1。如果是针对目的基因反转录为cDNA将cDNA加到T载体上 去测序。查看测序结构撒2。如果想知道你是否获得了DNA,直接电泳,可以看到一条弥散的带。......阅读全文
实验材料 poly(A)+RNA 反转录酶 鼠源反转酶 或禽源反转录酶
实验材料 poly(A)+RNA反转录酶鼠源反转酶 或禽源反转录酶试剂、试剂盒 oligo(dT)12-18 lmol LTris-Cl 1mol LTris-Cl lmol LKC1 25 mmol LMgCl2 dNTP 混合物 0.lmol LDTT RNasin实验步骤 一材料与
原位PCR的反转录不同于原位PCR的过程包括两个:即蛋白酶消化后用无RNA酶的DNA酶消化过夜和原位PCR的反转录过程。此处主要介绍这两个过程,其余方法同原位PCR。1.DNA酶消化【试剂与配制】无RNA酶的DNA酶10×缓冲液:35μl 3mol/L NaAc,5μl 1mol/L MgSO4,6
实验方法原理 几乎所有的真核基因mRNA分子的3’-末端,都带有一个多聚的腺苷酸结构,即通常所说的poly(A)尾巴。因此,在RNA聚合酶的作用下,可按mRNA为模板,以oligo(dT)为引物合成出cDNA拷贝。根据mRNA分子3’-末端序列末端结构的分析可以看到,在这段poly(A)序列起点碱基
1。如果是针对目的基因反转录为cDNA将cDNA加到T载体上 去测序。查看测序结构撒2。如果想知道你是否获得了DNA,直接电泳,可以看到一条弥散的带。
Thermo Scientific RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit是一套用于以RNA为模板高效合成第一链cDNA的完整系统,可合成长达13kb 的cDNA,是您值得信赖的反转录试剂盒。试剂盒配套提供的RiboLockRNase Inhibitor
实验材料 病毒细胞 试剂、试剂盒 polybrene 小
mRNA差异显示法 荧光标记法 实验方法原理 几乎所有的真核基因mRNA分子的3’-末端
实验材料 病毒细胞试剂、试剂盒 polybrene小牛血清DMEM仪器、耗材 培养皿滤膜实验步骤 1. 在开始分析的前1天,按1:50将NIH 3T3细胞分传于3个6 cm 培养皿中。将1个培养皿标记为阳性对照,1个为阴性对照,1个用于待测病毒原液。2. 含有选择标记的待测病
自己设计引物,进行检测。比较信的过。至于RNA提取反转录,及PCR扩增等试剂,几家知名试剂公司的效果都比较好。本实验室可以代测,用RT-PCR方法。