绿色荧光蛋白融合抗体研究

融合抗体 近二十年来,抗体生成技术有了飞速发展,已经从细胞工程抗体(杂交瘤技术一单克隆抗体)发展到了第三代抗体:基因工程抗体,尤其是噬菌体抗体库技术的出现,解决了人源抗体的研制问题,促进了各种性能优良抗体以及具有多种功能的抗体融合蛋白的开发。单链抗体(Single-chain variable fragment,ScFv)是研究得较多的一种小分子抗体,其优越性在于可在宿主细胞内大量表达,易于基因工程操作,尤其易于构建抗体融合蛋白。近年来,关于绿色荧光蛋白融合单链抗体的报道很多,国内也有相关报道,如程虹等报道将抗肝癌单链双功能抗体融合GFP真核表达载体并导人小鼠成纤维细胞NIH3T3表达并获得成功。因融合抗体具有与抗原结合及发射荧光两种特性,故这一人工分子可用做免疫染色的检测试剂,直接应用于流式细胞仪和免疫荧光的标记及肿瘤的检测等等。 由于技术上的的原因,一般融合抗体均置于原核表达系统如E.coli中表达。为便于表达蛋白的......阅读全文

绿色荧光蛋白在光伏发电应用领域的研究

  瑞典研究人员不再盯着植物作为样板,转而将目光投向拥有高超光伏转化能力的水母,开发出提升收获太阳能的技术。利用水母身上提取的绿色荧光蛋白(GFP),该小组制作的装置可用这些“黏黏绿”将紫外光转化为自由电子。该小组制造的电池由在二氧化硅基底上被一个小缝隔开的两个简单的铝电极组成,GFP置于两电极中间

绿色荧光蛋白的概念和发现

绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,简称GFP),是一个由约238个氨基酸组成的蛋白质,从蓝光到紫外线都能使其激发,发出绿色萤光。虽然许多其他海洋生物也有类似的绿色荧光蛋白,但传统上,绿色荧光蛋白(GFP)指首先从维多利亚多管发光水母中分离的蛋白质。这种蛋白质最早是由下

绿色荧光蛋白基因与红色荧光蛋白基因是同源的吗

绿色荧光蛋白基因与红色荧光蛋白基因是同源的(1)在该实验中,绿色荧光蛋白基因是目的基因.(2)③是将目的基因导入受体细胞的过程,当受体细胞是动物细胞时,采用最多也最有效的方法是显微注射技术.(3)GFP基因可以作为标记基因,标记基因的作用是鉴定受体细胞中是否含有目的基因.(4)动物细胞培养时,其培养

绿色荧光蛋白在胞外环境能激发荧光吗

绿色荧光蛋白在胞外环境能激发荧光吗绿色荧光蛋的发光机理比荧光素/荧光素酶要简单得多。一种荧光素酶只能与相对应的一种荧光素合作来发光,而绿色荧光蛋白并不需要与其他物质合作,只需要用蓝光照射,就能自己发光。在生物学研究中,科学家们常常利用这种能自己发光的荧光分子来作为生物体的标记。将这种荧光分子通过化学

绿色荧光蛋白的功能特点和作用

绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,简称GFP),是一个由约238个氨基酸组成的蛋白质,从蓝光到紫外线都能使其激发,发出绿色荧光。虽然许多其他海洋生物也有类似的绿色荧光蛋白,但传统上,绿色荧光蛋白(GFP)指首先从维多利亚多管发光水母中分离的蛋白质。这种蛋白质最早是由下

T克隆绿色荧光蛋白(GFP)基因实验

【原理】经TaqDNA聚合酶扩增后的PCR产物末端都带有单个A。正是基于这一原理,pGEM-T质粒经EcoRV切成平端后,在开口端加上一个T制成T载体,一方面避免了自身环化,另一方面由于T-A互补,从而提高了T载体与PCR产物之间的连接效率。由于T-A克隆只需纯化PCR产物,因而操作较为简便。pGE

绿色荧光蛋白肿瘤发病机制的应用

  GFP是一个分子量较小的蛋白,易与其他一些目的基因形成融合蛋白且不影响自身的目的基因产物的空间构象和功能。GFP 与目的基因融合,将目的基因标记为绿色,即可定量分析目的基因的表达水平,显示其在肿瘤细胞内的表达位置和量的变化,为探讨该基因在肿瘤发生、发展中的作用及其分子机制提供便利条件。  在肿瘤

绿色荧光蛋白(GFP)标记亚细胞定位

一、原理利用绿色荧光蛋白(GFP)来示踪胞内蛋白的技术。利用GFP融合蛋白技术来进行活细胞定位研究是目前较为通行的一种方法,在光镜水平进行研究,不需要制样,没有非特异性标记的影响。并且GFP的分子量为27kD,经激光扫描共聚集显微镜激光照射后,可产生一种绿色荧光,从而对蛋白质进行精确定位。激光扫描共

GFP绿色荧光蛋白的检测方法有哪些?

