kb细胞活力检测比色法检测的介绍
MTT比色分析法是由Mosmann在1983年Shou创,其原理是活细胞内的线粒体中的琥珀酸脱氢酶可以将MTT[化学名为3-(4, 5-二甲基噻唑-2)-2, 5-二苯基四氮唑溴盐,外观淡黄色]还原成蓝紫色结晶甲臜,并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜 (DMSO) 能溶解细胞中的甲臜,溶液颜色的深浅与所含的甲臜量成正比。用酶标仪在570nm波长下测定OD值。MTT方法能简单、快捷、准确地测定细胞的增殖反应,而且能避免由于人为操作因素造成的试验误差,大大地提高了实验结果的准确性和重现性。MTT方法目前大多用于检测培养细胞的生长和增殖、新药筛选、细胞毒性试验、肿瘤细胞敏感性试验等。加之其价格低廉,成为日前各实验室榆测细胞活性的Shou选方法之一。但是MTT法不太适合于悬浮细胞,因为在溶解甲臜之前,需将培养液吸出,这一步很容易造成甲臜流失,因而导致实验结果偏差。若不去除培养基,培养基中的血清和酚红会影响实验结果。为了消除培养......阅读全文
液氮速冻细胞对细胞的影响?
液氮是一种低温液体,当我们正常使用的时候呈现的是无色、无臭、无腐蚀的低温液体,汽化的时候会吸收大量热量造成冻伤现象,因为液氮的温度是-196℃,因此可以低温存储样本及细胞,但是存储在液氮罐内的液氮速冻细胞对细胞有影响吗?液氮冷冻保存主动脉瓣膜组织结构采用的是XTT比色法,形态学观察,免疫组织化学荧光
免疫细胞之T淋巴细胞
T淋巴细胞即胸腺依赖淋巴细胞(thymus dependent lymphocyte)。亦可简称T细胞。来源于骨髓的多能干细胞(胚胎期则来源于卵黄囊和肝)。目前认为,在人体胚胎期和初生期,骨髓中的一部分多能干细胞或前T细胞迁移到胸腺内,在胸腺激素的诱导下分化成熟,成为具有免疫活性的T细胞。成熟的
关于NK细胞的细胞表型介绍
与T细胞、B细胞相比,NK细胞表面标志的特异性是相对的。人NK细胞mIg-,部分NK细胞CD2、CD3和CD8阳性,表达IL-2受体β链 (P75,CD122),CD11b/CD18阳性。常用检测NK细胞的标记有CD16、CD56、CD57、CD59、CD11b、CD94和LAK-1。 一种稳
thp1细胞是什么细胞
thp1细胞是人类肿瘤细胞。THP 1 单核细胞型淋巴瘤 1640+10%胎牛血清。癌细胞有三个显著的基本特征即:不死性、迁移性和失去接触抑制。除此之外,癌细胞还有许多不同于正常细胞的生理、生化和形态特征。肿瘤组织由实质和间质两部分构成,肿瘤实质是肿瘤细胞,是肿瘤的主要成分,具有组织来源特异性。肿瘤
细胞死亡与细胞凋亡的区别
区别点坏死凋亡起因病理性变化或剧烈损伤生理性或病理性范围大片组织或成群细胞单个散在细胞细胞膜破损保持完整,一直到形成凋亡小体染色质呈絮状凝聚在核膜下呈半月状细胞器肿胀、内质网崩解无明显变化细胞体积肿胀变大固缩变小凋亡小体无,细胞自溶,残余碎片被巨噬细胞吞噬有,被邻近细胞或巨噬细胞吞噬基因组DNA随机
细胞转染所需细胞的筛选方法
1.确定抗生素作用的最佳浓度:不同的细胞株对各种抗生素有不同的敏感性,因此在筛选前要做预试验,确定抗生素对所选择细胞的最低作用浓度。1) 提前24 小时在96 孔板或24 孔板中接种细胞8 孔,接种量以第二天长成25%单层为宜,置CO2 孵箱中37℃培养过夜。2) 将培养液换成含抗生素的培养基,抗生
细胞化学词汇细胞质遗传
中文名称:细胞质遗传外文名称:cytoplasmic inheritance控 制:细胞质基因属 性:遗传现象和遗传规律来 源:线粒体、叶绿体细胞质粒上的基因简 称:细胞质基因(简称质基因)
细胞治疗之无血清细胞冻存
在细胞培养中,细胞冻存是最关键环节之一,尤其在细胞治疗、细胞存储中对细胞冻存更有特殊要求,下面就根据降温速度以及冻存液组分对细胞冻存做详细介绍。根据降温速度区分,细胞冻存可以分为程序降温冻存与非程序降温冻存。根据冻存方式不同可以分为慢速冻存(程序降温法)与快速冻存(非程序降温法)。程序降温冻存技术要
