关于冰冻血小板的质量

"冰冻前及融化后使用前22±2℃平衡4h"肯定是没有必要的。"37℃静止水浴融化"要改为38℃循环水浴融化。将冷却速度控制在-1℃/min(不是2±1℃/min)左右尤其是-15℃~-40℃之间是关键;运输不能用冰盒,否则冰冻保存失败(常见);冷冻时冰箱温度低于-60℃(放入时开盖时间过长或冰箱制冷能力不够),冰冻保存失败(常见);冷冻是叠放或厚盒装,冰冻保存失败(常见);冰箱停电超过2小时,冰冻保存失败(常见);根据我研究的结果,反映冰冻血小板质量的两个最佳指标是磷脂酰丝氨酸阳性率(反映细胞膜不对称性的改变)和SPAT(薄片血小板聚集时间,反映血小板的释放和聚集功能)。顺便指出另外两处(有报道冰冻血小板的止血效果只有新鲜血小板的55%)。其中"止血效果"肯定不对,应该是提高血小板计数的能力约为新鲜血小板的50%。止血效果应该是优于液体保存血小板,文献及摘要如下TI: ......阅读全文

冰冻切片前的组织怎样保存

冰冻切片是不需要固定的,冰冻切片新鲜取材后,应立刻放入冰冻切片机内切片。如不能立即切片,要放入液氮中速冻,然后放在-70度低温冰箱内长期保存抗原性不会丢失。在手术台上取下的组织放到冷冻机里面-20度左右冻成硬块,制成切片用于快速诊断,该诊断仅作参考,应以石蜡诊断为主。

以色列发明乳腺癌冰冻疗法

  以色列冰疗公司日前研发用冷冻疗法治疗乳腺癌创新技术,患者不必开刀即可清除癌组织。   该技术用微细管道把液氮注入特制针头冷冻至-170摄氏度,针头多次插入患部,把癌变组织冻成冰球而杀死癌细胞。治疗过程约15分钟。公司总裁希默法布说,过去有高温灭癌细胞方法,但人体对高温敏感,患者痛苦。而冷冻有麻

组织芯片的制备——冰冻组织芯片

实验材料新鲜组织试剂、试剂盒OCT 包埋剂切片黏合剂仪器、耗材1 mm 孔径针载玻片实验步骤将每个需要制备 TMA 的新鲜组织,不经固定包埋在 OCT 包埋剂中, -20℃ 中冻成块。另外,再将 OCT 包埋剂倒在长 3 cm×宽 1.5 cm×高 lcm 的模具中, -20℃ 中冻成块。用特制的

冰冻切片前的组织怎样保存

冰冻切片组织可先固定后冻存,也可直接冻存,直接冻存一般采取液氮中速冻,然后转入-20度保存,冻存组织应避免反复冻融,且尽快进行切片或用OCT包埋(包埋后可放置较长时间)。未包埋的组织在-20度长期保存的组织会逐渐脱水(比如肌肉),影响形态学观察。

冰冻切片的原位杂交实验

基本方案             实验材料 冰冻切片 试剂、试剂盒

冰冻切片的原位杂交实验

细胞RNA的原位杂交实验用于在混杂的细胞群体和组织中、定位特异的mRNA在细胞中的存在位置。冰冻切片(frozen section)是一种在低温条件下使组织快速冷却到一定硬度,然后进行切片的方法。因其制作过程较石蜡切片快捷、简便,而多应用于手术中的快速病理诊断。实验材料冰冻切片试剂、试剂盒Tris·

地磅的冰冻故障和排除方法

一、故障现象 经计量检定人员现场检查发现,导致失准的原因是冰冻。 大雪过后,天空快速放晴,白天在阳光的照射下,气温回升,积雪融化,雪水顺着地磅的各处缝隙流到地磅底部,与常年沉积的灰尘融合在一起,形成潮湿的泥。 到了夜晚,气温急剧下降,泥和水结成冰, 将地磅与地面冻结在一起,形成了数个坚固的支撑点或支

冰冻切片免疫荧光实验步骤

1.组织用4%多聚甲醛固定6-8小时,转至20%蔗糖溶液至组织沉底。2.冰冻切片8-10μm,推荐瑞沃德冷冻切片机,温度稳定,切片质量高。室温放置30分钟以上防脱片,-20℃保存。从冰箱拿出的冰冻切片在室温放置30分钟以上再进行免疫荧光。3.1xPBS洗3次,每次3-5分钟。4.用2%BSA室温或3

