急性白血病的“照妖镜”?流式细胞术来帮你
流式细胞术(FCM)是一门综合性的细胞分析和分选技术,综合了光学、电子学、细胞化学、流体力学、细胞免疫学、激光和计算机等多门学科和技术。应用流式细胞仪,可以快速测定单个细胞的荧光、光散射或光吸收等生物学性质,定量反映细胞大小、膜受体和表面抗原等许多重要参数。本文主要介绍在急性白血病(AL)诊断中的应用。 FCM的原理 利用偶联了荧光染料的单克隆抗体对样本进行标记,抗原抗体特异性结合后,在流式细胞仪中经过鞘液包裹形成单细胞流,依次经过激光发射器,分别获取到直射光信号(入射光和出射光成0°)和散射光信号(入射光和出射光成90°),前者包括前向散射光(FSC),后者包括侧向散射光(SSC)以及荧光信号(如FL1信号),不同的光信号经过光电转换系统最终呈现到计算机上供技术人员分析。 如何识别白血病细胞? 对于抗原的表达与否,其中一种判定方式就是内对照。利用CD45/SSC两个参数可以把......阅读全文
如何分析流式细胞术测定活性氧结果
活性氧检测试剂盒(Reactive oxygen species assay kit)是一种利用荧光探针DCFH-DA进行活性氧检测的试剂盒。DCFH-DA本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜,进入细胞内后,可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透细胞膜,从而使探针很容易被装载到细胞内。细
如何分析流式细胞术测定活性氧结果
活性氧检测试剂盒(Reactive oxygen species assay kit)是一种利用荧光探针DCFH-DA进行活性氧检测的试剂盒。DCFH-DA本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜,进入细胞内后,可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透细胞膜,从而使探针很容易被装载到细胞内。细
流式细胞术的检测原理相关内容
检测数据的显示视测量参数的不同由多种形式可供选择。单参数数据以直方图的形式表达,其X轴为测量强度,Y轴为细胞数目。一般来说,流式细胞仪坐标轴的分辨率有512或1024通道数,这视其模数转换器的分辨率而定。对于双参数或多参数数据,既可以单独显示每个参数的直方图,也可以选择二维的三点图、等高线图、灰
如何看流式细胞术结果中的图?(二)
Q2:“Gate”和 “Regin”?设门是流式细胞分析中一种重要的技术,只有通过最佳的设门方式,才能准确地获取和分析数据,从而得到临床诊断和科研中有价值的信息。On-line gating(threshold gating)监测/获取数据Off-line gating: 分析实验数据
流式细胞术实验单细胞悬液的获取
单细胞悬液的获取:外周血和骨髓穿刺液为天然单细胞悬液;活检组织常用机械分离和酶消化两种方法。不同的实验要求适用不同的方法。对于需要进行膜抗原标记的,不仅是要获得足够的单细胞悬液,还要尽量保证细胞结构的完整性和抗原性,机械法较适用。只需进行细胞周期或DNA倍体分析的,在机械法的基础上加酶消化(如胰
流式细胞术的样本制备和实验设计
细胞来源和细胞悬液制备全血标本:1. 选择抗凝剂时要注意你要检测的抗原是否受抗凝剂中的组分影响?例如一些CD41抗体对EDTA非常敏感。2. 裂解液的选择,可选择自配的氯化铵裂解液(http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-178-1-1.html)或者商业化含固定成份的裂
如何看流式细胞术结果中的图?(一)
FCM数据的存贮的方式是FCS2.0(flow cytometry standard),采用列表排队(List Mode)方式。易于加工处理分析,但缺乏直观性,数据的显示通常有一维直方图、二维点图、等高线图、密度图等几种;由数据还可以做出标准曲线进行定量分析。 Q1:坐标轴的意义?1、 单参数
流式细胞术可以检测细胞pdl1吗
