细胞斑点印迹法的原理和应用
应用类似检测细菌菌落的方法,可以对细胞培养物的特异序列进行快速检测,将整个细胞点到膜上,经NaOH处理,使DNA暴露、变性和固定,再按常规方法进行杂交与检测。有人曾用此法从105个培养细胞中检测到至少5pg的Epstein-Barr病毒DNA。完整细胞斑点印迹法可以用于筛选大量标本,因为它使细胞直接在膜上溶解,所以DNA含量甚至比常用的提取法还高,又不影响与32P标记的探针杂交,但它不适用于非放射性标记探针,因为DNA纯度不够,会产生高本底。......阅读全文
细胞斑点印迹法的原理和应用
应用类似检测细菌菌落的方法,可以对细胞培养物的特异序列进行快速检测,将整个细胞点到膜上,经NaOH处理,使DNA暴露、变性和固定,再按常规方法进行杂交与检测。有人曾用此法从105个培养细胞中检测到至少5pg的Epstein-Barr病毒DNA。完整细胞斑点印迹法可以用于筛选大量标本,因为它使细胞直接
斑点印迹法的技术方法介绍
中文名称斑点印迹法英文名称dot blotting定 义将点状样品吸印到特定的膜上进行检测的方法。如用硝酸纤维素膜吸印固体培养基上的菌落或噬斑,在膜上原位裂菌或裂解噬菌体后,与特定的标记探针杂交,从而直接从转化的DNA文库或噬菌体文库中筛选所需要的克隆;将不同稀释度的蛋白质吸附在膜上进行显色反应,
RNA印迹法的原理和应用
中文名称RNA印迹法英文名称Northern blotting定 义RNA从电泳凝胶转移到固相介质(如尼龙膜等)上,然后与互补的核苷酸序列杂交的操作过程。应用学科遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)
RNA足迹法的原理和应用
中文名称RNA足迹法英文名称RNA footprinting定 义分析RNA链与其他分子特异结合部位的方法。将标记的RNA与待研究的物质(如某种蛋白质或药物)进行结合反应后,用RNA酶清除未被结合的部分,再用电泳显示RNA链上结合位置的多寡和长度。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二
RYN-法的方法原理和应用
中文名称RYN 法英文名称RYN method定 义一种计算机分析程序,判断最可能出现的密码子嘌呤(R)、嘧啶(Y)和两者任意(N)使用的频率,推算未知DNA序列可读框的合理性。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
离子谱法的测定原理和应用
本法适用于生活饮用水及其水源水中钠和钾、锂、钙和镁的测定。水样中阳离子Li+ ,Na+ ,NH4+,K+ ,Mg2+和Ca2+ ,随盐酸淋洗液进入阳离子分离柱,根据离子交换树脂对各阳离子的不同亲合程度进行分离。经分离后的各组分流经抑制系统,将强电解质的淋洗液转换为弱电解溶液,降低了背景电导。流经电导
DNA酶足迹法的原理和应用
DNA酶足迹法是一种用来测定DNA-蛋白质专一性结合的方法。用于检测与特定蛋白质结合 的DNA序列的部位,可展示蛋白质因子同特定DNA片段之间的结合区域。其原理为:DNA和蛋白质结合以后便不会被DNAase分解,在测序时便出现空白区(即蛋白质结合区),从而了解与蛋白质结合部位的核苷酸对数目。在用酶移
狭线印迹法的原理和应用
中文名称狭线印迹法英文名称slot blotting定 义在杂交膜上点样的形状为狭窄的长条的技术。常借助一种专用的点样装置,能提高灵敏度。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
粒子轰击细胞法的定义和应用
在1987年,Vlein首先报道了应用此技术将TMV(烟草花叶病毒)RNA吸附到钨粒表面,轰击洋葱表皮细胞,经检测发现病毒RNA能进行复制,并以同样技术将CAT(Chloraphericol acetyltransferase氯霉素乙酰转移酶基因)基因导入洋葱表皮细胞。该技术已在烟草、水稻、小麦、黑
荧光光谱法的原理和应用