冰冻切片的原位杂交实验

实验材料 冰冻切片试剂、试剂盒 Tris·ClEDTA甘氨酸PBSSSC乙醇甲酰胺硫酸葡聚糖DTTNaCl仪器、耗材 加湿盒水浴锅培养箱实验步骤 1.  从冰箱中取出载玻片,平衡至室温,再打开玻片盒。置载玻片于架中,浸泡于以50 mmol/l Tris·Cl(pH7.5)/5 mmol/l EDTA

石蜡切片和冰冻切片的比较

(1)要求做冰冻切片的不一定能做石蜡切片,这是今天我向一老师请教得出的结论。因为作石蜡切片时要高温烤片,可能会破坏组织的抗原性,如果组织的抗原性较稳定,则可作石蜡切片;但是要求做石蜡切片的,可作冰冻切片。(2)冰冻切片的优点是能够较好的保存组织的抗原免疫活性,做免疫组化时不需抗原修复这一步。缺点是细

冰冻切片免疫荧光实验步骤

1.组织用4%多聚甲醛固定6-8小时,转至20%蔗糖溶液至组织沉底。2.冰冻切片8-10μm,推荐瑞沃德冷冻切片机,温度稳定,切片质量高。室温放置30分钟以上防脱片,-20℃保存。从冰箱拿出的冰冻切片在室温放置30分钟以上再进行免疫荧光。3.1xPBS洗3次,每次3-5分钟。4.用2%BSA室温或3

冰冻切片前的组织怎样保存

冰冻切片组织可先固定后冻存,也可直接冻存,直接冻存一般采取液氮中速冻,然后转入-20度保存,冻存组织应避免反复冻融,且尽快进行切片或用OCT包埋(包埋后可放置较长时间)。未包埋的组织在-20度长期保存的组织会逐渐脱水(比如肌肉),影响形态学观察。

冰冻圈地区微塑料研究获进展

  微塑料通常指尺寸小于5 mm的塑料纤维、薄膜、碎片、微球等。微塑料具有质量轻、体积小、不易分解等特性,在水体、土壤、沉积物、大气等环境中广泛分布,带来潜在的气候环境影响,被认为是全球重要的环境污染问题之一。南北极以及青藏高原等典型冰冻圈地区通常远离人类活动密集区,是探究污染物来源、传输以及影响的

冰冻切片实验技巧(三)-学会看片子

这里指的是片子滑过刀片时就要辨别出质量的好坏,如果到镜下才发现片子的缺陷那就无法挽救。1. 观察片子的厚薄尽管冰冻切片机可以设置厚度,但人为辨别片子的厚度是否合适仍然很重要。片子太薄看起来象半透明的镜纸,片子太厚看起来混浊、柔性差,对我来说,5-6um的片子较合适,象一张薄的打印纸。 2. 片子破裂

GFP骨的冰冻切片实验方法

Protocol for Frozen section of GFP Bone:Fix the bone in 4% Paraformaldehyde at 4�C under constant agitation for 3 days.Decalcification in 14% EDTA sol

北半球冰冻圈变化研究项目启动

将揭示多年冻土退化对碳循环过程的影响  近日,由中国科学院寒区旱区环境与工程研究所承担的“973”计划项目“北半球冰冻圈变化及其对气候环境的影响与适应对策”启动。  该项目将围绕北半球冰冻圈对气候变化的响应与影响这一重大科学问题开展研究,并以冰冻圈变化对我国气候、灾害、水资源安全等的重大影响与应对策

从新鲜和冰冻血液中提取RNA

            试剂、试剂盒 磷酸盐缓冲液 淋巴细胞分离液  RNAzol B( Biogencsis UK) 氯仿 异丙醇 乙

冰冻组织固定和蔗糖浸制实验

实验材料冰冻组织试剂、试剂盒PBSPFA蔗糖实验步骤1. 于4℃,在2%PFA固定液(做免疫组织化学时)或4%PFA固定液(做原位杂交时) 中,固定小的组织样品或分离的胚胎(如第7、第8天的小鼠胚胎)30 min。2. 在PBS中清洗组织样品2次。3. 在30%蔗糖中浸制样品,直至组织沉下(1~3

