过氧化物酶染色与铁染色
过氧化物酶染色 粒细胞和单核细胞胞浆内含过氧化物酶,能借助受体(联苯胺)脱氢催化过氧化化氢而释放新生氧。受体被氧化成联苯胺蓝,再与亚硝基铁氰化钠结合成稳定的蓝色颗粒而沉淀于胞浆内。 试剂 联苯胺溶液:联苯胺0.3g,加36%亚硝基铁氰化钠溶液1ml,再取95%乙醇加到100ml,水浴加热助溶。贮于棕色瓶中,可保存数月。工作时应小心溶液污染皮肤。 稀双氧水:临用前将30%双氧水用蒸馏水1∶80稀释。 操作方法(1)新鲜干燥血片或骨髓片,加联苯胺液5~8滴,使布满整张涂片,固定1~2min。 (2)加等量稀双氧水,用吸球吹吸,使两液混匀,作用4~8min。 (3)涂片用流水冲洗,待干后再用瑞氏染液复染,复染时间约30min。 正常值&n......阅读全文
炭疽杆菌的形态与染色
炭疽杆菌菌体粗大,两端平截或凹陷,排列似竹节状,无鞭毛,无动力,革兰染色阳性。本菌在氧气充足、温度适宜(25~30℃)的条件下易形成芽孢。芽孢呈椭圆形。位于菌体中央,其宽度小于菌体的宽度。在人和动物体内能形成荚膜,在含血清和碳酸氢钠的培养基中,孵育于CO2环境下,也能形成荚膜,形成荚膜是毒性特征
定量SDS凝胶染色与扫描
试剂、试剂盒 考马斯亮蓝(CBB) 染色液脱色液仪器、耗材 SDS-PAGE 电泳装置凝胶扫描装置实验步骤 设备SDS-PAGE 电泳装置凝胶扫描装置试剂考马斯亮蓝(CBB) 染色液脱色液(配方,见“试剂的配制”,PP.184~189)操作程序1) 小心地在 SDS 凝胶泳道上加一组按量递增为序的蛋
荧光抗体染色与结果判断
荧光抗体与抗原反应,一般在25~37℃,30分钟,不耐热抗原的检测则以4℃过夜为宜。(一)直接法:用特异荧光抗体直接滴加于标本上。本法操作简便,特异性高,非特异荧光染色因素少;缺点是敏感度偏低,需制备特异性的荧光抗体。(二)间接法:可用于检测抗原和抗体,普通一抗+荧光二抗。灵敏度高,仅需一种荧光抗体
血液涂片的制作与染色
做好血液涂片和正确染色是血液细胞检验的重要步骤,涂片和染色效果的好坏直接关系着检验的结果,必须以认真负责的态度注意操作过程的每一个环节。 一.玻片的清洁 1.一般清洗法 (1) 将玻片放入肥皂或洗衣粉水中煮沸20 分钟。 (2) 用热水将肥皂和血膜等污物洗去,再用自来水反复冲洗,最后再用蒸馏水冲洗
定量SDS凝胶染色与扫描
大多数蛋白质虽然每毫克能结合大致相同量的染料,但不同蛋白质之间结合染料的能力仍有 10% 或更大的差异。因此,本法所得的数值不是非常准确的,除非你能用相同的蛋白质作标准来测定蛋白浓度。不过,一般说来,CBB 染色要比银染准确得多。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。试剂、试剂盒考马斯
细胞核荧光染色与普通染色的结果有何区别
荧光抗体染色结果判断:在每次实您好 验时均需设立实验对照(阳性和阴性对照)。阳性细胞的显色分布有胞质型、胞核型和膜表面型三种类型。临床上根据特异性荧光强度达“+”(为荧光较弱但清楚可见)以上判定为阳性。
姐妹染色单体分化染色实验
实验方法原理 细胞被培养在含有 5-溴脱氧尿苷(5-Bromodeoxyuridine:BUdR)的培养基中,当细胞在DNA 合成时,BUdR 能作为核苷酸的前体取代胸腺嘧啶核苷(Thymidine:TdR)被掺入到新合成的DNA中。在第一个细胞周期时,由于半保留复制的机制,中期染色体的每条染色单体
糖类染色实验——黏液物质染色
实验方法原理在人体和动物体中能够分泌黏液物质,依其物质中含有的酸基不同,所以分为中性黏液、酸性黏液和混合性黏液,也可被称为中性黏多糖、酸性黏多糖和混合性黏多糖,常用 Mowry 阿尔辛蓝高碘酸 Shiff 反应(ABPAS)染色方法。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒阿尔辛蓝 8 GS冰醋酸蒸馏水麝香
姐妹染色单体分化染色实验
