培养物的特异序列进行快速检测,将整个细胞点到膜上,经NaOH处理,使DNA暴露、变性和固定,再按常规方法进行杂交与检测。有人曾用此法从105个培养细胞中检测到至少5pg的Epstein-Barr病毒DNA。完整细胞斑点印迹法可以用于筛选大量标本,因为它使细胞直接

微分电位溶出法的原理和应用

本法适用于生活饮用水及其水源水中锡的测定。在草酸介质中,以表面活性剂增敏,锡在汞膜电极上于-0.6v左右呈现一灵敏的溶出峰,该峰高与锡含量成正比。在其他条件不变的情况下测量溶出峰,与标准系列比较,进行定量。所用设备、耗材:烧杯、微量注射器、溶出分析仪及其三电极系统

克氏定氮法的应用和原理

  克氏定氮法 :天然含氮有机化合物(如蛋白质)与浓硫酸共热时分解出氨,氨与硫酸反应生成硫酸铵。在克氏定氮仪中加入强碱碱化消化液,使硫酸铵分解出氨。用水蒸气蒸馏法将氨蒸入硼酸溶液中,然后再用标准稀硫酸酸溶液进行滴定,滴定所用稀硫酸酸的量(mol)相当于被测样品中氨的量(mol),根据所测得的氨量即可