检测方法:1、实验准备 Modulus单管型多功能检测仪 Blue荧光模块(P/N 9200-040) 微量适配器(P/N 9200-928) 纯化的rAcGFP1蛋白(Clontech,NO.632502) 200ul加样器与20ul加样器 TE Buffer (10 mM Tris-

GFP绿色荧光蛋白的检测方法有哪些

检测方法:1、实验准备 Modulus单管型多功能检测仪 Blue荧光模块(P/N 9200-040) 微量适配器(P/N 9200-928) 纯化的rAcGFP1蛋白(Clontech,NO.632502) 200ul加样器与20ul加样器 TE Buffer (10 mM Tris-

GFP绿色荧光蛋白的检测方法有哪些

检测方法:1、实验准备 Modulus单管型多功能检测仪 Blue荧光模块(P/N 9200-040) 微量适配器(P/N 9200-928) 纯化的rAcGFP1蛋白(Clontech,NO.632502) 200ul加样器与20ul加样器 TE Buffer (10 mM Tris-

高职院校绿色校园与绿色人才培养有效融合路径

一、绿色校园建设和绿色人才培养概述早在20世纪初,国外就提出了“Green College”的概念,提倡在满足学校基本功能的前提下,建设可持续发展的和谐校园,以保护环境、爱护生态的理念来经营管理校园。这种绿色校园文化,不仅主张课堂上的环境教育,更加倡导将低碳、环保的理念渗透到全校广大师生及在校员工的

绿色荧光蛋白在信号转导中的应用

  新近研究发现,某些突变的 GFP 能够发生荧光共振能量转移 (fluorescence resonance energy transfer,FRET)。FRET 是一种从荧光分子的激发状态到临近基态接受分子之间量子力学能量转移的现象。FRET 发生的前提条件是,荧光接受分子必须在荧光提供分子释放

绿色荧光蛋白在自然生活中起到的作用

  绿色荧光蛋的发光机理比荧光素/荧光素酶要简单得多。一种荧光素酶只能与相对应的一种荧光素合作来发光,而绿色荧光蛋白并不需要与其他物质合作,只需要用蓝光照射,就能自己发光。  在生物学研究中,科学家们常常利用这种能自己发光的荧光分子来作为生物体的标记。将这种荧光分子通过化学方法挂在其他不可见的分子上

绿色荧光蛋白是怎样的一种物质

绿色萤光蛋白(green fluorescent protein),简称GFP,这种蛋白质最早是由下村脩等人在1962年在一种学名Aequorea victoria的水母中发现。其基因所产生的蛋白质,在蓝色波长范围的光线激发下,会发出绿色萤光。这个发光的过程中还需要冷光蛋白质Aequorin的帮助,

GFP(绿色荧光蛋白基因)的免疫印迹2

第二部分:免疫印迹染色[仪器、材料与试剂](一)仪器与器具1.电泳仪(要求为大电流低电压)2.电泳转移槽及转移夹3.水平摇床4.小塑料盒5.镊子6.搪瓷盘(二)材料1.醋酸纤维膜2.滤纸3.一次性塑料手套(三)试剂1.转移电泳缓冲液25mmo1/L Tris,192mmo1/L 甘氨酸,20%甲醇,

GFP(绿色荧光蛋白基因)的免疫印迹1

[实验原理]免疫印迹(Western blotting 或 Immunoblotting)一般由凝胶电泳、样品的印迹和免疫学检测三个部分组成。第一步是做SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳,使待测样品中的蛋白质按分子量大小在凝胶中分成带。第二步把凝胶中已分成条带的蛋白质转移到一种固相支持物上,用得最多的材料

融合蛋白的含义

融合蛋白(fusion protein)有两种不同的含义,一种是通过DNA重组技术得到的两个基因重组后的表达产物,另一种是介导两个细胞质膜融合的一组蛋白,如在仙台病毒脂双层外侧小叶中含有的两种糖蛋白之一,介导病毒被膜与宿主细胞质膜的融合作用。另一种糖蛋白是血细胞凝集素神经酰胺酶。 两个不同的蛋白质既

融合蛋白的含义

融合蛋白(fusion protein)有两种不同的含义,一种是通过DNA重组技术得到的两个基因重组后的表达产物,另一种是介导两个细胞质膜融合的一组蛋白,如在仙台病毒脂双层外侧小叶中含有的两种糖蛋白之一,介导病毒被膜与宿主细胞质膜的融合作用。另一种糖蛋白是血细胞凝集素神经酰胺酶。 两个不同的蛋白质既

融合蛋白的定义

融合蛋白(fusion protein)有两种不同的含义,一种是通过DNA重组技术得到的两个基因重组后的表达产物,另一种是介导两个细胞质膜融合的一组蛋白,如在仙台病毒脂双层外侧小叶中含有的两种糖蛋白之一,介导病毒被膜与宿主细胞质膜的融合作用。另一种糖蛋白是血细胞凝集素神经酰胺酶。 两个不同的蛋白质既