实验概要本文介绍了姐妹染色单体分化染色法(Sister chromatid differentiation,SCD)的实验原理、操作步骤及注意事项等。实验原理姐妹染色单体分化染色法(Sister chromatid differentiation,SCD)是20世纪70年代中期发展起来的染色体处
姐妹染色单体分化染色实验
实验方法原理细胞被培养在含有 5-溴脱氧尿苷(5-Bromodeoxyuridine:BUdR)的培养基中,当细胞在DNA 合成时,BUdR 能作为核苷酸的前体取代胸腺嘧啶核苷(Thymidine:TdR)被掺入到新合成的DNA中。在第一个细胞周期时,由于半保留复制的机制,中期染色体的每条染色单体D
姐妹染色单体分化染色方法
姐妹染色单体差别染色可使中期染色体显示深浅不同的两条单体,能借以观察姐妹染色单体互换(SCE)现象。SCE是两条染色单体在DNA合成中核苷酸序列发生互换而表现出来一种现象。即是细胞分裂是DNA同源重组的结果。SCE既是一种无害的变化(有生理波动),也可受射线、致突和致癌物三因素等作用而升高。SCE一
间接染色步骤(细胞表面染色)
实验概要间接标记需要两个孵育步骤,先与一抗再与合适的第二抗体孵育,二抗(不是一抗)结合了荧光染料(FITC、PE、Cy5 等)。请注意这是一个普遍的程序,您可以根据自己的使用情况进行调整。实验步骤1. 收集并洗涤细胞,然后确定细胞总数。细胞通常在聚苯乙烯的圆底 12 x 75 mm2 Falcon
革兰氏染色液染色法
1.葡萄球菌和大肠杆菌混合菌液。 2.结晶紫染色液。 3.革兰氏碘液。 4.95%酒精。 5.番红染液。 6.载玻片。方 法 一、涂片标本的制备(见实验一) 二、革兰氏染色法 1.初染:在上述已固定的涂片上,滴加结晶紫染液,染色1分钟,水洗
染色质染色体和染色单体的区别
(1)、染色质和染色体的主要成分都是DNA和蛋白质,它们之间的不同,不过是同一物质在细胞分裂间期和分裂期的不同形态表现而已。 染色质出现于间期,呈丝状。它们在核内的螺旋程度不一,螺旋紧密的部分,染色较深,有的螺旋松疏染色较浅,染色质在光镜下呈现颗粒状,不均匀地分布于细胞核中。细胞分裂时染色质细
胶体铁染色的正常值及临床意义
正常值 粒细胞系原粒细胞呈阴性反应,早幼粒细胞及以后各阶段细胞多为阳性。单核细胞、淋巴细胞、浆细胞、幼红细胞等均呈阴性反应。 临床意义 异常结果: 颗粒增多的早幼粒细胞出现强阳性反应,Auer小体亦染成深蓝色,呈阳性,对诊断急性早幼粒细胞白血病有价值。 需要检测的人群:老人,长期工作在
胶体铁染色的临床意义及注意事项
临床意义 异常结果: 颗粒增多的早幼粒细胞出现强阳性反应,Auer小体亦染成深蓝色,呈阳性,对诊断急性早幼粒细胞白血病有价值。 需要检测的人群:老人,长期工作在辐射状态下的人 注意事项 由于各实验室的实验条件不同,参考值范围有差异,应以本实验室的参考值范围为准。
胶体铁染色的注意事项及检查过程
注意事项 由于各实验室的实验条件不同,参考值范围有差异,应以本实验室的参考值范围为准。 检查过程 (1) 组织切片脱蜡入水,0.01mol/L pH7.4 PBS洗 (2) 用4%正常羊血清封闭组织37℃,30min。 (3) 分别以第一抗体孵育组织,4℃24h,PBS振洗10min×
免疫过氧化物酶染色法的原理介绍
中文名称免疫过氧化物酶染色英文名称immunoperoxidase staining定 义利用过氧化物酶标记抗体与抗原结合,然后使酶催化底物,产生有色产物,显示抗原所在部位的染色方法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)
过氧化物酶染色(Washburn法)标准操作规程
1. 实验原理:粒细胞和部分单核细胞的溶酶体颗粒中含有过氧化物酶,pox能分解H2O2释放出新生氧,使四甲基联苯胺氧化成联苯胺蓝,后者与亚硝基铁氰化钠结合,再进一步氧化形成稳定的蓝色物质,沉淀于酶活性的细胞质内。 2. 标本采集 2.1 病人准备:了解病人是否对局麻药有
血细胞化学染色的染色方法—-糖原染色(PAS)的介绍
(1)血细胞化学染色的染色方法— 糖原染色(PAS)的原理:过碘酸将血细胞内的糖原氧化,生成醛基。醛基与雪夫液中的无色品红结合,形成紫色化合物,定位于细胞质中。 (2)血细胞化学染色的染色方法— 糖原染色(PAS)的操作方法:干燥涂片,滴加甲醛固定液固定10分钟,流水冲洗,晾干。滴加过碘酸溶液