流式细胞术可以检测细胞pdl1许多研究结果都已证明,PSD的形态变化是突触机能活动变化的重要结构基础,其厚度易受环境、行为训练、药物等因素的影响。PNS子代PSD增厚提示在没有外界干扰情况下子代脑内内环境已发生变化,突触后膜离子通道及其相关蛋白可能处于较高活化状态。此外,活性区长度增加,Sv较CON
流式细胞术检测人和小鼠Th细胞亚群(三)
2 不同时间的PMA刺激对小鼠外周血T淋巴细胞抗原表达的影响。PMA刺激8h后CD4阳性T淋巴细胞的表达没有明显下降。PMA刺激12h后,CD4阳性T淋巴细胞的表达明显下降。而CD8表达在8h和12h均没有明显下降。典型的检测结果见图2。图2 不同时间的PMA刺激对小鼠外周血T淋巴细胞抗原表达的影响
流式细胞术细胞凋亡检测样品的制备实验
实验步骤 根据实验方案诱导细胞凋亡,制备单细胞悬液,使用 Annexin V-FITC 细胞凋亡检测试剂盒,通过Annexin V抗体与磷脂丝氨酸(PS)的特异性结合来检测细胞凋亡的情况。1. 将10×的结合缓冲液用蒸馏水稀释成为1×,冰育。2. 悬浮细胞在低温环境中,用PBS洗涤细胞2次(800~
实验条件对流式细胞术分析结果的影响
低渗处理 未固定细胞样品染色后存放时间对细胞表面标志检测结果的影响 在散射光图上设一个“门”分析多种参数 用CellQuest软件设多个“门”分析某一种参数 在DNA含量分析时去除二联体细胞的方法 校准流式细胞仪线性度和检测流式细
师兄攻略:流式细胞术第一期
流式细胞仪和流式细胞术指南篇历史从 1968 年最早的商品化流式细胞术 (FC) 和荧光激活细胞分类术 (FACS) 诞生以来, 它们已得到大大改进。但要成为实验室广泛接受的技术,除成本因素外,还存在不少障碍。技术上的问题主要是细胞内低丰度分子的检测,缺少「通用」细胞通透物质,细胞自发荧光的干扰效应
流式细胞仪在白血病诊断的应用
一、 流式细胞仪在白血病免疫分型诊断的概述 近年来白血病的免疫分型已成为诊断血液恶性肿瘤不可缺少的重要标准之一。早年曾用过的荧光显微镜或APAAP方法基本被废弃。国际上公认的通用的方法是流式细胞术(FCM)。流式细胞术白血病免疫分型是利用荧光素标记的单克隆抗体(McAb)作分子探针,多参数
在流式细胞仪流式细胞术测量中的两种方式介绍
在流式细胞术测量中,常用的是两种散射方向的 散射光测量:①前向角(即0角)散射(FSC);②侧向散射(SSC),又称90角散射。这时所说的角度指的是激光束照射方向与收集 散射光信号的光电倍增管轴向方向之间大致所成的角度。一般说来,前向角 散射光的强度与细胞的大小有关,对同种细胞群体随着细胞截面积
用流式细胞仪测定血液中含有异常hMICL的循环干细胞的...
用流式细胞仪测定血液中含有异常hMICL的循环干细胞的作用对于BCR - ABL阴性的骨髓增生性肿瘤(MPN)的诊断可能仍具有挑战性,原因是重叠的特征和缺乏强有力的参数,特别是在原发性血小板减少症(ET)和前纤维化骨髓纤维化(MF)之间。循环不成熟的造血细胞在红细胞增多症(PV)、ET和MF
简述急性髓性白血病的临床症状
发病快,数周或数月,主要表现贫血,出血,骨痛 , 疲劳、发热、肝脾大。一组在形态、遗传学、临床表现、治疗和预后等方面均不同的异质性肿瘤。 成人多见,15-39岁为发病高峰。 骨髓髓样干细胞单克隆性增生,分化成熟障碍,停止在早期髓性分化(母细胞)阶段>25%。
关于急性淋巴细胞白血病的简介
急性淋巴细胞白血病(ALL)是一种起源于淋巴细胞的B系或T系细胞在骨髓内异常增生的恶性肿瘤性疾病。异常增生的原始细胞可在骨髓聚集并抑制正常造血功能,同时也可侵及骨髓外的组织,如脑膜、淋巴结、性腺、肝等。我国曾进行过白血病发病情况调查,ALL发病率约为0.67/10万。在油田、污染区发病率明显高于
关于急性骨髓性白血病的基本介绍
急性骨髓性白血病(Acute myeloid leukemia,AML),是一种骨髓性白细胞(而非淋巴性白细胞)异常增殖的血癌。其特点是骨髓内异常细胞的快速增殖而影响了正常血细胞的产生。 急性骨髓性白血病是成年人最常见的急性白血病,其发病率随着人的年龄而增加。急性骨髓性白血病还是比较罕见的疾病
治疗急性骨髓性白血病的相关介绍