冰冻切片的制作技巧及心得(一)

下面发一个有关冰冻切片制作的资料,来自于国外病理医生的经验和心得,现翻译过来供大家参考,欢迎提出不同的见解。冰冻切片技术1.从锋利的刀片开始我发现使用新的锋利的刀片时常常做出高质量的片子。我觉得在医疗场合中某些尽量省钱的做法显得有些因小失大。一般我对每位患者的标本都使用一组新的刀片,当片子的质量开始

冰冻组织固定和蔗糖浸制实验

实验方法原理 实验材料 冰冻组织试剂、试剂盒 PBSPFA蔗糖实验步骤 1. 于4℃,在2%PFA固定液(做免疫组织化学时)或4%PFA固定液(做原位杂交时) 中,固定小的组织样品或分离的胚胎(如第7、第8天的小鼠胚胎)30 min。2. 在PBS中清洗组织样品2次。3. 在30%蔗糖中浸制样品,直

从新鲜和冰冻血液中提取RNA

试剂、试剂盒 磷酸盐缓冲液 淋巴细胞分离液 RNAzol B( Biogencsis UK) 氯仿异丙醇乙醇 氯化钠 DFPC 处理的水 离心管1.5X 溶 液 D: 6 mol L 硫氰酸胍柠檬酸钠十二烷基肌氨酸钠 2-巯基乙醇 酚 乙酸钠仪器、耗材 离心管实验步骤 一 材料与设备1. 鲜血中 R

血小板聚集引起血小板假性降低

通过实验和科学分析,在血小板检测中偶有假性血小板减少发现并需澄清以下事实:1、使用血细胞分析仪时会有假性血小板减少发生,其原因:1) EDTA依赖性假性血小板减少(PTCT)。由于用EDTA盐(EDTA盐干粉抗凝剂,乙二胺四乙酸)干粉抗凝剂,在作为免疫介导的血液中,可出现的冷抗血小板自身抗体,使

血小板低到什么数值才输血小板

  必须明确指出,出血风险主要是看凝血功能而不是血小板计数。比如,免疫性血小板减少症可以耐受很低的血小板计数。血小板计数在10×10^9/L以上都可能只需要观察,而不是立即予以治疗。相对应的是,急性早幼粒细胞白血病,病人由于存在凝血机制障碍,在这些患者血小板计数30×10^9/L-50×10^9/L

石蜡切片、冰冻切片及振动切片的区别

一、石蜡切片    把修好的蜡块装在旋转切片机上,即可进行切片(section)。切片必须保持切片刀锐利,切片厚度通常为5~7um,也可根据染色需要切成不同厚度,一般不旋转式切片机超过10um。切好的蜡带,放人40℃左右的温水中将蜡片展平。良好的切片应无刀痕、裂痕,切片厚度均一平整。切片如有上述

冰冻“木乃伊”中发现天花病毒基因片段

  法国、俄罗斯和丹麦研究人员在美国新一期《新英格兰医学杂志》上报告说,他们在俄罗斯西伯利亚地区的几具死于300多年前的冰冻“木乃伊”中检测出了天花病毒的基因片段。这一发现有助于研究者深入了解天花的演化史。   天花是世界上传染性最强的疾病之一,于1979年被彻底消灭。目前仅有美国和俄罗斯的两个实

用于-PCR-的模板-DNA-制备实验——冰冻片

实验步骤1. 将 10 μl 冰冻切片直接放入含组织裂解液的离心管中。2. 无菌尖头刀片刮下,放入 300~900 μl 组织裂解液中,并加入 20 mg/ml 蛋白酶 K(PK)10~15 μl,封口膜封口,置 55℃ 3 h 以上。3. 其间用指轻弹离心管以利裂解。若有沉淀,再加入 5~10 μ

免疫荧光操作步骤(漂片,冰冻切片)

实验概要免疫荧光技术(Immunofluorescence technique )又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定

冰冻切片包埋剂及使用方法

冰冻切片包埋剂是一种聚乙二醇和聚乙烯醇的水溶性混合物,目前已广泛用于免疫组化实验室中,其用途是在冰冻切片时支撑组织,以增加组织的连续性,减少皱折及碎裂。又因OCT 混合物为水溶性,故在漂片时可溶于水,所以在以后的染色中不会增加背景染色。利用OCT 混合物(opti-mum cutting tempe