微生物的染色与形态结构观察实验——荚膜染色法
实验方法原理荚膜是包围在细菌细胞外面的一层粘液性物质,其主要成分是多糖类,不易被染色,故常用衬托染色法,即将菌体和背景着色,而把不着色且透明的荚膜衬托出来。荚膜很薄,易变形,因此,制片时一般不用热固定。实验材料圆褐固氮菌试剂、试剂盒荚膜染色液纯甲实验步骤1. 在载玻片一端滴一滴无菌水,取少许培养了
微生物的染色与形态结构观察实验——鞭毛染色法
实验方法原理鞭毛是细菌的运动“器官”,一般细菌的鞭毛都非常纤细,其直径为0.01~0.02 μm,在普通光学显微镜的分辨力限度以外,故需要用特殊的鞭毛染色法,才能看到。鞭毛染色是借媒染剂和染色剂的沉淀作用,使染料堆积在鞭毛上,以加粗鞭毛的直径,同时使鞭毛着色,在普通光学显微镜下能够看到。实验材料苏云
微生物的染色与形态结构观察实验——革兰氏染色法
实验方法原理革兰氏染色反应是细菌分类和鉴定的重要性状。它是1884年由丹麦医师Gram创立的。革兰氏染色法(Gramstain)不仅能观察到细菌的形态而且还可将所有细菌区分为两大类:染色反应呈蓝紫色的称为革兰氏阳性细菌,用G+表示;染色反应呈红色(复染颜色)的称为革兰氏阴性细菌,用G-表示。细菌对于
电子染色的染色特点介绍
电子染色(electron stain)是利用某些重金属盐(铀、铅等)能与细胞的某些结构和成分结合,以提高电子密度来增强结构的反差。
革兰氏染色法的染色原理
革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌(G+)和革兰氏阴性菌(G-)两大类,是细菌学上最常用的鉴别染色法。该染色法之所以能将细菌分为G+菌和G-菌,是因为一般认为革兰氏染色是基于细菌细胞壁特殊化学组分进行染色的。 通过初染和媒染后,细胞内形成了不溶于水的结晶紫一碘大分子复合物。革兰氏阳性细菌由
细菌的简单染色和革兰氏染色
(一)实验目的:学习细菌的简单染色法和革兰氏染色法。(二)实验原理:用于生物染色的染料主要有碱性染料、酸性染料和中性染料三大类。碱性染料的离子带正电荷,能和带负电荷的物质结合。因细菌蛋白质等电点较低,当它生长于中性、碱性或弱酸性的溶液中时常带负电荷,所以通常采用碱性染料(如美蓝、结晶紫、碱性复红或孔
瑞氏染色法染色原理
瑞氏染色法染色原理: 为了观察细胞内部结构,识别各种细胞及其异常变化,血涂片必须进行染色。瑞氏染色法是血细胞分析最经典和最常用的染色法。瑞氏染料: 是由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝组成的复合染料。染色原理: 是染料透入被染物并存留其内部的一种过程,此过程既有物理的吸附作用,又有化学的
瑞氏染色法:染色原理
既有物理的吸附作用,又有化学的亲和作用。各种细胞成分化学性质不同,对各种染料的亲和力也不一样。如血红蛋白、嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结合,染粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质为酸性,与碱性染料美蓝或天青结合,染紫蓝色或蓝色,称为嗜碱性物质;中性颗粒呈等电状态
鞭毛染色配制及染色方法实验
实验步骤 改良Ryui法一、实验试剂:A液:5%石炭酸: 10ml鞣酸: 2g饱和硫酸铝钾液:10mlB液:结晶紫酒精饱和液应用液:A液10份,B液1份,混合,室温存放。二、染色方法:1. 玻片的处理:要求用新的载玻片,用前须在95%酒精中浸泡24小时以上,用时从酒精中
关于芽孢染色的染色方法介绍
(1)芽孢染色— 将培养24小时左右的枯草芽孢杆菌或其他芽孢杆菌,作涂片、干燥、固定。 (2)芽孢染色— 滴加3—5滴孔雀绿染液于已固定的涂片上。 (3)芽孢染色— 用木夹夹住载玻片在火焰上加热,使染液冒蒸汽但勿沸腾,切忌使染液蒸干,必要时可添加少许染液。加热时间从染液冒蒸汽时开始计算约4—