高效液相色谱法的计算公式

高效液相色谱以经典的液相色谱为基础,是以高压下的液体为流动相的色谱过程。通常所说的柱层析、薄层层析或纸层析就是经典的液相色谱。所用的固定相为大于100um 的吸附剂( 硅胶、氧化铝等)。这种传统的液相色谱所用的固定相粒度大,传质扩散慢,因而柱效低,分离能力差,只能进行简单混合物的分离。而高效液相所用的固定相粒度小(5um-10um)、传质快、柱效高;高效液相色谱法(HPLC)是20世纪60年代后期发展起来的一种分析方法。近年来,在保健食品功效成分、营养强化剂、维生素类、蛋白质的分离测定等应用广泛。世界上约有80%的有机化合物可以用HPLC来分析测定。......阅读全文

高效液相色谱法有哪些特点

1、高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载液加高压。2、高速:分析速度快、载液流速快,较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15~30分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,小于1小时。3、高效:分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果,比工

高效液相色谱法可以检测什么

可以检测几乎所有的有机化合物的纯度。

高效液相色谱法入门知识(一)

高效液相色谱法系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱进行分离测定的色谱方法。注入进样阀的供试品,由流动相带入柱内,各成分在柱内被分离,并依次进入检测器,由记录仪、积分仪或数据处理系统记录色谱信号。采用微柱液相色谱系统可以减少溶剂的消耗并达到快速分离之目的。高效液相色谱法的主要分离机制有

高效液相色谱法相关词汇基线

基线(base line)——经流动相冲洗,柱与流动相达到平衡后,检测器测出一段时间的流出曲线。一般应平行于时间轴。

高效液相色谱法相关词汇噪音

噪音(noise)——基线信号的波动。通常因电源接触不良或瞬时过载、检测器不稳定、流动相含有气泡或色谱柱被污染所致。

高效液相色谱法具有哪些优点?

1.高速:分析速度快、载液流速快,较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15~30分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,一般小于1小时。2.高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载液加高压。3.高效:分离效能高。可选择固定相和流动相以达到好的分离效果,

高效液相色谱法相关词汇漂移

漂移(drift)——基线随时间的缓缓变化。主要由于操作条件如电压、温度、流动相及流量的不稳定所引起,柱内的污染物或固定相不断被洗脱下来也会产生漂移。

高效液相色谱法入门知识(二)

2.系统适用性试验色谱中最难分离物质对或与其相关的物质对的分离度和待测物响应值的重复性是系统适用性试验的重要参数。按各品种项下要求对色谱系统进行适用性试验,即用规定的对照品对色谱系统进行试验和调整,应符合要求;或规定色谱条件下的最小理论板数、分离度、重复性和拖尾因子。(1)色谱柱的理论板数(n)在规

高效液相色谱法(HPLC)复核细则

一、对起草单位的要求:1.HPLC法用于药品的有关物质检查或含量测定时,需提供建立HPLC法的依据及参考文献。2.应对建立的方法进行论证,按照中国药典2000年版第二部凡例与附录收载的药品质量标准分析方法验证项下所列的要求进行试验。3.建立方法时,应考虑下列事项:①首选填料为十八烷基键合硅胶

高效液相色谱法有哪些特点

1、高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载液加高压。2、高速:分析速度快、载液流速快,较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15~30分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,小于1小时。3、高效:分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果,比工

高效液相色谱法有哪些特点

1、高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载液加高压。2、高速:分析速度快、载液流速快,较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15~30分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,小于1小时。3、高效:分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果,比工

高效液相色谱法的固定相的分类

高效液相色谱法的固定相的分类 : (1)按固定相承受压力分:刚性固体:以二氧化硅为基质,可承受较高压力,表面可键合各种功能官能团---键合固定相,是目前应用最广泛的固定相。硬胶:主要用于离子交换色谱法和凝胶色谱法中,由聚苯乙烯与二乙烯基苯交联而成,可承受的压力较低。  (2)按孔隙深度分:表面多孔型

高效液相色谱法的梯度洗脱的介绍

  类似于GC中的程序升温。已成为现代高效液相色谱中不可缺少的部分。梯度洗提,就是载液中含有两种(或更多)不同极性的溶剂,在分离过程中按一定的程序连续改变载液中溶剂的配比和极性,通过载液中极性的变化来改变被分离组分的分离因素,以提高分离效果。梯度洗提可以分为两种:  a.低压梯度(也叫外梯度):在常

高效液相色谱法与经典液相色谱法的区别在哪里

高效液相色谱法包括正相高效液相色谱法和反相高效液相色谱法.正相高效液相色谱法中流动相的极性小于固定相的极性,也就是以及性键合相为固定相(常以氨基、氰基键合相等作为固定相).反相高效液相色谱法中流动相的极性大于固定相的极性,也就是以非极性键合相为固定相(常以十八硅烷C18、辛烷C8、甲基C1、苯基等作

高效液相色谱法与经典液相色谱法的区别在哪里

高效液相色谱法包括正相高效液相色谱法和反相高效液相色谱法.正相高效液相色谱法中流动相的极性小于固定相的极性,也就是以及性键合相为固定相(常以氨基、氰基键合相等作为固定相).反相高效液相色谱法中流动相的极性大于固定相的极性,也就是以非极性键合相为固定相(常以十八硅烷C18、辛烷C8、甲基C1、苯基等作

高效液相色谱法的特点和优缺点

  高效液相色谱法有“三高一广一快”的特点:  ①高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载液加高压。  ②高效:分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果,比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。  ③高灵敏度:紫外检测器可达0.01ng,进样量在

