数字PCR发展历程

传统的荧光定量PCR,经过多年的发展,已是很成熟的实验方案了。其中,最常用的是Taqman法和SYBR Green法。而在这二种方法当中,Taqman法又以其特异性高、定量精确,得到广大用户的认可。但是Taqman法PCR,它还是一个相对定量的办法。它测的是一个Ct值,也就是PCR到第几个循环,荧光强度达到了一个设定值。要想用Taqman方法得到:样本中到底有几个目标基因的拷贝,那么还是要再做一个标准品的(qPCR)曲线。才能知道样本的Ct值落在标准曲线的哪个位置上。再进一步推算出样本中的拷贝数量。这样做既增加了工作量,因为引入了标准品,又多引入了一个实验的误差变量。新发明的微滴数字PCR采用一种全新的方式进行核酸分子的定量,与传统PCR、定量PCR相比,其结果的精确度、准确性和灵敏度更佳。定量的结果不再依赖于Ct值,直接给出靶序列的起始浓度,实现真正意义上的绝对定量。微滴数字PCR的原理,就是把原来一整管的PCR反应液......阅读全文

数字PCR发展历程

传统的荧光定量PCR,经过多年的发展,已是很成熟的实验方案了。其中,最常用的是Taqman法和SYBR Green法。而在这二种方法当中,Taqman法又以其特异性高、定量精确,得到广大用户的认可。但是Taqman法PCR,它还是一个相对定量的办法。它测的是一个Ct值,也就是PCR到第几个循

PCR发展历程

纵览这些国际生命科学工具巨头公司对PCR仪的研究历史,我们可以发现他们都起步很早,又经过二三十年的技术积累,所以技术上比国内的产品成熟,无论从温度控制精度上,还是升降温速度上都高于国内大部分的仪器,而且整体质量比较稳定。所以在国内市场上,这些国际大牌在很长的历史时段里市场份额更是接近90%(2012

数字PCR技术研究与发展

数字PCR即Digital PCR(dPCR),它是一种核酸分子绝对定量技术。相较于qPCR,数字PCR可让你能够直接数出DNA分子的个数,是对起始样品的绝对定量。数字PCR是一种核酸分子绝对定量技术。相较于qPCR,数字PCR能够直接读出DNA/RNA分子的个数,是对起始样品核酸分子的绝对定量。1

数字PCR技术的发展和原理

数字PCR即Digital PCR(dPCR),它是一种核酸分子绝对定量技术。相较于qPCR,数字PCR可让你能够直接数出DNA分子的个数,是对起始样品的绝对定量。在定量PCR时,我们常常纠结一个问题,究竟是相对定量还是绝对定量呢?如今,你无需纠结了,因为数字PCR(digital PCR)来了。尽

数字PCR技术的发展与应用简介

数字PCR技术的原理数字PCR(Digital PCR-dPCR)技术是一种新的核酸检测和定量方法,与传统定量PCR(qPCR)技术不同,数字PCR采用绝对定量的方式,不依赖于标准曲线和参照样本,直接检测目标序列的拷贝数。由于这种检测方式具有比传统qPCR更加出色的灵敏度和特异性、精确性,dPCR迅

多肽的发展历程

  随着科技的发展,生产肽的方法也在不断发展。五六十年代,主要是从动物脏器获取肽。如胸腺肽,其生产方法是将刚生下来的小牛宰杀之后,割下其胸腺,然后用震荡分离的生物技术,将小牛胸腺中的肽震荡分离出来,制成胸腺肽针剂。这种胸腺肽主要用于人体免疫。现如今,这种肽已处于淘汰状态。世界上曾经一度流行的“疯牛病

供水设备发展历程

  供水设备发展历程(80年代初第一代 —— 21世纪第六代)  楼层供水系统第一代(始于80年代初)  名称:重力式上下水位控制供水  特点:需要建水池或水箱,自来水放入水池或水箱,再从零压力启动。系统由水泵、上水池(或水塔)、下水池(或水井)和控制柜组成的供水系统。  楼层供水系统第二代(始于8

多肽的发展历程

  随着科技的发展,生产肽的方法也在不断发展。五六十年代,主要是从动物脏器获取肽。如胸腺肽,其生产方法是将刚生下来的小牛宰杀之后,割下其胸腺,然后用震荡分离的生物技术,将小牛胸腺中的肽震荡分离出来,制成胸腺肽针剂。这种胸腺肽主要用于人体免疫。现如今,这种肽已处于淘汰状态。世界上曾经一度流行的“疯牛病