红细胞与血细胞的区别
1、红细胞是血细胞的一部分:血细胞约占血液容积的45%,包括红细胞、白细胞和血小板。因此红细胞是血细胞的一部分。2、功能不一样:红细胞的主要功能是运送氧。而血细胞的功能还包括白细胞主要扮演的免疫的角色,以及血小板在止血过程中起着的重要作用。3、形状不一样:血细胞直径6-9.5μm,平均7.2μm,呈
多细胞生物的细胞分化介绍
分化作为多细胞生物的一种生存技巧在自然选择作用下充分地显示生物形态的多样化和适应能力分化与分裂不同,分裂通常是指生物原始状态单细胞繁衍的方式;在多细胞生物中,无论是有性繁殖或是无性繁殖都是通过生殖细胞的分裂获得更多的细胞总数。说到底,分裂是所有生命延续的最基本方式,这种方式无沦生物繁衍如何演化都
流式细胞仪检测细胞因子的分泌和分离分泌细胞因子细胞
实验步骤基本方案细胞因子分泌实验材 料冰冷的或 37°C 预温的培养液。例如,培养人细胞用含 1 0 % 人 A B 血浆或自身血清的 1640 完全培养液。培养小鼠细胞用含 1 0 % 小鼠血清的 R P M 1-1640 完全培养基抗原, 1〜10ug/m l 肽 或 1〜100ug/m l 蛋
淋巴细胞对肿瘤细胞的细胞毒试验方法
1) 肿瘤细胞培养物制成悬液,并稀释至需要的细胞浓度. 2) 于微量试验班的小孔内分别接种0.2ml肿瘤细胞(内含5×102)个细胞,37℃培育24h. 3) 细胞贴壁后,轻轻轻去培养基,加1mlPBS洗涤,轻去洗涤液及未贴壁细胞. 4) 向小孔分别加入0.2ml不同浓度的淋巴细胞(
关于细胞株和细胞系以及原代细胞的区别
1、获取方法不同,原代细胞是指从机体取出后立即培养的细胞;细胞株是通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的培养物;细胞系是原代细胞培养物经首次传代成功后所繁殖的细胞群体。 2、原代培养的细胞一般传至10代左右就不容易传下去了,细胞的生长就会出现停滞,大部分细胞衰老
细胞凋亡与细胞坏死以及细胞程序性死亡的区别
细胞凋亡(apoptosis),又称程序性细胞死亡(programmed cell death),是指为维持内环境稳定,由基因控制的细胞自主的有序性的死亡。与细胞的坏死不同,细胞凋亡不是一种被动的过程,而是一种主动过程,它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等的作用。它并不是病理条件下自体损伤的一种现
细胞治疗临床招募-有望打破肝细胞癌免疫细胞治疗空白
日前,国内细胞治疗领域启动最大规模临床招募,这将有望打破肝细胞癌免疫细胞治疗空白,为肝细胞癌患者带来福音。 日前,针对国内细胞治疗领域最大规模临床招募的研究发布会——免疫细胞治疗用于防止肝癌根治术后复发的临床试验研究发布会在解放军总医院召开。“肿瘤免疫治疗是利用人体自身的免疫系统对抗肿瘤,清除
细胞内细胞因子的流式细胞仪检测
简介随着研究的进展,仅仅对细胞进行定量和活性的检测已不能满足需要。在单细胞水平研究细胞因子的表达能力对研究细胞因子在疾病中的作用越来越显的重要无比。目前检测单个细胞特定细胞因子的表达手段包括:ELIspot、原位杂交、免疫细胞化学、限制性稀释分析(limiting dilution analysis
细胞内细胞因子的流式细胞仪检测
简介 随着研究的进展,仅仅对细胞进行定量和活性的检测已不能满足需要。在单细胞水平研究细胞因子的表达能力对研究细胞因子在疾病中的作用越来越显的重要无比。目前检测单个细胞特定细胞因子的表达手段包括: ELIspot 、原位杂交、免疫细胞化学、限制性稀释分析( limiting dilution anal
细胞冷冻保存时,细胞冷冻管内的细胞浓度如何限定?
