western转膜时间和电流
300mA90分钟,我们是1.0的胶厚度,要是0.75也行,但1.5mm的厚胶要时间长一些,另外你做的蛋白如果超过100kd建议时间更长一些,若是小蛋白就减少转模时间,立春红确定最适时间......阅读全文
PVDF膜活化处理完后不转膜能保存吗
PVDF膜即聚偏二氟乙烯膜（polyvinylidene fluoride）是蛋白质印迹法中常用的一种固相支持物。PVDF膜是疏水性的，膜孔径有大有小，随着膜孔径的不断减小，膜对低分子量的蛋白结合就越牢固。大于20000的蛋白选用0.45um的膜，小于20000的蛋白选用0.2um的膜。PVDF膜在
PVDF膜活化处理完后不转膜能保存吗
PVDF膜即聚偏二氟乙烯膜（polyvinylidene fluoride）是蛋白质印迹法中常用的一种固相支持物。PVDF膜是疏水性的，膜孔径有大有小，随着膜孔径的不断减小，膜对低分子量的蛋白结合就越牢固。大于20000的蛋白选用0.45um的膜，小于20000的蛋白选用0.2um的膜。PVDF膜在
Western－Blot转膜时胶和膜放反了有影响吗
那蛋白就都转到滤纸上去了，没有到膜上。你找点丽春红染染膜看看，估计膜上什么也没有哇。不用往下做了。当然，如果你在膜上看到预染Marker了，还是值得再去尝试一下的。
反渗透膜清洗时间
如果是因为反渗透膜被阻塞而需要清洗，那么用两种清洗剂（清洗剂A和清洗剂B）可以解决绝大多数问题。把清洗剂投入消毒口，然后启动清洗循环，清洗循环结束后，系统自动进入待机模式。还有一种杀菌用的氯试剂片，也从消毒口投入。它在中性或者酸性液体环境中会生成次氯酸，能有效的杀灭细菌。建议每一个月进行一次氯试剂消
wb膜甲醇活化时间
不超过15秒。根据该物质简介可知，该物质的活化时间不超过15秒。pvdf膜在使用是需预处理，用甲醇处理的目的是活化膜上的正电基团，使其更容易与带负电的蛋白结合。pvdf膜具有较高的机械强度。
wb膜甲醇活化时间
不超过15秒。根据该物质简介可知，该物质的活化时间不超过15秒。pvdf膜在使用是需预处理，用甲醇处理的目的是活化膜上的正电基团，使其更容易与带负电的蛋白结合。pvdf膜具有较高的机械强度。
170KD蛋白转膜用多大电压
电流通过导体（或用电器）的时候，会受到一定的阻力，但在电压的作用下，电流能够克服这种阻力顺利通过导体（或用电器），但遗憾的是，流过串联电阻（或用电器）后，电位（电势）再也没有以前那么高了，它的电位（电势）下降了。而且电阻越大，它两端电位（电势）的变化就越大。所以，把电流流过电阻（或用电器）时，在电阻
western－blot转膜是怎么做的
蛋白免疫印迹( Western Blot) 是将电泳分离后的细胞或组织总蛋白质从凝胶转移到固相支持物NC膜或PVDF 膜上。目前主流方法是电转印法，分为湿式转印与半干转印。湿式转印是将胶块垂直方向夹在湿式转印槽内进行电转印。以E-Blotter湿转槽为例，一般使用垂直电泳槽的缓冲液槽体，将内部垂直电
请教western转膜封闭后怎么办
western blot中封闭主要是起去除非特异性吸附的作用在western blot转膜时，PVDF膜在甲醇活化后是带电的，因而在转膜时会将蛋白吸附。封闭的目的就是要将PVDF膜上无蛋白的部分空隙用奶粉填满，以免孵抗体的时候一抗二抗与之结合，产生非特异条带或者是背景杂乱。所以western blo
blot－转膜是应该加甲醇还是不该加
westernblot中封闭主要是起去除非特异性吸附的作用在westernblot转膜时，PVDF膜在甲醇活化后是带电的，因而在转膜时会将蛋白吸附。封闭的目的就是要将PVDF膜上无蛋白的部分空隙用奶粉填满，以免孵抗体的时候一抗二抗与之结合，产生非特异条带或者是背景杂乱。所以westernblot中封
10分钟读懂转膜甲醇的作用
VDF膜一定要在纯甲醇里浸润的！不然蛋白结合不上去。 在100%甲醇里短暂浸润,其目的是为了活化PVDF膜上面的正电基团，使它更容易跟带负电的蛋白质结合。小分子及大分子量的蛋白转移时，多加或不加甲醇也是这个目的。因为小分子不容易和膜结合而大分子更容易。 转膜的过程，是一个恒定电场下，电荷转移
