转膜时间过长会不会使有差异的蛋白表达变得没有差异
不会，只要你的每个样本的处理时间相同，WB结果就可以反应出表达量。......阅读全文
小分子转膜时间
小分子的话就不要过夜转,采取100V一小时应该就可以了,注意降温。知识补充蛋白的分子量 是理论的分子量 其实还可能有一些修饰的 比如乙酰化 糖基化等那么要考虑分子量的问题 其次 你买的抗体怎么样？特异性 效价 亲和力等 是否适合做WB？ 再次 你可以用预染的蛋白marker试一试 确定你的目的蛋白没
western转膜时间和电流
300mA90分钟,我们是1.0的胶厚度,要是0.75也行,但1.5mm的厚胶要时间长一些,另外你做的蛋白如果超过100kd建议时间更长一些,若是小蛋白就减少转模时间,立春红确定最适时间
转膜时间太长，小蛋白会不会从膜中穿过
影响因素应该有很多；一、首先需确定目的蛋白是否在胶上：跑完电泳可以先考马斯亮蓝染胶，如果在marker的指示下看到了目的蛋白的清晰条带，基本可以确定蛋白已经在胶上跑开。二、膜的准备：1.根据被转移的蛋白分子量大小，选择不同孔径的pvdf膜。因为随着膜孔径的不断减小，膜对低分子量蛋白的结合就越牢固。通
转膜时间太长，小蛋白会不会从膜中穿过
影响因素应该有很多；一、首先需确定目的蛋白是否在胶上：跑完电泳可以先考马斯亮蓝染胶，如果在marker的指示下看到了目的蛋白的清晰条带，基本可以确定蛋白已经在胶上跑开。二、膜的准备：1.根据被转移的蛋白分子量大小，选择不同孔径的pvdf膜。因为随着膜孔径的不断减小，膜对低分子量蛋白的结合就越牢固。通
转膜时间太长，小蛋白会不会从膜中穿过
影响因素应该有很多；一、首先需确定目的蛋白是否在胶上：跑完电泳可以先考马斯亮蓝染胶，如果在marker的指示下看到了目的蛋白的清晰条带，基本可以确定蛋白已经在胶上跑开。二、膜的准备：1.根据被转移的蛋白分子量大小，选择不同孔径的pvdf膜。因为随着膜孔径的不断减小，膜对低分子量蛋白的结合就越牢固。通
目的蛋白分子量与转膜时间对应关系
转膜分干转和湿转，恒流转膜一般0.8mA/cm2分子量与转膜时间对应关系分离胶浓度（％） 线性分离范围 电泳时间(h)15 10~43 0.512 12~60 0.7510 20~80 1.57.5 36~94 1.5~2.0
目的蛋白分子量与转膜时间对应关系
转膜分干转和湿转，恒流转膜一般0.8mA/cm2分子量与转膜时间对应关系分离胶浓度（％） 线性分离范围 电泳时间(h)15 10~43 0.512 12~60 0.7510 20~80 1.57.5 36~94 1.5~2.0
目的蛋白分子量与转膜时间对应关系
转膜分干转和湿转，恒流转膜一般0.8mA/cm2分子量与转膜时间对应关系分离胶浓度（％） 线性分离范围 电泳时间(h)15 10~43 0.512 12~60 0.7510 20~80 1.57.5 36~94 1.5~2.0
目的蛋白分子量与转膜时间对应关系
转膜分干转和湿转，恒流转膜一般0.8mA/cm2分子量与转膜时间对应关系分离胶浓度（％） 线性分离范围 电泳时间(h)15 10~43 0.512 12~60 0.7510 20~80 1.57.5 36~94 1.5~2.0
目的蛋白分子量与转膜时间对应关系
转膜分干转和湿转，恒流转膜一般0.8mA/cm2分子量与转膜时间对应关系分离胶浓度（％） 线性分离范围 电泳时间(h)15 10~43 0.512 12~60 0.7510 20~80 1.57.5 36~94 1.5~2.0
目的蛋白分子量与转膜时间对应关系
转膜分干转和湿转，恒流转膜一般0.8mA/cm2分子量与转膜时间对应关系分离胶浓度（％） 线性分离范围 电泳时间(h)15 10~43 0.512 12~60 0.7510 20~80 1.57.5 36~94 1.5~2.0
目的蛋白分子量与转膜时间对应关系
转膜分干转和湿转，恒流转膜一般0.8mA/cm2分子量与转膜时间对应关系分离胶浓度（％） 线性分离范围 电泳时间(h)15 10~43 0.512 12~60 0.7510 20~80 1.57.5 36~94 1.5~2.0
目的蛋白分子量与转膜时间对应关系
转膜分干转和湿转，恒流转膜一般0.8mA/cm2分子量与转膜时间对应关系分离胶浓度（％） 线性分离范围 电泳时间(h)15 10~43 0.512 12~60 0.7510 20~80 1.57.5 36~94 1.5~2.0
电泳、转膜
转膜是把DNA从琼脂糖凝胶中转移到固相支持物（一般是尼龙膜）上固定，是进行各种后续研究（如RFLP分析，阳性克隆的筛选验证等所有涉及分子杂交的研究）的前提。实验目的：掌握Southern blotting的原理及操作步骤。实验原理：1. 转膜的方式： 向上的毛细管转移 向下的毛细管转移 同时向
分子量在22kd转膜时间可为多少
