什么是磷酸化
磷酸化是将磷酸基团加在中间代谢产物上或加在蛋白质（protein）上的过程。其中除去磷酸基团的酶称为磷酸酶。 蛋白质磷酸化可发生在许多种类的氨基酸（蛋白质的主要单位）上，其中以丝氨酸为多，接着是苏氨酸。除了蛋白质以外，部分核苷酸，如三磷酸腺苷（ATP）或三磷酸鸟苷（GTP）的形成，也是经由二磷酸腺苷和二磷酸鸟苷的磷酸化而来，此过程称为氧化磷酸化。另外在许多糖类的生化反应中（如糖解作用），也有一些步骤存在氧化磷酸化作用。信号传导中的作用：（1）细胞内的信号蛋白主要分为两大类：一类在蛋白激酶的作用下磷酸化，共价结合ATP所提供的磷酸基团；另一类则在信号作用下结合GTP，通常以GTP取代GDP。（2）这两种胞内信号蛋白的共同特征是，在信号达到时通过获得一个或几个磷酸基团而被激活，而在信号减弱时能去除这些基团，从而失去活性。在信号中继网中，某个信号蛋白磷酸化通常造成下游的蛋白依次发生磷酸化，形成磷酸化级联反应。（3）蛋白质的磷酸化主要集......阅读全文
质粒DNA的去磷酸化实验
去除 5' 端的磷酸基可防止质粒 DNA 的自身连接和环化。在体外连接反应中，DNA 连接酶可在邻近的两个分子间形成磷酸二酯键。但只有当一个分子的 5' 端带有磷酸基另一分子的 3' 端带有羟基时，这一反应才能完成。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理
磷酸化蛋白做WB小妙招
1、一定要在Lysis Buffer中加入蛋白酶抑制剂，还要加入一定量的磷酸酶抑制剂；2、加一抗后最好4度过夜，保证抗体有充分的结合时间，因为磷酸化的蛋白只占总蛋白量的极少部分；3、选择优质的磷酸化抗体，所以要选好的厂商，Novus为全球高端抗体品牌，其磷酸化抗体效果不错；4、抗体的稀释倍数要优化，
光合磷酸化作用（photophosphorylation）
光合作用中与电子传递相偶联的ADP与无机磷酸（Pi）酯化形成ATP的作用。由于形成ATP所需的能量是来自光能，故称光合磷酸化以区别于与呼吸链相偶联的磷酸化作用（氧化磷酸化）。有2种类型：（1）循环式光合磷酸化，是与循环的电子流相偶联，在此过程中仅形成ATP。（2）非循环式光合磷酸化，是与非循环
质粒DNA的去磷酸化实验
实验方法原理 去除 5' 端的磷酸基可防止质粒 DNA 的自身连接和环化。在体外连接反应中，DNA 连接酶可在邻近的两个分子间形成磷酸二酯键。但只有当一个分子的 5' 端带有磷酸基另一分子的 3' 端带有羟基时，这一反应才能完成。实验材料 小牛肠碱性磷酸酶（CIP) 或
光合磷酸化的主要机制
1966年，Andre Jagendorf实验证明，即使在暗处叶绿体也可以形成ATP，只要在类囊膜两侧形成人为的pH梯度。即将叶绿体在pH4缓冲液中泡12小时，然后迅速与含ADP、Pi的pH 8缓冲液混合，叶绿体基质的pH迅速升至8，但是类囊体中的pH仍是4，这时发现随着类囊膜两侧pH梯度的消失，同
去磷酸化的对象和方法
一、组织和抗体来源该研究中的AD及年龄、性别匹配对照者的脑组织来源于死后6小时内的尸体解剖(各取6例混合后制备匀浆)，AD确诊基于尸检组织切片的病理学检查，人脑组织均贮于-75℃直至使用。牛脑PP-2A和PP-2B的分离纯化分别参照Cohen等[5]和Sharma等[6]的方法。多克隆抗体92e和1
光合磷酸化的主要类型
与光合电子传递类同，光合磷酸化也被分为三种类型。1.非环式光合磷酸化(noncyclic photophosphorylation) 与非环式电子传递偶联产生ATP的反应。按图4-15，非环式光合磷酸化与吸收量子数的关系可用下式表示。2NADP+3ADP+3Pi+2H2O → 2NADPH+2H+3
氧化磷酸化的作用