western转膜之后，封闭之前要不要洗
westernblot中封闭主要是起去除非特异性吸附的作用在westernblot转膜时，pvdf膜在甲醇活化后是带电的，因而在转膜时会将蛋白吸附。封闭的目的就是要将pvdf膜上无蛋白的部分空隙用奶粉填满，以免孵抗体的时候一抗二抗与之结合，产生非特异条带或者是背景杂乱。所以westernblot中封
转印到膜上的蛋白质检测实验
实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 PBSTween印度墨汁仪器、耗材 摇床实验步骤 1. 将转印膜置于塑料容器中，在旋转摇床中于37℃用Tween 20溶液洗涤3次，每次30 min，然后再于室温用Tween 20溶液洗2次，每次30 min。2. 用印度墨汁溶液染膜3 h或过夜。 3. 在Twe
western转膜后marker拖尾是怎么回事
western转膜有时候marker深，有时候浅是很正常的事情因为不同批次转膜的时候，电压电流缓冲液温度等等条件不可能完全保持一致，在各种条件变化的情况下，很容易造成批次间的差异，具体表现就是有时候marker深，有时候浅所以western转膜有时候marker深，有时候浅是很正常的事情
western转膜后marker拖尾是怎么回事
western转膜有时候marker深，有时候浅是很正常的事情因为不同批次转膜的时候，电压电流缓冲液温度等等条件不可能完全保持一致，在各种条件变化的情况下，很容易造成批次间的差异，具体表现就是有时候marker深，有时候浅所以western转膜有时候marker深，有时候浅是很正常的事情
免疫印迹（Western－Blot）不同蛋白的转膜条件
蛋白来源:RAW264.7 总蛋白蛋白名称:一些转录因子蛋白分子量:40~70 KDWB 用膜类型、孔径:0.45 NC转膜方式(恒压、恒流):湿转 恒流 400 mA转膜时间:60~90 minPS. 其实吧,以我的经验来看,除非目的蛋白特别小,或者特别大,不然转膜时间真的不是那么重要, 曾经因为
western－blot转膜过程中需要注意些什么
最重要的就是SDS-PAGE胶和膜之间不要有气泡。。其次就是转膜的电压和时间要和蛋白大小对应上
wb转膜到半个小时改变电压会影响吗
转膜的时候电压40v，可以看到电流先下降后上升。我转膜的时候就这样的，转膜效果挺好的。转膜液随着使用次数增多，电阻增大，相应电流下，电压增大，建议每次转膜液使用2～3次就换新的，这个是正常的，恒压的时候，电流也是会变化的，这是关于电泳液的问题，用的时间久了就会出现这样的问题，可以经常换电泳液
western－blot－电泳液和转膜缓冲液的配方
5*SDS-PAGE电泳缓冲液 0.125M tris 15.1g, 1.25M glycine 94g,0.5% SDS 5.0g,加入800ml去离子水，搅拌溶解。加去离子水将溶液定容至1L后，室温保存。用的时候稀释成1*的就可以了。转膜缓冲液的配制方法：39mM glycine 2.9g,48
做western－blot洗膜时间可以缩短吗
这取决于你的抗体的特异性怎么样。洗膜时间通常是一定的，但是如果你的抗体表现很好，想要缩短也是没有问题的。但是如果做完以后，结果非特异多，或者不干净，那么保证洗膜时间，甚至延长，或者是改进洗膜液的成分都是有必要的。
转膜时大分子量和小分子量蛋白，该如何选择膜孔径
对所有的蛋白，我们推荐用 Nitrocellulose Sandwiches #12369（0.2 μm）的杂交膜去转膜，尤其是分子量低于 30 KD 的蛋白，建议使用较高浓度（12-15%）的蛋白分离胶并缩短转膜的时间，建议在 1 小时以内。大分子量蛋白（> 150 kDa）推荐使用 tris-a
转印到膜上的蛋白质检测实验_金染色
实验材料蛋白质试剂、试剂盒金染料溶液仪器、耗材摇床实验步骤1. 如”印度墨汁染色“之第1步操作洗涤转印膜。 2. 在AuroDye胶体金染料溶液中染色3 h，或连续摇动过夜。3. 用水冲冼膜，晾干。
Westernblot成像中得到完美荧光印迹的方法：湿膜快速转...
