western蛋白样品最多可以反复冻融几次
可反复冻融的次数具体情况根据目的蛋白性质(主要是稳定性)而定,当然,最好是一次成功。如果说需要做大量的实验,需要一次准备很多一致性蛋白样品,那么强烈建议你在第一次冷冻前用EP管分装,分装数量和分装量根据你的实验次数和需要一次上样量确定。这样,就完全避免了多次冻融(除了第一次实验不需要冻融;这是从根本上解决你的问题)。再说你提的问题本身,上面也说了,蛋白样品可反复冻融的次数,要根据目的蛋白性质(主要是稳定性)而定,这是说如果你需要的目的蛋白比较稳定,那么,是可以多次反复冻融的,但最好不要多于3次,因为蛋白质在反复冻融下,会变性,而且,储存时间太长了,也会影响实验数据的准确性。一般而言,-20度保存,不要超过2周,最长不要超过1个月;-80度(或-70度)保存,一般不超过半年,最多1年。提一句,新取得样本,如果不是立即提取蛋白,最好立即保存在液氮中(很方便),尤其是如果你还要做RNA实验的话,因为只有在液氮的超低温环境下,才能抑制R......阅读全文
JDS180-建材冻融试验箱
一、产品特点 JDS-180型建材冻融箱是按照GB/T3810.12—1999陶瓷砖试验 方法《第12部分抗冻性的检测》、ISO10545-12-1995、 GB/T11973-1997等标准设计制作的。本产品可作陶瓷砖、石材、红砖、混凝土的抗冻性检测,自动控制升温、降温及恒温的自动循环冻融检测
蛋白提取的常见问题分析
Q:如何进行组织液氮研磨?A:将组织块在液氮里冻实,敲成大小合适的小块后放在研钵里,倒液氮,边研边加,保持研钵里有液氮,或是保持组织块不融。研碎了就行了。注意做前研钵等器具要预冷,用液氮或是先放负二十冰箱一段时间。注意事项:1.液氮研磨的研钵,药勺必须预冷。2.开始研磨前,将研钵置于冰袋上,并加入少
鼠抗兔PAR1单克隆抗体溶液产品说明
主要用途鼠抗兔PAR-1单克隆抗体(mouse anti-rabbit PAR-1 monoclonal antibody)溶液是一种旨在用于抗原抗体免疫反应实验的抗兔PAR-1抗体蛋白溶液。主要用于Western杂交、免疫沉淀、免疫组化、ELISA等实验。产品即到即用,性能稳定,活性保证。 技
不同类型的样本的处理方法
elisa试剂盒通常我们可用于ELISA检测的样本是有多种类型的,如血清、血浆、尿液、细胞培养上清或组织匀浆液等,不同类型的检测样本前期的处理方法是不一样的。正确的处理样本是保证ELISA检测的正确性和准确性的*步。1、 血清血清是zui常用于ELISA检测的一类样本,处理也比较简单。用无热原、无内
ELISA试剂盒不同类型样本的处理方法
ELISA试剂盒通常我们可用于ELISA检测的样本是有多种类型的,如血清、血浆、尿液、细胞培养上清或组织匀浆液等,不同类型的检测样本前期的处理方法是不一样的。正确的处理样本是保证ELISA检测的正确性和准确性的第一步。1、血清血清是最常用于ELISA检测的一类样本,处理也比较简单。用无热原、无内毒素
技术解析之不同类型的样本的处理方法
elisa试剂盒通常我们可用于ELISA检测的样本是有多种类型的,如血清、血浆、尿液、细胞培养上清或组织匀浆液等,不同类型的检测样本前期的处理方法是不一样的。正确的处理样本是保证ELISA检测的正确性和准确性的步。1、 血清血清是*常用于ELISA检测的一类样本,处理也比较简单。用无热原、无内毒素的
Western-Blot详解(原理、试剂、步骤及问题解答)2
四、主要步骤 生物秀为您搜集了现阶段几乎网上所有的Western Blot的中英文资料,仅供实验参考,可以根据自己实验的实际情况进行调整: Western Blot PROTOCOL: 点击查看所有相关文章 五、 实验常见的问题指南 根据问题的类型主要分成以下几类(以
Western-blotting样品准备-(一)
实验概要Preparation of lysis buffers, protease and phosphatase inhibitors, lysate from cell culture, lysate from tissues, protein concentration, samples
Western-blotting样品准备-(二)
Sodium orthovanadate preparationAll steps to be performed in a fume hood. a. Prepare a 100 mM solution in double distilled water. b.