荧光光谱法具有灵敏度高、选择性强、用样量少、方法简便、工作曲线线形范围宽等优点,可以广泛应用于生命科学、医学、药学和药理学、有机和无机化学等领域。荧光分光光度计的发展经历了手控式荧光分光光度计,自动记录式荧光分光光度计,计算机控制式荧光分光光度计三个阶段;荧光分光光度计还可分为单光束式荧光分光光度计
冷原子吸收法的测定原理和应用
冷原子吸收法:本法适用于生活饮用水及其水源水中的总汞的测定。汞蒸气对波长253. 7 nm的紫外光具有最大吸收,在一定的汞浓度范围内,吸收值与汞蒸气的浓度成正比。水样经消解后加入氯化亚锡将化合态的的汞转为元素态汞,用载气带入原子吸收仪的光路中,测定吸光度。所用设备、耗材:锥形瓶、容量瓶:、汞蒸气发生
克氏定氮法的应用和原理
克氏定氮法 :天然含氮有机化合物(如蛋白质)与浓硫酸共热时分解出氨,氨与硫酸反应生成硫酸铵。在克氏定氮仪中加入强碱碱化消化液,使硫酸铵分解出氨。用水蒸气蒸馏法将氨蒸入硼酸溶液中,然后再用标准稀硫酸酸溶液进行滴定,滴定所用稀硫酸酸的量(mol)相当于被测样品中氨的量(mol),根据所测得的氨量即可
滴定分析法的原理和分类应用
滴定分析根据滴定所消耗标准溶液的浓度和体积以及被测物质与标准溶液所进行的化学反应计量关系,求出被测物质的含量,这种分析被称为滴定分析,也叫容量分析(volumetry)。利用溶液四大平衡:酸碱(电离)平衡、氧化还原平衡、络合(配位)平衡、沉淀溶解平衡。滴定分析根据其反应类型的不同,可将其分为:1、酸
“人体X形平衡法”的原理和应用
本文介绍了周尔晋创造的“人体X形平衡法”,它的原理和技术操作要点,及其在祖国医学经络穴位理论上的创新。西医沿着“分析”的思路,把病分得越来越细,研制越来越多的新药,这是至繁、至昂贵的路子;中医则更着重认识“人”,即更重“扶正”,开发人的自愈潜能,事半而功倍,至简而至廉。下面简要介绍一下“人体
微分电位溶出法的原理和应用
本法适用于生活饮用水及其水源水中锡的测定。在草酸介质中,以表面活性剂增敏,锡在汞膜电极上于-0.6v左右呈现一灵敏的溶出峰,该峰高与锡含量成正比。在其他条件不变的情况下测量溶出峰,与标准系列比较,进行定量。所用设备、耗材:烧杯、微量注射器、溶出分析仪及其三电极系统
斑点印迹——优化抗原和抗体浓度
斑 点 杂 交 方 法——优 化 抗 原 和 抗 体 浓 度对于一个给定的抗原,最佳的抗体浓度依赖的抗原和抗体本身。抗原和抗体的亲和力,以及一抗与二抗的特异反应都是不同的。最优抗原和抗体浓度可通过免疫印迹实验中使用不同浓度的抗原和抗体作用确定。另外,更快和更简单的方法是进行斑点印迹实验。以下是使用超
显微荧光光度法的原理和应用
中文名称显微荧光光度法英文名称microfluorophotometry定 义对细胞内原有能发光的物质或对特定的物质选择性染色使其能发出荧光进行分析的仪器,能观测荧光在细胞内的定位及强度。是研究某些成分在细胞内分布及含量的技术。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
吸收光谱法的原理和应用介绍
中文名称吸收光谱法英文名称absorption spectrometry定 义各种物质由于其结构不同,对电磁波的吸收也不同,每种物质都有其特征性的吸收光谱,据此可对物质进行定量和定性分析的方法。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
近红外光谱法的原理和应用
中文名称近红外光谱法英文名称near-infrared spectrometry;NIR定 义用可见光和红外光之间波长范围的光谱进行分析的方法。近红外反射光或透射光光谱可用于快速测定样品中的蛋白质、脂肪以及DNA测序样品中的染料等物质的含量。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二
舒法斯曼分析的方法原理和应用