Westernblot成像中得到完美荧光印迹的方法：湿膜快速转干膜Westernblot荧光印迹膜成像：干膜or湿膜 ？干膜，还是湿膜成像：这是一个问题。经过漫长的一天实验做荧光蛋白印迹，首先成像，以便可以看到实验成果。 这项工作流程没有任何问题，但这可能无法生成最佳图像。 如果您正在进行定性实
转）科普时间—关于ios退款的真相，不要找什么代退！
app store怎么申请退款?iPhone 的应用商店中，有许多有趣好玩的应用。有时候会遇到不小心购买错了应用的情况，很多用户不想白花钱，那么app store怎么申请退款呢?接下来小编为大家带来了苹果appstore退款方法流程，希望能够帮到大家!苹果appstore退款方法流程1.打开苹果官方
企业为何“不想转”“不敢转”“不会转”？
企业“不想转”“不敢转”“不会转”，资源要素支撑相对不足，高端化、智能化、绿色化、融合化水平参差不齐，转型升级环境尚待优化……7月4日，在“粤商·省长面对面协商座谈会”上，关于传统产业转型升级的讨论热火朝天。 习近平总书记在二十届中央财经委员会第一次会议上强调，“坚持推动传统产业转型升级，不能
是不是分子量越大转膜时间越长
目的蛋白的分子量越大，需要的转膜时间越长，目的蛋白的分子量越小，需要的转膜时间越短。转膜分干转和湿转，恒流转膜一般0.8mA/cm2分子量与转膜时间对应关系分离胶浓度（％） 线性分离范围 电泳时间(h)15 10~43 0.512 12~60 0.7510 20~80 1.57.5 36~94 1.
是不是分子量越大转膜时间越长
目的蛋白的分子量越大，需要的转膜时间越长，目的蛋白的分子量越小，需要的转膜时间越短。转膜分干转和湿转，恒流转膜一般0.8mA/cm2分子量与转膜时间对应关系分离胶浓度（％） 线性分离范围 电泳时间(h)15 10~43 0.512 12~60 0.7510 20~80 1.57.5 36~94 1.
是不是分子量越大转膜时间越长
目的蛋白的分子量越大，需要的转膜时间越长，目的蛋白的分子量越小，需要的转膜时间越短。转膜分干转和湿转，恒流转膜一般0.8mA/cm2分子量与转膜时间对应关系分离胶浓度（％） 线性分离范围 电泳时间(h)15 10~43 0.512 12~60 0.7510 20~80 1.57.5 36~94 1.
转印到膜上的蛋白质检测实验_印度墨汁染色
实验材料蛋白质试剂、试剂盒PBSTween印度墨汁仪器、耗材摇床实验步骤1. 将转印膜置于塑料容器中，在旋转摇床中于37℃用Tween 20溶液洗涤3次，每次30 min，然后再于室温用Tween 20溶液洗2次，每次30 min。2. 用印度墨汁溶液染膜3 h或过夜。 3. 在Tween 2
wb中pvdf膜活化时间长有影响吗
有影响。用甲醇活化不能超过15秒，时间太久会对pvdf膜造成损伤。pvdf膜用甲醇泡的目的是为了活化pvdf膜上面的正电基团，使它更容易跟带负电的蛋白质结合，做小分子的蛋白转移时多加甲醇也是这个目的。