光谱的发展历程

人类观察到的光谱现象,一是彩虹,另一个是极光。对可见光谱所作的科学研究是1666年牛顿的色散实验,这是人类早对光谱的研究。牛顿的色散实验看到的是一条彩色光带,并未观察到光谱谱线。直到136年之后(1802年),英国科学家沃拉斯顿(1766~1828)才采用了窄的狭缝发现太阳光谱中的7条暗线,但并未深

电池的发展历程

1746年,荷兰莱顿大学的马森布罗克在发明了收集电荷的“莱顿瓶”。因为他看到好不容易收集的电却很容易地在空气中逐渐消失,他想寻找一种保存电的方法。有一天,他用一支枪管悬在空中,用起电机与枪管连着,另用一根铜线从枪管中引出,浸入一个盛有水的玻璃瓶中,他让一个助手一只手握着玻璃瓶,马森布罗克在一旁使劲摇

天平的发展历程

  在化学实验中较早使用天平的有英国化学家布莱克,他生活和工作于18世纪,那个时候,正是化学中不断发现气体、并开始建立理论的时期。布莱克在化学研究中非常重视实验,而且是第一个应用定量的方法研究气体的人,定量研究需要称量,而称量离不开天平。历史资料表明,布莱克确实使用了天平,他用过的天平至今仍保存在爱

数字PCR技术

数字PCR作为第三代PCR技术,它是将分子生物学与现代微机电、微纳制造等工程技术相结合的典范。数字PCR以聚合酶链式反应的理论和技术体系为基础,结合现代微机电和光学检测技术,实现单分子水平的核酸精确定量检测。数字PCR的核心思想是将核酸样品平行划分为大规模单分子水平的微反应单元,然后对众多微反应单元

数字PCR简介

1985年美国科学家Kary Mullis发明PCR方法以后,PCR已经成为生命科学研究领域中最常规的实验方法之一。PCR是用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,可看作是生物体外的特殊DNA复制。PCR的最大特点,是能将微量DNA大量扩增。最传统的一代PCR采用琼脂糖电泳的方式对PCR产物进

基因免疫的发展历程

基因免疫是20世纪90年代初期建立和发展起来的一门新的免疫学理论和技术。实验发现质粒DNA可在体内肌细胞中以环状、非整合、非复制状态存在达1个月之久,而转基因产物的活性在体内可检测到达2个月之久。这一发现打破了人们以往认为的外源DNA为体内细胞摄取需要其它成分辅助的观点,表面裸DNA可直接为体内细胞

阿胶糕的发展历程

  组方:阿胶、黑芝麻、核桃仁、冰糖,黄酒。  典故:古代四大美人里面,杨贵妃的皮肤最好。唐代诗人白居易曾经这样描写过关于杨贵妃的皮肤,说“春寒赐浴华清池,温泉水滑洗凝脂”,凝脂就是说杨贵妃的皮肤非常细嫩光滑。而以素有“补血圣药”之称的阿胶制成的阿胶糕,是大美人私藏美容秘方的其中之一。  世界上第一

电透析的发展历程

  1980 年代因使用脂肪质阴离子薄膜( Aliphatic anion membrane )之缘故,往复式电透析法更得以有效解决各种问题,包括悬浮物质、有机物、含矿物质之排放等。盐类溶解于水中将分解产生离子,且盐类溶液属电解质(Electrolyte ),电透析法系将无数的阴/阳离子薄膜,交错的

微滤的发展历程

发展历程微滤技术的研究是从19世纪初开始的,它是膜分离技术中最早产业化的一种,以天然或人工合成的聚合物制成的微孔过滤膜最早出现于19世纪中叶。1907年Bechhold发表了第一篇系统研究微孔滤膜性质的报告。1918年Zsigmondy等首先提出了商品规模生产硝化纤维素微孔过滤膜的方法,并于1921

血凝仪的发展历程

  血凝仪的主要检测项目是凝血四项,一般是在术前的准备工作中会用到,通过凝血四项的检测结果,来判断患者的止血功能是否存在缺陷,避免术中出现大出血的情况,而应对不及时,导致严重的后果。血凝仪发展到现在,已经经历了多个阶段,其检测的方便性、检测结果的准确性在逐步提供。  1910年Kottman发明了世

脱敏反应的发展历程

1909年,Noon用自动免疫法治疗花粉性鼻炎获得成功,开创了免疫治疗新纪元。 经过半个多世纪的实践,免疫治疗显示了一定的临床效果,但是自从上世纪80年代起,由于英国发生了数例由于注射免疫治疗制剂而死亡的病例,导致有关政府机构下令全面禁止免疫治疗。1986年Scadding和Brostoff首次利用