融合蛋白技术简介

在基因操作中,对一些分子数小的多肽基因常采用融合的方法与某一基因(如lac)相连,二者之间接上某一酶(如凝血酶)的切口,以增加在体内表达后产物的稳定性,也有的故意使两个分子串连融合以提高疗效,如IL-3与GM-CSF。也有与分泌性蛋白的信号肽基因组成融合基因,以使表达产物分泌到膜外或胞外。融合蛋白技

融合蛋白的概念

融合蛋白(fusion protein)有两种不同的含义,一种是通过DNA重组技术得到的两个基因重组后的表达产物,另一种是介导两个细胞质膜融合的一组蛋白,如在仙台病毒脂双层外侧小叶中含有的两种糖蛋白之一,介导病毒被膜与宿主细胞质膜的融合作用。另一种糖蛋白是血细胞凝集素神经酰胺酶。 两个不同的蛋白质既

融合蛋白的定义

融合蛋白(fusion protein)有两种不同的含义,一种是通过DNA重组技术得到的两个基因重组后的表达产物,另一种是介导两个细胞质膜融合的一组蛋白,如在仙台病毒脂双层外侧小叶中含有的两种糖蛋白之一,介导病毒被膜与宿主细胞质膜的融合作用。另一种糖蛋白是血细胞凝集素神经酰胺酶。 两个不同的蛋白质既

德科学家发现纳米抗体可控制荧光蛋白功能

德国科学家日前发现,一些不寻常的微小抗体,即所谓的纳米抗体,能以意想不到的精度改变绿色荧光蛋白(GFP)的特性。这些免疫系统抗体与蛋白质结合后可改变蛋白质的构造,进而影响其功能。     抗体是免疫系统用来鉴别和抑制外源物质(例如细菌和病毒)的一种蛋白质复合体,可以为免疫系统标示出作为目标的外源物质

高校实验室如何去观察绿色荧光蛋白GFP?

绿色荧光蛋白是一类存在于包括水母、水螅和珊瑚等腔肠动物体内的生物发光蛋白,当受到紫外或蓝光激发时,发射绿色荧光。其特点在于:它产生荧光无需底物或辅因子,发色团是其蛋白质一级序列固有的来源于水母的氨基酸残基组成。水母的绿色荧光蛋白很稳定,无种属限制,已在多种动植物细胞中表达成功并产生荧光。GFP 的荧

荧光素酶报告基因与绿色荧光蛋白(GFP)有什么区别

只能先就标题的问题谈谈我的认识。后面的追问我了解得也不全面。1。两者的结果检测方法不同。gfp绿色荧光蛋白,很直观,能够直接检到荧光,在普通的细胞培养条件下都能够观察到,对细胞的生命活动和其他并行的实验安排影响很小。荧光素酶报告基因使用起来比gfp多一个步骤,因为荧光素酶是个酶,不发荧光,发荧光的是

荧光素酶报告基因与绿色荧光蛋白(GFP)有什么区别

1。两者的结果检测方法不同。gfp绿色荧光蛋白,很直观,能够直接检到荧光,在普通的细胞培养条件下都能够观察到,对细胞的生命活动和其他并行的实验安排影响很小。荧光素酶报告基因使用起来比gfp多一个步骤,因为荧光素酶是个酶,不发荧光,发荧光的是它的底物,荧光素。荧光素在细胞里(要说萤火虫细胞我就不知道了

简述细胞融合的实验操作

  人、鼠细胞融合实验分三步进行∶首先用荧光染料标记抗体∶将小鼠的抗体与发绿色荧光的荧光素(fluorescin)结合,人的抗体与发红色荧光的罗丹明(rhodamine)结合;第二步是将小鼠细胞和人细胞在灭活的仙台病毒的诱导下进行融合;最后一步将标记的抗体加入到融合的人、鼠细胞中,让这些标记抗体同融

细胞融合技术的实验操作

人、鼠细胞融合实验分三步进行∶首先用荧光染料标记抗体∶将小鼠的抗体与发绿色荧光的荧光素(fluorescin)结合,人的抗体与发红色荧光的罗丹明(rhodamine)结合;第二步是将小鼠细胞和人细胞在灭活的仙台病毒的诱导下进行融合;最后一步将标记的抗体加入到融合的人、鼠细胞中,让这些标记抗体同融合细

以人鼠细胞杂交为例介绍细胞融合技术

人、鼠细胞融合实验分三步进行∶首先用荧光染料标记抗体∶将小鼠的抗体与发绿色荧光的荧光素(fluorescin)结合,人的抗体与发红色荧光的罗丹明(rhodamine)结合;第二步是将小鼠细胞和人细胞在灭活的仙台病毒的诱导下进行融合;最后一步将标记的抗体加入到融合的人、鼠细胞中,让这些标记抗体同融合细