分子量相差太大，建议分开转：22kD按常规转膜时间；大分子量（170kD）蛋白延长转膜时间或提高转膜电压（注意保持低转膜温度）；如果二者必须一起转，那就适当延长转膜时间吧，希望你的22kD不要转过了。
lc3的转膜时间多少电压电流多大
转膜的时候电压40v，可以看到电流先下降后上升。我转膜的时候就这样的，转膜效果挺好的。转膜液随着使用次数增多，电阻增大，相应电流下，电压增大，建议每次转膜液使用2～3次就换新的，这个是正常的，恒压的时候，电流也是会变化的，这是关于电泳液的问题，用的时间久了就会出现这样的问题，可以经常换电泳液
Western转膜步骤
下面的步骤适用于通过Xcell Ⅱ转印系统进行蛋白印记的大部分应用。为达到最佳效果，用户的优化是必要的。I. 所需材料：•Xcell SureLock™或Xcell Ⅱ™ Mini-Cell以及Blot Module（Cat. Nos. EI10001, EI9001及EI9051）•电泳后的迷你胶
电泳、转膜概述
转膜是把DNA 从琼脂糖凝胶中转移到固相支持物（一般是尼龙膜）上固定，是进行各种后续研究（如 RFLP 分析，阳性克隆的筛选验证等所有涉及分子杂交的研究）的前提。实验目的：掌握 Southern blotting 的原理及操作步骤实验原理：1．转膜的方式：向上的毛细管转移向下的毛细管转移同时向两张膜
Southern转膜方法
Southern转膜方法（毛细管虹吸印迹法、电转移法与真空转移法）将凝胶中的DNA进行碱变性并将pH值恢复至中性后，即可将凝胶中的DNA片段转移到固相支持物上。用于转膜的固相支持物有多种，包括硝酸纤维素滤膜(NCM)、尼龙膜、化学活性膜和滤纸等，Southern转膜时可根据需要选择不同的固相支持物用
WB转膜时间与分子量及胶厚度的关系
分子量越大转膜时间越长，60KD转膜可以用300毫安恒流100min，20KD的话一个小时足够了，胶越厚越不容易转完全，不建议用1.5的胶。
转膜时间过长，电压过大会不会对蛋白有影响
确定是转膜不稳定造成的而不是电泳的问题？电泳后的条带正常？可能很多原因~转膜液离子强度不对~转膜电压电流不稳定~转膜仪的问题~一般来说湿转比半干转更稳定一些~只不过时间长~
转膜时间过长，电压过大会不会对蛋白有影响
确定是转膜不稳定造成的而不是电泳的问题？电泳后的条带正常？可能很多原因~转膜液离子强度不对~转膜电压电流不稳定~转膜仪的问题~一般来说湿转比半干转更稳定一些~只不过时间长~
转膜时间过长，电压过大会不会对蛋白有影响
确定是转膜不稳定造成的而不是电泳的问题？电泳后的条带正常？可能很多原因~转膜液离子强度不对~转膜电压电流不稳定~转膜仪的问题~一般来说湿转比半干转更稳定一些~只不过时间长~
转膜时间过长，电压过大会不会对蛋白有影响
确定是转膜不稳定造成的而不是电泳的问题？电泳后的条带正常？可能很多原因~转膜液离子强度不对~转膜电压电流不稳定~转膜仪的问题~一般来说湿转比半干转更稳定一些~只不过时间长~
western－blot实验怎么样转膜能够节省时间
转膜你用的是湿转的方法吗？湿转速度比较慢，一般的半干转能快点，30-45min转完，现在市面上有很多快速半干转，3-15min可以完成转印，可以在转膜这一步节约一些时间。我还能想到另外一个可以节约时间的部分，就是检测，如果以前压胶片，现在可以考虑用成像仪，这个也可以节省一些时间。至于抗体孵育的时间，
转膜时间过长，电压过大会不会对蛋白有影响
确定是转膜不稳定造成的而不是电泳的问题？电泳后的条带正常？可能很多原因~转膜液离子强度不对~转膜电压电流不稳定~转膜仪的问题~一般来说湿转比半干转更稳定一些~只不过时间长~
转膜时间过长，电压过大会不会对蛋白有影响
确定是转膜不稳定造成的而不是电泳的问题？电泳后的条带正常？可能很多原因~转膜液离子强度不对~转膜电压电流不稳定~转膜仪的问题~一般来说湿转比半干转更稳定一些~只不过时间长~
wb转膜条件公式
wb转膜条件公式：10% SDS溶液(m/v)。将电泳后分离的蛋白质从凝胶中转移到固相载体（例如NC膜）上，通常有两种方法：毛细管印迹法和电泳印迹法。常用的电泳转移方法有湿转和半干转。两者的原理完全相同，只是用于固定胶/膜叠层和施加电场的机械装置不同。前者操作容易，转移效率高；而后者适用于大胶的蛋白
wb转膜条件公式
wb转膜条件公式：10% SDS溶液(m/v)。将电泳后分离的蛋白质从凝胶中转移到固相载体（例如NC膜）上，通常有两种方法：毛细管印迹法和电泳印迹法。常用的电泳转移方法有湿转和半干转。两者的原理完全相同，只是用于固定胶/膜叠层和施加电场的机械装置不同。前者操作容易，转移效率高；而后者适用于大胶的蛋白
western转膜放置问题
1. 定义转膜时与胶接触的一面为“正”2. 封闭时使用封闭液，液体盖过膜就好，所以无所谓正反3. 假如用暗室显影法，将显影的试剂与“正”面接触，胶片与“正面”接触4. 假如用荧光的话，理论上“正”面朝下，扫描，但实际操作过程中貌似都可以的