高效液相色谱法用于霉菌毒素的检测

每年霉变粮食的量占据了总粮食产量的很大一部分,这不仅对国家经济造成了损失,若霉变的粮食被人畜食用,还会引发中毒、癌症等症状。霉菌毒素主要有黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮等,尤其是黄曲霉毒素,被列为诱发癌症的高危因素。而某些初步霉变的粮食,其感官上的变化并不明显,因此,对霉菌毒素的检测尤为重要。HPLC 可

吡哆素的测定—高效液相色谱法

应用范围:该方法采用高效液相色谱法测定维生素B6(C8H10NO5P)的含量。该方法适用于维生素B6。方法原理:供试品制成流动相溶液,进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长291nm处检测维生素B6吸收值,计算出其含量。试剂:1. 甲醇2. 0.04%戊烷磺酸钠溶液(用冰醋酸调节p

高效液相色谱法的应用是什么?

  高效液相色谱法又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实

高效液相色谱法的主要类型有哪些

  高效液相色谱法分为:液-固色谱法、液-液色谱法、离子交换色谱法、凝胶色谱法。  1、液-固色谱法(液-固吸附色谱法)  固定相是固体吸附剂,它是根据物质在固定相上的吸附作用不同来进行分配的。  ①液-固色谱法的作用机制  吸附剂:一些多孔的固体颗粒物质,其表面常存在分散的吸附中心点。  流动相中

关于高效液相色谱法的历史发现介绍

  1903年俄国植物化学家茨维特(Tswett)首次提出“色谱法”(Chromatography)和“色谱图”(Chromatogram)的概念。茨维特使用色谱法 chromatography (来自希腊字, chroma 意思是颜色, graphy 意思是记录  -直译为颜色记录)来描述他的彩色

高效液相色谱法检测蓖麻毒素的介绍

  高效液相色谱检测将待测物质溶于流动相中,利用色谱柱固定相将流动相的组成进行分离,对检测器收集到的峰信号转换为待测物质浓度,进而来判定待测物质含量的一种方法,具有速度快、分辨率高、灵敏度高等特点。采用PROTEIN KW-802.5凝胶色谱柱,在柱温25℃、流速1mL/min、进样量10μL的条件

高效液相色谱法检测可卡因的原理简介

  高效液相色谱法,高效液相色谱的原理与气相色谱相对,可对热不稳定、不易挥发、具有大分子量的各种毒品进行分离检测,常用的检测器有紫外检测器、二极管阵列检测器、荧光检测器等。色谱/质谱联用分析法,使用GC/MS或者HPLC/MS进行毒物和药物的鉴定巳经成为国际上公认的标准方法,也是向法庭提供鉴定结果的

反相高效液相色谱法的缺点有哪些

  反相高效液相色谱是由非极性固定相和极性流动相所组成的液相色谱体系,它正好与由极性固定相和弱极性流动相所组成的液相色谱体系(正相色谱)相反。  影响溶质保留值的三个因素  烷基键合固定相对每种溶质分子缔合作用和解缔作用能力之差,就决定了溶质分子在色谱过程的保留值。以下简述影响溶质保留值的三个因素:

高效液相色谱法对色谱柱的要求!

反相色谱系统使用非极性填充剂,常用的色谱柱填充剂为化学键合硅胶,以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用,辛基硅烷键合硅胶和其他类型的硅烷键合硅胶(如氰基键合硅烷和氨基键合硅烷等)也有使用。正相色谱系统使用极性填充剂,常用的填充剂有硅胶等。离子交换色谱系统使用离子交换填充剂;分子排阻色谱系统使用凝胶或高分子多

简述高效液相色谱法的应用领域

  HPLC的出现不过三十多年的时间,但这种分离分析技术的发展十分迅猛,应用十分广泛。其仪器结构和流程多种多样。典型的高效液相色谱仪结构和流程可用下列方框图表示(See Fig.3-4)。高效液相色谱仪一般都具备贮液器、高压泵、梯度洗提装置(用双泵)、进样器、色谱柱、检测器、恒温器、记录仪等主要部件

高效液相色谱法出现负峰的原因

有可能是你们的流动相用的甲醇不好,甲醇里有强紫外吸收物质,所以会有负峰有时流动相与配样溶剂不一样也会引起负峰流动相和样品的溶剂不一样,样品中的杂质没有紫处吸收或吸收很小,而流动相紫外吸收大,如用甲醇时波长设定在220nm以下时,常出现这种现象.

高效液相色谱法中的校正因子

定性依据的是保留时间。 定量依据的是与对照品的比对。 HPLC中常用的定量方法(主要以峰面积为基础),有:外标一点法,外标两点法,外标标准曲线,内标一点法,内标两点法,内标标准曲线;归一化法在一定的条件下也可以用作定量。

高效液相色谱法的主要类型有哪些

  高效液相色谱法分为:液-固色谱法、液-液色谱法、离子交换色谱法、凝胶色谱法。  1、液-固色谱法(液-固吸附色谱法)  固定相是固体吸附剂,它是根据物质在固定相上的吸附作用不同来进行分配的。  ①液-固色谱法的作用机制  吸附剂:一些多孔的固体颗粒物质,其表面常存在分散的吸附中心点。  流动相中

谷胱甘肽的高效液相色谱法测量相关介绍

  原理:高效液相色谱法是由于溶质在同定相和流动相之间的分配系数、亲和力、分子大小、吸附能力等不同,而进行连续分离的过程。  操作步骤:  ①色谱条件  色谱柱:Kromasil C18柱(4.6 mm × 250 mm,5 μm)。  流动相:磷酸二氢钠和辛烷磺酸钠混合溶液(磷酸二氢钠3.0 g、