western蛋白样品最多可以反复冻融几次
可反复冻融的次数具体情况根据目的蛋白性质（主要是稳定性）而定，当然，最好是一次成功。如果说需要做大量的实验，需要一次准备很多一致性蛋白样品，那么强烈建议你在第一次冷冻前用EP管分装，分装数量和分装量根据你的实验次数和需要一次上样量确定。这样，就完全避免了多次冻融（除了第一次实验不需要冻融；这是从根本上解决你的问题）。再说你提的问题本身，上面也说了，蛋白样品可反复冻融的次数，要根据目的蛋白性质（主要是稳定性）而定，这是说如果你需要的目的蛋白比较稳定，那么，是可以多次反复冻融的，但最好不要多于3次，因为蛋白质在反复冻融下，会变性，而且，储存时间太长了，也会影响实验数据的准确性。一般而言，-20度保存，不要超过2周，最长不要超过1个月；-80度（或-70度）保存，一般不超过半年，最多1年。提一句，新取得样本，如果不是立即提取蛋白，最好立即保存在液氮中（很方便），尤其是如果你还要做RNA实验的话，因为只有在液氮的超低温环境下，才能抑制R......阅读全文
影响尿液储存稳定性的常见因素
尿液检验因其获取简便、收集无创和可提供大量生理变化发展进程的信息, 被临床广泛运用。尿液中存在许多潜在的生物标记物, 包括代谢物质、细胞、蛋白、核酸等。这些生物标记物在检测药品的安全性、监测急慢性肾脏疾病和其他泌尿道的生理情况上具有突出的作用。为了发现新的生物标记物以及分析这些生物标记物的
从样本制备和转印过程提高western－blot的准确性
适当的样本准备样品准备不当，会让你头疼不已，当准备裂解液时：快速工作保持低温环境增加蛋白酶进行分装，避免反复冻融如果要分装样品，请确保等量分装，以便检查是否在此过程中丢失了目标。 如果您分离的样品浓度非常低，请记住，使用高灵敏度底物和较少的裂解液。如果你的裂解液中含有大量的DNA，它就会变得粘稠。
从样本制备和转印过程提高western－blot的准确性
适当的样本准备 样品准备不当，会让你头疼不已，当准备裂解液时： 快速工作 保持低温环境 增加蛋白酶 进行分装，避免反复冻融 如果要分装样品，请确保等量分装，以便检查是否在此过程中丢失了目标。 如果您分离的样品浓度非常低，请记住，使用高灵敏度底物和较少的裂解液
oct包埋的组织可以做western－blot吗
OCT包埋剂（SAKURA产品，MADE IN USA）包埋流程:1. 将放在蔗糖溶液中的组织块取出，放入20g L-1 蔗糖与OCT包埋剂1：1体积比例混合液中，室温浸泡2h2. 移入OCT包埋剂中室温浸泡4h，更换新的OCT包埋剂，室温浸泡6h.3. 将标本置于托物台，用恒冷箱切片机切片（一般-
western用过的一抗可以回收再用吗
中间做过strip吗？是不是strip的太剧烈了，把膜上的蛋白完全都剥掉了。尝试用一些温和的剥脱方法，降低温度，降低SDS浓度和处理时间可能会有改善。另外如果膜上蛋白敏感，有降解等因素，也可能会导致检测不到。需要确认一下。
western用过的一抗可以回收再用吗
中间做过strip吗？是不是strip的太剧烈了，把膜上的蛋白完全都剥掉了。尝试用一些温和的剥脱方法，降低温度，降低SDS浓度和处理时间可能会有改善。另外如果膜上蛋白敏感，有降解等因素，也可能会导致检测不到。需要确认一下。
做western－blot洗膜时间可以缩短吗
这取决于你的抗体的特异性怎么样。洗膜时间通常是一定的，但是如果你的抗体表现很好，想要缩短也是没有问题的。但是如果做完以后，结果非特异多，或者不干净，那么保证洗膜时间，甚至延长，或者是改进洗膜液的成分都是有必要的。
CH50－elisa酶联免疫试剂盒检测中样品的处理
CH50 elisa酶联免疫试剂盒检测中样品的处理: 1．细胞培养物上清：细胞培养物于室温1000g，离心10分钟后收集上清，并将标本保存于-20℃，且应避免反复冻融。 2．血清：标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g，4℃离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃保
实验型冻干机冻干样品操作流程