1.治疗原则:总的治疗原则是消灭白血病细胞群体和控制白血病细胞的大量增生。解除因白血病细胞浸润而引起的各种临床表现。 2.支持治疗 (1)注意休息:高热。严重贫血或有明显出血时。应卧床休息。进食高热量。高蛋白食物。维持水。电解质平衡。 (2)感染的防治:严重的感染是主要的死亡原因。因此防治
关于急性髓细胞白血病的检查介绍
1.血象 贫血和血小板减少极其常见(占75%~95%)半数AML患者白细胞数增高,多在10×10/L~100×10/L之间部分病例甚至>100×10/L。部分患者白细胞数可正常,少数患者(常为M3型或老年病例)白细胞数
急性淋巴细胞白血病有哪些检查
1、血常规 超过90%以上患者在诊断时有明显血液学异常,异常的严重程度反映了白血病细胞侵及的程度。贫血为正细胞、正色素性。约有50%以上白细胞总数增高,发病时白细胞>50×109/L,提示预后不佳。3/4患者有血小板减少。大部分患者在末梢血涂片中可以见到数量不等的幼稚淋巴细胞。 2、骨髓
急性粒细胞性白血病的基本介绍
急性白血病(Acute Leukemia,AL)是源于造血干细胞的克隆性恶性疾病。在骨髓和其它造血组织中任何一类异常原始或幼稚细胞的过度增生,并释放至外周周血液中,造成骨髓中其他细胞生成繁殖受抑和各器官的白血病细胞浸润。临床表现为贫血、继发感染、出血,肝脾淋巴结肿大及其他浸润的表现。骨髓象中一种
关于急性髓细胞白血病的病因分析
根据目前的认识,白血病的确切病因尚不明,但与地域环境因素、电离辐射、化学接触、酗酒与吸烟,以及与机体对某些病毒感染所致的特殊反应有关。此外,近年来通过基因突变频率和一些易患生物标记研究发现,它可能是遗传学和环境因素共同作用的结果。
简述小儿急性白血病的临床表现
1.不规则发热,进行性苍白、衰弱、出血,以皮肤、牙龈出血、鼻衄常见。 2.组织浸润表现:肝、脾、淋巴结肿大,可有骨关节、皮肤、腮腺、纵隔淋巴结、神经系统、睾丸等器官浸润并出现相应症状。
急性髓细胞性白血病病因有新解
复旦大学生物医学研究院研究员徐彦辉课题组经4年多研究,首次成功解析了哺乳动物骨髓造血关键蛋白TET2的三维结构。该成果对研究多种疾病的发病机制,尤其对血液肿瘤(如髓系白血病)治疗性药物开发有重大意义。相关论文日前在线发表在国际学术期刊《细胞》杂志上。 哺乳动物TET蛋白家族有3个成员,即T
急性淋巴细胞白血病的其他检查
1.细胞化学染色(1)过氧化物酶(POX)与苏丹黑(SB)染色:各阶段淋巴细胞均阴性,阳性的原始细胞小于3%。(2)糖原(PAS)染色:约20%~80%的原始淋巴细胞呈阳性反应。(3)酸性磷酸酶(ACP)染色:T细胞阳性,B细胞阴性。(4)其他:非特异性酯酶及溶菌酶均呈阴性反应。2.免疫学检测根据膜
支持治疗急性髓细胞白血病的简介
支持治疗的改进使大剂量化疗得以实施,使患儿安全度过骨髓抑制及感染关。 (1)加强护理,出血倾向时卧床休息,进食高热量、优质蛋白食物,维持水、电解质平衡。 (2)随着白血病细胞死亡(肿瘤溶解综合征)往往伴高尿酸血症,高钾、高磷和低钙。因此应立即采用有效措施预防白血病死亡细胞增多而导致脑、肺或其
关于小儿急性髓样白血病的简介
本病正确名称为急性髓细胞性白血病(Acute myeloid leukemia,AML)是髓系造血干/祖细胞恶性疾病。以骨髓与外周血中原始和幼稚髓性细胞异常增生为主要特征,临床表现为贫血、出血、感染和发热、脏器浸润、代谢异常等,多数病例病情急重,预后凶险,如不及时治疗常可危及生命。本病占小儿白血
关于急性粒细胞白血病的病因介绍
白血病的急性、慢性两种比较复杂,迄今未被完全认识,许多因素与白血胞的发病有关,如病毒感染、放射性核素的照射、化学因素、药物及遗传因素等。白血病的儿童及35岁以下成人中居第一位,病情发展较快,断病程仅数月。白血病的病因和发病机制比较复杂,化疗药物难以彻底清除体内的白血病细胞,故预后极差。 急性白
急性粒细胞性白血病的病因分析
白血病的病因比较复杂,迄今未被完全认识,许多因素与白血胞的发病有关,如病毒感染、放射性核素的照射、化学因素、药物及遗传因素等。白血病的儿童及35岁以下成人中居第一位,病情发展较快,断病程仅数月。白血病的病因和发病机制比较复杂,化疗药物难以彻底清除体内的白血病细胞,故预后极差。 急性白血病的病因