砌墙砖冻融试验机的参数特点
砌墙砖冻融试验机的原理为气冻水溶,仪器通电前在储水箱中加满水,机器通电后电源指示灯亮起; 将待检试样放入试样槽中,按启动键冻融机开始运行,出厂设置参数制冷设定值为‘-20℃’,制冷完成后保持恒温240min; 制冷完成后工作室自动加水并融化试件,加热设定值为‘+20℃’试件温度
混凝土冻融试验机使用注意事项
注意事项:▲使用设备时,要认真阅读技术说明书,熟悉技术指标、工作性能、使用方法、注意事项,严格遵照仪器使用说明书的规定步骤进行操作。▲初次使用设备人员,必须在熟练人员指导下进行操作,熟练掌握后方可进行独立操作。▲实验时使用的仪器设备及器材,要布局合理,摆放整齐,便于操作,观察及记录等。▲电子仪器设备
混凝土冻融试验箱的使用说明
混凝土冻融试验箱一体式结构,操作简单方便。具有占地面积小、移动方便等特点,是移动实验室、高速公路和混凝土搅拌站的常用设备。 混凝土冻融试验箱的调试与安装: 1、开箱后,应检查有无因运输振动造成的损失,对损坏部分应修复后才能使用。2、本装置对安装的要求: 空气要流通,远离热源,无阳光直射的场所;
鼠抗兔PAR1单克隆抗体溶液产品说明书(中文版)
鼠抗兔PAR-1单克隆抗体溶液产品说明书(中文版) 主要用途 鼠抗兔PAR-1单克隆抗体(mouse anti-rabbit PAR-1 monoclonal antibody)溶液是一种旨在用于抗原抗体免疫反应实验的抗兔PAR-1抗体蛋白溶液。主要用于Western杂交、免疫沉淀、
没有注明可以用来做Western-blot的一抗可以用来做Western-...
没有注明可以用来做Western blot的一抗,可以用来做Western blot吗?不一定,因为有的抗体是识别线性表位的,有的是识别构象型表位,识别构象型表位的抗体不能用于Western blot,因为在Western blot中抗体识别的是完全变性的蛋白质抗原,而蛋白质抗原的构象型表位变性时被
蛋白示踪上样缓冲液(还原,5x)操作步骤
蛋白示踪上样缓冲液(还原,5×)适用于还原型SDS-PAGE 电泳前的蛋白样品处理。本产品含有两种示踪染料,分别是蓝色的溴酚蓝和红色的派洛宁γ,可实时监控蛋白样品的电泳进程。同时,在凝胶上显现的红色条带可伴随蛋白样品转移至印迹膜上,因此本产品具有检测WesternBlotting 转膜效率的作用
Western-Blot详解(原理、试剂、步骤及问题解答)3
P. 有什么方法可以提高上样量? 解答:可以浓缩样品;增大上样体积来增大上样量。 Q. 我要检测的目的蛋白是分子量大概为42kd的膜蛋白,膜蛋白提取可不可以不用到超速离心机,有没有直接用低温高速离心机就可以的提到膜蛋白的方法,42kd的蛋白分子量算不算大? 解答:如是需要提取膜蛋白
成都山地所展示中国冻融侵蚀图-成果丰硕
7月4日,水利部水土保持监测中心在成都组织召开《第一次全国水利普查成果查询及服务系统冻融侵蚀展示成果加工提炼》技术服务合同验收会,来自水利部水土保持监测中心、北京师范大学、中科院·水利部成都山地灾害与环境研究所、四川省水土保持生态环境监测总站、青海省水土保持局等单位的领导和专
免疫印迹(Western-Blotting)实验的样品制备介绍
对于Western Blotting实验而言,样品处理是关键步骤之一,获得的蛋白样品必须均质、可溶,并解离成单个多肽亚基,且尽量减少相互间的聚集,使其最终仅依赖本身的分子量大小进行分离。当目标蛋白的含量很低时,需要选取目标蛋白含量较高的组织或细胞器(如核抽提物),或者通过免疫沉淀等方式进行富集。通常
高效液相进样最多可以进多少
自动进样器像HPLC一般1-100ul都没有问题 最大进样量100ul UPLC一般0.1-10ul ,最大进样量10ul,尽可能不要达到最大进样量手动进样器 由于有定量环控制 进样量是恒定的 现在多为20ul
细胞冻存与复苏的基本原则是快冻慢融,为什么
冻存的原则是:慢冻,主要是防止细胞在冷冻过程中形成冰晶,对细胞造成损害,加DMSO也是这个原理.复苏细胞的原则是:快融.主要是防止DMSO在液体状态下对细胞的毒害作用,快速使细胞进入复苏和生长状态.因此,细胞的冻存与复苏原则应该是慢冻快融.分别经过4度,-20度,-80度和液氮的依次过程进行冻存;经