冷冻干燥器又称冷冻干燥机。冷冻干燥器就是将含水物质，先冻结成固态，而后使其中的水分从固态升华成气态，以除去水分而保存物质的冷干设备。近年来冷冻干燥技术在生物工程、医药工业、食品工业、材料科学和农副产品深加工等领域有着广泛的应用，为了更好的服务我们的用户，就实验型冷冻干燥机的使用方法以及注意事
抗体在4度下保存为何能保存较长时间
抗体说白了就是一种有特殊空间结构的特殊蛋白质，从保存蛋白质的角度考虑就容易了。在4度下可以较稳定的保存蛋白质的空间结构，减少应为此原因导致的蛋白质失效。但是如果是反复冻融，冰结晶可以很容易的破坏蛋白质的空间结构并打断肽链，一两次可能不会很明显，但反复冻融对蛋白质的伤害很大。
蛋白冻干技术和冻干后的影响
第一：什么是蛋白？蛋白又名鸡子白，异名鸡卵白（《别录》）、鸡子清（《食疗本草》）。为雉科动物家鸡的蛋白，是常见的食品。营养优良、润肺利咽、清热解毒。第二：蛋白为什么要冻干？蛋白质对热敏感，冻干能使绝大部分蛋白质的活性保留下来，提高蛋白的稳定性并延长保存时间，同时降低运费。第三：冻干对蛋白会有哪些影响
激素替代周期行冻融胚胎移植患者自行停用雌激素获得...
激素替代周期行冻融胚胎移植患者自行停用雌激素获得活产病例分析一、病例资料 患者，女，３５岁，体重指数（ＢＭＩ）２１．８３ｋｇ／ｍ２，因“未避孕未再孕１年余”于２０１９年９月４日就诊于本院生殖中心。既往病史：夫妇结婚７年，婚后性生活正常，于２０１４年足月顺产１名男孩，２０１７年因计划外妊娠于孕２月余行
用冻融法制备的Nycodenz予形成梯度分离细胞器
用密度梯度离心分离亚细胞构造往往需要预先制备蔗糖或其他合适梯度材料的密度梯度，操作比较复杂。利用新型的梯度材料Nycodenz (Norway，Nycomed pharma AS公司)用冻融法制备凸指数与凹指数共存的曲线梯度，利用超速离心机的水平转头可以简便地分离出亚细胞构造中线粒体，高尔基
全自动蛋白纯化系统可以检测、分离、纯化多种生物样品
全自动蛋白纯化系统可完成从实验室基础研究到整个工艺方法快速开发及放大。可以进行生物大分子的范例纯化，已知和未知蛋白质的纯化，蛋白质的结构动力学药物作用靶点研究，药物蛋白的分离，蛋白质工程药物的合成，蛋白质的定性，组织细胞中各种蛋白质在生物体中如何发展功能，基因表达产物的分离。全自动蛋白纯化系统可以检
Western－Blot详解(原理、试剂、步骤及问题解答)5
NN. 用的是Roche molecular Biochemicals公司的由100kd，75kd，45kd，30kd，20kd，10kd组成的marker。开始做Western Blot时还能够看到marker，当然也仅能看见其中最多三条带。用80V进行SDS-PAGE电泳，用恒压10V4
人皮肤蛋白ELISA试剂盒操作程序洗板方法
样本处理及要求1. 血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取
细胞破碎方法和原理
液体剪切压力：通过将样品从高压腔转入到低压腔时产生的快速压力落差来破碎细胞优点：破碎快速有效,适合大体积细胞破碎缺点：可导致样品温度升高（操作时需要冷却系统）超声：通过高频率的超声波破碎细胞粉碎优点：操作简单缺点：可导致样品温度升高,其很难通过冷却系统降温,剪切力有可能导致蛋白质受损,噪音较大,破碎
PAP－elisa酶联免疫试剂盒检测中样品的处理
1．细胞培养物上清：细胞培养物于室温1000g，离心10分钟后收集上清，并将标本保存于-20℃，且应避免反复冻融。2．血清：标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g，4℃离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。3．血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂标本采集后3
Western－Blot操作步骤
背景： 蛋白质印迹的发明者是斯坦福大学George Stark。Neal Burnette于1981年所著的AnalyticalBiochemistry中首次被称为Western Blot。最开始做印迹的是一个叫Southern的科学家，但印迹的对象是DNA链，他把这种技术称为Southe
Western－Blot操作步骤