冷冻管内细胞数目一般为1x106cells/mlvial,融合瘤细胞则以5x106cells/mlvial为宜。
《自然—细胞生物学》:癌细胞施诡计“说服”健康细胞
加拿大科学家近日研究发现,癌细胞能够通过释放囊泡与别的细胞进行“通讯”。这些囊泡含有致癌蛋白,当融入到非恶性或轻度恶性细胞后,它们能够引发特定的机制,促进肿瘤生长。这一发现将改变我们对癌组织活动机制的认识,并有可能导致大的临床改革。相关论文4月20日在线发表于《自然—细胞生物学》(Nature Ce
细胞介导细胞毒作用检测法7:单细胞CMC试验
单细胞CMC试验1.用细胞培养液等量混合效应细胞和靶细胞,30℃水浴10分钟。室温中250×g离心5分钟,去上清液。同量靶细胞不加效应细胞同样处理作为对照。2.用少量细胞培养液轻轻悬浮细胞,吸管上下吹打5~6次。这一分散细胞的步骤关系到试验的准确性和重复性,应当设法保持技术的一致性。取少许细胞悬液,
细胞凋亡,细胞凋亡通路和细胞凋亡检测的几种检测方法
一、形态学观察方法 1、HE染色、光镜观察:细胞凋亡后呈圆形,胞核深染,胞质浓缩,染色质成团块状,细胞表面有“出芽”现象。 2、丫啶橙(AO)染色,荧光显微镜观察:活细胞核呈黄绿色荧光,胞质呈红色荧光。细胞凋亡|后(细胞凋亡,细胞凋亡通路,细胞凋亡检测)核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧
单细胞测序揭示肺癌肿瘤免疫细胞亚型的细胞图谱
最近免疫疗法的出现标志着多种癌症的研究和护理发生了巨大变化,给世界各地的患者和家庭带来了新的希望。对于那些对治疗有反应的人来说,结果可能是激动人心的。激活病人的癌症免疫系统可以杀死或缩小肿瘤,在某些情况下,会导致完全缓解。 尽管取得了重大进展,但只有少数人从免疫治疗中获益,原因尚不清楚。 免
无皮损母细胞性浆细胞样树突细胞肿瘤病例分析
母细胞性浆细胞样树突细胞肿瘤(BPDCN)是一种临床上呈高度侵袭性淋巴造血系统恶性肿瘤,极为罕见。2001年,由于肿瘤细胞具有母细胞性细胞学特征并且表达CD56,世界卫生组织(WHO)将其命名为母细胞性自然杀伤细胞(NK细胞)淋巴瘤。但是随后研究又证实CD56并不是NK细胞的特异性表达,而是来源于浆
抑制癌细胞,减缓癌细胞的生长-骨细胞竟然这么强!?
在乳腺癌患者中有这样的例子:一些男性和女性在他们的原发性疾病接受治疗20-30年后,他们的癌症在骨头中复发,但他们认为自己没有癌症。这一现象一直困扰着托马斯杰斐逊大学的研究员Karen Bussard博士。当一个病人在治疗后被认为是"无癌"的,那么原发性肿瘤中的乳腺癌细胞是如何到达骨骼的呢?在骨
细胞冻存和细胞复苏的方法步骤以及细胞的运输
细胞株(系)的使用,为医学研究和测试工作带来了极大的方便。但细胞的传代是有限制的,长期连续传代的细胞,不仅消耗大量的人力和物力,而且细胞的生长与形态等会有一定退变或转化,因而细胞失去原有的遗传特性,有时还会由于细胞污染而造成传代中断,种子丢失。因此,在实际工作中常需冻存一定数量的细胞,以备替换使用。
简述细胞毒性T淋巴细胞杀伤靶细胞的过程
CTL杀伤靶细胞是一个连续过程,可分为三个阶段,主要研究内容如下: 1、效应靶细胞结合:CTL是通过其膜上的受体TCR,即Ti-CD3分子与靶细胞结合,此时膜上的淋巴细胞功能相关抗原Ⅰ与靶细胞膜上的配基Ⅰ,又称细胞内粘附分子相互作用,即靶细胞与效应细胞初步接触。此时亲和力低,为非特异性的,但可
细胞介导的细胞毒作用(CMC)检测法:细胞的制备
CMC中效应细胞的制备1)用淋巴细胞分离液分离PBMC1.抽取正常人静脉血加到肝素抗凝管中,加2倍量磷酸盐(PBS)悬浮细胞。将此悬液小心加在淋巴细胞分离液上,400×g离心30分钟。2.离心后红细胞在管底,PBMC在血浆和淋巴细胞分离液的交界面。收集PBMC,用PBS洗涤细胞两次,每次离心150×
详解原代细胞、细胞系与细胞株之间的区别?
细胞培养物来源于原代外植体或分散的细胞悬液。通常在这样的培养物中原代细胞增殖形成汇合地单层细胞或密集地细胞悬液。这类细胞生命周期有限,在有限的生命周期内需掌握好细胞的生长空间,以保持细胞群中基因型和表型的一致性。 细胞系是不断生长,分化的细胞群,因其经过遗传改造,致使其具有无限增长的潜能。体外生长的
植物细胞中,细胞膜和细胞壁有什么作用
细胞膜:具有一定的流动性,保证了一些细胞的正常运动性和吞噬作用;具有选择透过性,控制物质的进出。细胞壁:主要由纤维素和果胶质组成,具有保护和支持的作用,使细胞具有一定的形状。细胞质:是细胞进行新陈代谢的主要场所,具有物质的运输功能。细胞核:是遗传物质的储存场所,是细胞代谢活动的控制中心。
细胞杂交
实验材料 PEG 试剂、试剂盒 完全培养基 无血清培养基 NaOH