氧化磷酸化作用是指有机物包括糖、脂、氨基酸等在分解过程中的氧化步骤所释放的能量，驱动ATP合成的过程。在真核细胞中，氧化磷酸化作用在线粒体中发生，参与氧化及磷酸化的体系以复合体的形式分布在线粒体的内膜上，构成呼吸链，也称电子传递链。其功能是进行电子传递、H+传递及氧的利用，产生H2O和ATP。
质粒DNA的去磷酸化实验
实验方法原理 去除 5' 端的磷酸基可防止质粒 DNA 的自身连接和环化。在体外连接反应中，DNA 连接酶可在邻近的两个分子间形成磷酸二酯键。但只有当一个分子的 5' 端带有磷酸基另一分子的 3' 端带有羟基时，这一反
磷酸化P/O比值的概念
P/O比值是指代谢物氧化时每消耗1摩尔氧原子所消耗的无机磷原子的摩尔数，即合成ATP的摩尔数。实验表明，NADH在呼吸链被氧化为水时的P/O值约等于2.5，即生成2.5分子ATP；FADH2氧化的P/O值约等于1.5，即生成1.5分子ATP。氧-还电势沿呼吸链的变化是每一步自由能变化的量度。根据ΔG
多肽磷酸化修饰及检测方法
磷酸化影响着细胞生命的方方面面。在细胞中，大概有1/3的的蛋白质被认为是通过磷酸化修饰的。蛋白质的磷酸化修饰与多种生物学过程密切相关，如DNA损伤修复、转录调节、信号传导、细胞凋亡的调节等。磷酸化蛋白质及多肽的研究可以帮助人们阐述上述过程的机理，进一步认识生命活动的本质。肽谷生物依据自身原料优势和技
光合磷酸化的类型介绍
光合磷酸化有两个类型：非循环光合磷酸化和循环光合磷酸化。 1.非循环光合磷酸化OEC处水裂解后，把释放到类囊体腔内，把电子传递到PSⅡ电子在光合电子传递链中传递时，伴随着类囊体外侧的转移到腔内，由此形成了跨膜的浓度差，引起了的形成；与此同时把电子传递到PSⅠ去，进一步提高了能位，而使还原为，此外，还
光合磷酸化有哪些形式？
光合磷酸化(photophosphorylation)是植物叶绿体的类囊体膜或光合细菌的载色体在光下催化腺二磷（ADP）与磷酸（Pi）形成腺三磷（ATP）的反应。有两种类型：循环式光合磷酸化和非循环式光合磷酸化。前者是在光反应的循环式电子传递过程中同时发生磷酸化，产生ATP。后者是在光反应的非循环式
磷酸化的主要类型和方式
磷酸化（phosphorylation）是指在生物氧化中伴随着ATP生成的作用。有代谢物连接的磷酸化和呼吸链连接的磷酸化两种类型。即ATP生成方式有两种。一种是代谢物脱氢后，分子内部能量重新分布，使无机磷酸酯化先形成一个高能中间代谢物，促使ADP变成ATP。这称为底物水平磷酸化。如3-磷酸甘油醛氧化
嘌呤核苷磷酸化酶的分类
按照PNP底物专一性和分子量大小，可以将不同生物来源的PNP分为为高分子量同源六聚体类和低分子量同源三聚体类。多数细菌PNP属六聚体，亚基分子量为25kDa，底物专一性不强，能接受腺苷、鸟苷、肌苷为底物；哺乳动物和部分微生物（Bacillus cereus、Bacillus stearothmoph
嘌呤核苷磷酸化酶的应用
在体外反应时，若加入另外一种嘌呤碱基或其类似物，可以合成新的嘌呤核苷或类似物，现已广泛用于微生物酶法生产核苷类抗病毒药物，如阿糖腺苷、利巴韦林等。
嘌呤核苷磷酸化酶的分类
按照PNP底物专一性和分子量大小，可以将不同生物来源的PNP分为为高分子量同源六聚体类和低分子量同源三聚体类。多数细菌PNP属六聚体，亚基分子量为25kDa，底物专一性不强，能接受腺苷、鸟苷、肌苷为底物；哺乳动物和部分微生物（Bacillus cereus、Bacillus stearothmoph
磷酸化酶的基本信息
磷酸化酶(phosphorylase)，可添加磷酸基团到受体上。以无机酸磷酸作为磷酸基团供体。
偶联磷酸化的基本信息