类器官的发展历程

1907年,Henry Van 发现物理分离的海绵细胞可以重现聚集,自行组成一个新的功能完善的海绵。在接下来的几十年里,脊椎动物中也发现了相似的细胞分离再聚合现象,例如1944年Holtfreter的两栖动物肾组织实验和1960年Weiss的禽类胚胎实验。1961年 Piercehe和 Verney

腹膜透析的发展历程

  腹膜透析(PD)是利用腹膜通过重力作用经导管灌入患者的腹膜腔。由于在腹膜两侧存在溶质的浓度梯度差,高浓度一侧的溶质向低浓度一侧移动(弥散作用)。通过腹腔透析液不断地更换,以达到清除体内代谢产物、毒性物质及纠正水、电解质平衡紊乱的目的。

微量移液器的发展历程

  微量移液器是一种移取微量液体的新型实验工具,是进行生化实验、微生物学实验和分子生物学实验的必备工具。移液器为量出式量器,分定量移液器和可调移液器两大类。其型式分为单头型和多头型。微量移液器主要包括手动移液器和电子移液器两种。微量移液器的容量规格范围为0.1uL~5mL,满足液体的精确取样和转移的

网格细胞的发展历程

  动物跟人类一般靠三种类型的细胞来认路,分别是:方向细胞、位置细胞和网格细胞。但人类一直尚未确定大脑中存有网格细胞。[1]  2005 年Hafting 等人通过变换实验箱的几何外形和内径,记录大鼠在不同实验箱觅食过程中内嗅皮层的神经元放电活动,发现了具有强烈空间放电特性的网格细胞在有关嗅皮层参与

概述脱敏的发展历程

  1909年,Noon用自动免疫法治疗花粉性鼻炎获得成功,开创了免疫治疗新纪元。 经过半个多世纪的实践,免疫治疗显示了一定的临床效果,但是自从上世纪80年代起,由于英国发生了数例由于注射免疫治疗制剂而死亡的病例,导致有关政府机构下令全面禁止免疫治疗。  1986年Scadding和Brostoff

DNA技术的发展历程

  我国法医DNA技术的发展道路不是很长,但却取得了突出的成果,在侦查破案中发挥了巨大的作用。  在“七五”后期,从1987年起,我国正式立项对DNA指纹技术进行研究,经过两年的努力,至1989年我国首次把DNA指纹技术应用于办案,开始了我国 法医DNA检验的新时代。随着DNA指纹技术的不断应用,技

细胞疗法的发展历程

  细胞治疗已有数百年历史。  首次细胞治疗概念可以追溯到1493年至1541年,由菲律宾学者Auredus Paracelsus提出。  19世纪30年代,德国科学家施莱登、施旺和魏尔肖等创立细胞学说。  1912年德国医生将细胞第一次用于治疗“小儿胸腺机能减退和甲状机能低下”。  1930年瑞士

数字PCR的原理

数字 PCR 的工作原理在于将 DNA 或 cDNA 样品分割为许多单独、平行的 PCR 反应,部分这些反应包含了靶标分子(阳性),而其他不包含(阴性)。 单个分子可以被扩增一百万倍或更多。 在扩增期间,TaqMan® 化学试剂及染料标记探针可用于检测特定序列的靶标。 当不存在任何靶标序列时,没有信

数字PCR的优势

    数字PCR是生命科学领域最引人瞩目的创新之一。与其他传统分子诊断技术相比,数字PCR技术的优势在于:    高灵敏度,可实现单分子级检测dPCR本质上将一个传统的PCR反应变成了数万个PCR反应, 在这数万个反应单元中分别独立检测目的序列,从而大大提高了检测的灵敏度。    高精度,可检测微

数字PCR应用(二)

4、能够有效区分浓度差异(变化)微小的样品:更好的准确度、精密度和重复性,可以用于精确测定靶基因的相对表达,基因拷贝数变异分析等。图4. qPCR和dPCR的对比 四.dPCR的多指标检测的实现 如同qPCR一样,dPCR中实现多指标的并行检测能显著降低检测成本,获取更丰富的检测信息。 不同于qPC

数字PCR应用(三)

Fluidigm公司于2006年底推出了基于集成流体通路(IFC)芯片的Bio-Mark™ 高通量基因剖析系统。 其创新在于集成液体通路技术:应用集成电路制造工艺(光刻)在硅片或石英玻璃上刻上许多微管和微腔体,经过不同的控制阀门控制溶液在其中的活动来完成生物样品的分液、混合、PCR扩增。图8. Bi