背景： 蛋白质印迹的发明者是斯坦福大学George Stark。Neal Burnette于1981年所著的AnalyticalBiochemistry中首次被称为Western Blot。最开始做印迹的是一个叫Southern的科学家，但印迹的对象是DNA链，他把这种技术
总蛋白和膜蛋白提取方法介绍
-膜蛋白具有多种功能，在细胞识别、细胞信号转导、运输等有着中着重要的角色，因此也是ji佳的药物靶点。抽提膜蛋白主要是进行蛋白组分析：常用的实验是非变性胶电泳、酶活分析、SDS-PAGE、western blot等。本文叙述了总蛋白的抽提方法、和膜蛋白的提取方法。一、从新鲜样品中提取总蛋白(简易法)1
Western－blotting之样品制备注意事项
无论你是处理细胞还是组织样本，蛋白提取都是一个很艰难的过程。要么使用物理方法将细胞破碎或者使用化学试剂处理细胞进行裂解。如果第一步提取就搞砸的话，那么长时间小心翼翼培养的细胞就会完全浪费。这里有一些建议可以帮助你进行样品的抽提。头号公敌：蛋白酶无论您选择哪种提取方法，蛋白酶都将是一个主要的关注点。当
Western－blotting之样品制备注意事项
无论你是处理细胞还是组织样本，蛋白提取都是一个很艰难的过程。要么使用物理方法将细胞破碎或者使用化学试剂处理细胞进行裂解。如果第一步提取就搞砸的话，那么长时间小心翼翼培养的细胞就会完全浪费。这里有一些建议可以帮助你进行样品的抽提。 头号公敌：蛋白酶 无论您选择哪种提取方法，蛋白酶都将是
如何获得精准的Western－Blot实验结果
蛋白质免疫印迹杂交实验（Western Blotting）是成熟 mRNA 翻译指导蛋白质合成量分析检测手段中最经典和最广泛为业界认可的一种,也是论文中最常见的数据呈现形式之一。虽然Western Blot实验原理比较简单，但是实验耗时长、步骤繁琐和实验结果重复性差，导致刚进实验室的小伙伴们，实
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蛋白质免疫印迹杂交实验（Western Blotting）是成熟 mRNA 翻译指导蛋白质合成量分析检测手段中最经典和最广泛为业界认可的一种,也是论文中最常见的数据呈现形式之一。虽然Western Blot实验原理比较简单，但是实验耗时长、步骤繁琐和实验结果重复性差，导致刚进实验室的小伙伴们
如何获得精准的Western－Blot实验结果
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如何获得精准的Western－Blot实验结果
蛋白质免疫印迹杂交实验（Western Blotting）是成熟 mRNA 翻译指导蛋白质合成量分析检测手段中最经典和最广泛为业界认可的一种,也是论文中最常见的数据呈现形式之一。虽然Western Blot实验原理比较简单，但是实验耗时长、步骤繁琐和实验结果重复性差，导致刚进实验室的小伙伴们，实
如何做出一手漂亮的Western－Blot实验结果？
蛋白质免疫印迹杂交实验（Western Blotting）是成熟 mRNA 翻译指导蛋白质合成量分析检测手段中最经典和最广泛为业界认可的一种,也是论文中最常见的数据呈现形式之一。虽然Western Blot实验原理比较简单，但是实验耗时长、步骤繁琐和实验结果重复性差，导致刚进实验室的小伙伴们
小分子蛋白Western－blot－检测
实验概要 1.目的 检测小分子蛋白抗体2． 3． 适用范围 单克隆抗体和多克隆抗体实验原理将经电泳分离的抗原转印到膜上作为固相,利用酶标记的抗抗体以检测已与固相抗原结合的受检抗体主要试剂试剂配制4.1.1 40% Bis-acrylamide with 2.6% C （Acrylamide:
蛋白印迹(Western－Blot)常用试剂
蛋白印迹(Western Blot)常用试剂>>>蛋白抽提货号品名规格价格备注WB003组织蛋白抽提试剂100ml300全蛋白抽提WB004RIPA裂解液100ml100全蛋白抽提WB005细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂100次680WB006膜蛋白和胞质蛋白抽提试剂100次680WB007改良We