中文名称偶联磷酸化英文名称coupled phosphorylation定 义以各种磷酸化物质作为代谢中间产物的过程中，一种磷酸化物质的磷酸转移偶联着生成另一化合物的磷酸化过程。如糖酵解中1，3-双磷酸甘油酸降解为甘油酸-3-磷酸时偶联着ATP生成。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），新陈代
嘌呤核苷磷酸化酶的应用
在体外反应时，若加入另外一种嘌呤碱基或其类似物，可以合成新的嘌呤核苷或类似物，现已广泛用于微生物酶法生产核苷类抗病毒药物，如阿糖腺苷、利巴韦林等。
蛋白质磷酸化的测定实验
代谢标记 X射线片放射自显影检测32P标记的蛋白质 实验材料 细胞
分析磷酸化蛋白的新方法
蛋白磷酸化是重要的翻译后修饰，在调控基因表达和细胞功能方面起着关键作用。检测磷酸化时一般使用磷酸化抗体。近几年，市场上也出现了一些新的技术和产品，可实现磷酸化的灵敏检测。 Phos-tag™便是其中的一种。它最初由日本广岛大学医药分子功能科学研究室开发，后由Wako公司商业化。P
氧化磷酸化的影响因素
抑制剂能阻断呼吸链某一部位电子传递的物质称为呼吸链抑制剂。鱼藤酮、安密妥(或阿米妥)在NADH脱氢酶处抑制电子传递，阻断NADH的氧化，但FADH2的氧化仍然能进行。抗霉素A抑制电子在细胞色素bc1复合体处的传递。氰化物、CO、叠氮化物（N3-）抑制细胞色素氧化酶。对电子传递及ADP磷酸化均有抑制作
关于磷酸化酶的性质介绍
糖基转移酶类下的一个组群，即专司催化磷酸解作用的一类酶总称。广泛分布于动物(肝、肌)、植物、微生物中，包括糖原磷酸化酶(glycogenphosphorylase，EC2.4.1.1，分子量3.7×105)、麦芽糖磷酸化酶(EC2.4.1.8.)、1,3-β-D-低聚葡聚糖磷酸化酶(EC2.4.
嘌呤核苷磷酸化酶的作用
该酶可逆地催化嘌呤核苷磷酸解反应，将底物嘌呤核苷分解成对应的嘌呤碱及核糖-1-磷酸。
光合磷酸化的主要类型介绍
1.非环式光合磷酸化(noncyclic photophosphorylation) 与非环式电子传递偶联产生ATP的反应。按图4-15，非环式光合磷酸化与吸收量子数的关系可用下式表示。2NADP+3ADP+3Pi+2H2O → 2NADPH+2H+3ATP+O2 在进行非环式光合磷酸化的反应中，体
关于光合磷酸化的类型介绍
与光合电子传递类同，光合磷酸化也被分为三种类型。 1.非环式光合磷酸化(noncyclic photophosphorylation) 与非环式电子传递偶联产生ATP的反应。按图4-15，非环式光合磷酸化与吸收量子数的关系可用下式表示。 2NADP+3ADP+3Pi+2H2O → 2NADP
一磷酸核苷磷酸化的相关介绍
要参与核酸的合成。一磷酸核苷必须先转变为二磷酸核苷再进一步转变为三磷酸核苷。二磷酸核苷由碱基特异的核苷一磷酸激酶(nucleoside monophosphate kinase)催化，由相应一磷酸核苷生成。例如腺苷激酶催化AMP磷酸化生成ADP 二磷酸核苷激酶对底物的碱基及戊糖(核糖或脱氧核糖
高能磷酸化合物的概念
高能磷酸化合物是指水解时释放的能量在20.92kJ/mol以上的磷酸化合物。机体内有许多磷酸化合物如ATP，1,3—二磷酸甘油酸，氨甲酰磷酸，磷酸烯醇式丙酮酸，磷酸肌酸，磷酸精氨酸等，它们的高能磷酸键断裂时，可释放出大量的自由能，这类化合物称为高能磷酸化合物。ATP是这类化合物的典型代表。ATP水解
光合磷酸化的抑制剂
叶绿体进行光合磷酸化，必须：(1)类囊体膜上进行电子传递；（2)类囊体膜内外有质子梯度；(3)有活性的ATP酶。破坏这三个条件之一的试剂都能使光合磷酸化中止，这些试剂也就成了光合磷酸化的抑制剂。(1)电子传递链传递过程是：P680→pheo→Q→PQ→Fe-S－Cytb6→Cytf→PC→P700。