中文名称舒-法斯曼分析英文名称Chou-Fasman analysis定 义一种从蛋白质的氨基酸序列预示其二级结构的统计学分析法。此法运用可溶性蛋白质已知的三维结构,计算氨基酸残基在特异的二级结构如α螺旋、β片层及β转角中出现的频率。据此可预示已知氨基酸序列的蛋白质或多肽可能的二级结构类型。应用学
催化示波极谱法原理和应用
本法适用于生活饮用水及其水源水中锌、总硒、铅和镉、钛的测定。①测定锌的原理:在酒石酸钾钠—乙二胺体系中,锌与乙二胺形成络合物,吸附于滴汞电极上,在—1.45V形成灵敏的络合物吸附催化波,其峰高与锌含量成正比。②测定总硒的原理:在高氯酸介质中,四价硒与亚硫酸钠形成硒的络盐,用EDTA作掩蔽剂,在氨-氯
印迹法(blotting)基本原理和应用
印迹法(blotting)即转移电泳,是20世纪70年代发展起来的一种新方法。Southern于1975年建立了检测特异DNA片段的DNA- RNA杂交法,称作Southern印迹法。1977年Alwine等把此方法应用到RNA的研究方面,称作Nouthern印迹法。1979年Towbin等则把
[机械法]细胞破碎的方法、原理和优缺点
1、高速组织捣碎机捣碎机转速可达10,000r/min,具高速转动的锋利的刀片,宜用于动物内脏组织的破碎。操作:将材料配成稀糊状液,放置于筒内约1/3体积,盖紧筒盖,将调速器先拨至最慢处,开动开关后,逐步加速至所需速度。特点:由于旋转刀片的机械切力很大,制备一些较大分子如核酸则很少使用。2、组织匀浆
斑点印迹的定义
中文名称斑点印迹英文名称dot blot定 义一种定性检测核酸或蛋白质的技术。即将待测核酸或蛋白点样于固相载体上,以同位素或非同位素标记探针与之杂交,通过显影或显色而进行检测。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(三级学科)
TUNEL法检测细胞凋亡实验原理和方法
原理 在细胞凋亡的过程中,基因组DNA会断裂产生双链、低分子量的DNA片段和高分子量的DNA片段,这些DNA链的缺口可以利用没标记法来识别。试剂盒就是通过催化DNA断端,来标记缺口。酶底物显色后,可以光镜检查被染色的细胞。
TUNEL法检测细胞凋亡实验原理和方法
细胞凋亡中染色体DNA的断裂是个渐进的分阶段的过程,染色体DNA首先在内源性的核酸水解酶的作用下降解为50-300kb的大片段。然后大约30 ﹪的染色体DNA在Ca ² 和Mg² 依赖的核酸内切酶作用下,在核小体单位之间被随机切断,形成180~200bp核小体DNA多聚体。
红外分光光度法的原理和应用
红外分光光度法是当物质分子吸收- 记波长的光 能,能引起分子振动和转动能级跃迁,产生的吸收光谱一般在2. 5〜25um的中红外光 区,称为红外分子吸收光谱,简称红外光谱。利用红外光谱对 物质进行定性分析或定量测定的方法称红外 分光光度法。由于物质分子发生振动和转动 能级跃迁所需的能量较低,几乎所有的
控制电位的电解分析法原理和应用介绍
控制电位的电解分析法 此法根据下列原理控制电极电位,电解方程为:V-iR=V′=(E+-E-)+ir式中V为电源电压;i为电流,R为电解池外线路的电阻;V′为加于两电极的外加电压;E+ 和E-为正极和负极的电位;r为电解池的内阻。由上式可得: -E-=V-i(R+r)-E+控制电流电解分析法当V与
核磁共振波谱法的原理和应用特点
核磁共振波谱法(英语:Nuclear Magnetic Resonance spectroscopy,简称 NMR spectroscopy 或 NMRS ),又称核磁共振波谱,是将核磁共振现象应用于测定分子结构的一种谱学技术。核磁共振波谱的研究主要集中在氢谱和碳谱两类原子核的波谱。人们可以从核磁共
荧光分光光度法的原理和应用
中文名称荧光分光光度法英文名称fluorospectrophotometry定 义利用物质吸收较短波长的光能后发射较长波长特征光谱的性质,对物质定性或定量分析的方法。可以从发射光谱或激发光谱进行分析。该法灵敏度高(通常比紫外分光光度法高2~3个数量级),选择性好。应用学科生物化学与分子生物学(一级