细胞冻存与复苏的基本原则是快冻慢融,为什么
冻存的原则是:慢冻,主要是防止细胞在冷冻过程中形成冰晶,对细胞造成损害,加DMSO也是这个原理.复苏细胞的原则是:快融.主要是防止DMSO在液体状态下对细胞的毒害作用,快速使细胞进入复苏和生长状态.因此,细胞的冻存与复苏原则应该是慢冻快融.分别经过4度,-20度,-80度和液氮的依次过程进行冻存;经
细胞冻存与复苏的基本原则是快冻慢融,为什么
冻存的原则是:慢冻,主要是防止细胞在冷冻过程中形成冰晶,对细胞造成损害,加DMSO也是这个原理.复苏细胞的原则是:快融.主要是防止DMSO在液体状态下对细胞的毒害作用,快速使细胞进入复苏和生长状态.因此,细胞的冻存与复苏原则应该是慢冻快融.分别经过4度,-20度,-80度和液氮的依次过程进行冻存;经
Western-Blot详解(二)
11、NaN3 0.02% 叠氮钠(有毒,戴手套操作),溶于磷酸缓冲盐溶液(PBS)。12、Tris缓冲盐溶液(TBS):20mmol/LTris/HCL(pH7.5),500mmol/LnaCl。13、Tween20(15)鼠抗人-MMP-9(16)鼠抗人-TIMP-1。14、过氧化物酶标记的第二
将菌株反复冻存,到底对菌株有什么影响?
低温会使菌株细胞内的水分形成冰晶,从而引起细胞结构尤其是细胞膜的损伤。细胞体积大者一般要比较小者对低温更为敏感,而无细胞壁者则比有细胞壁者敏感。如果放到低温(不是一般冰箱)进行冷冻时,会产生冰晶,冰晶呈针状,极易导致细菌的严重损伤。用电镜观察,可见细菌的核膜上有大量针尖样小孔,当从低温下移出并开始升
Western实验步骤
一、样品制备 对于Western Blotting实验而言,样品处理是关键步骤之一,获得的蛋白样品必须均质、可溶,并解离成单个多肽亚基,且尽量减少相互间的聚集,使其最终仅依赖本身的分子量大小进行分离。当目标蛋白的含量很低时,需要选取目标蛋白含量较高的组织或细胞器(如核抽提物),或者通过免疫沉淀等方式
AP标记山羊抗兔IgG使用说明
● 产品简介本抗体为用纯化的兔IgG免疫羊,然后用亲和纯化柱对获得的抗血清进行纯化而获得的优质二抗,可用于Western、ELISA和IHC等实验。AP,即Alkaline Phosphatase,中文名为碱性磷酸酯酶,可以在Western或ELISA等检测时催化BCIP/NBT等显色试剂显
MAP1B单克隆抗体产品说明书(中文版)
主要用途 MAP1B单克隆抗体是一种旨在用于免疫组织化学、免疫沉淀和免疫印迹实验的鼠源单克隆IgG抗体蛋白。常用于免疫荧光、细胞流式、Western Blot、免疫组化、免疫沉淀等实验。产品即到即用,性能稳定,免疫活性保证。技术背景微管相关蛋白(microtubule associated pr
PCR引物存放时间是多少
最近做PCR实验好几次都扩不出来(郁闷死,以前从没这问题),反应体系和条件都是以前一见摸索好了的,唯一可能的问题就是试剂出问题了。 PCR引物存放时间,这要看是什么状态,要是粉末的话,在-20度可以存放好几年;要是已经把引物稀释成液体状态的话,存放时间就要短一点了,但也可以存放一年左右的时间,甚至更
两种不同的总蛋白提取方法总结
蛋白质提取与制备蛋白质种类很多,性质上的差异很大,既或是同类蛋白质,因选用材料不同,使用方法差别也很大,且又处于不同的体系中,因此不可能有一个固定的程序适用各类蛋白质的分离。本文分别介绍了从新鲜样品中提取总蛋白和从Trizol裂解液中分离总蛋白的方法和步骤。希望与各位老师和同学交流。 膜蛋
外墙外保温系统冻融试验箱的结构特点
一、产品名称TSWL-WDR外墙外保温系统耐冻融试验箱二、符合标准JG149-2003《膨胀聚苯板薄抹灰外墙外保温系统》JCJ144-2019《外墙外保温工程技术标准》GB/T 29906-2013《模塑聚苯板薄抹灰外墙外保温系统材料》JG/T 158-2013《胶粉聚苯颗粒外墙外保温系统材料》JG