引物TM值和PCR程序问题
tm值和引物中的GC含量有关 只要相差不是太大就行 设定时取平均值就可以；你可以根据引物的长度和GC的百分比来确定一下哪个更准确。不知道你用的那个公司的机器，一般是的在退火温度后面的空格里，输入你每个循环升或降的温度，后面还有加减号代表升或降。......阅读全文
引物的Tm值是什么
负责引物合成的公司会给你引物的详细信息，其中有理论tm值，应该是和这个公式tm=2*（a+t）+4*(g+c)计算的一样，你在进行调整优化即可。
如何计算引物的Tm值？
引物设计软件都可以给出Tm，与引物长度、碱基组成及所使用缓冲夜的离子强度有关。 长度为25base以下的引物，Tm计算公式为：Tm = 4℃(G + C)+ 2℃(A + T) 对于更长的寡聚核苷酸，Tm计算公式为： Tm = 81.5 + 16.6 x Log10[Na+]
引物的TM值如何计算
Tm值就是DNA熔解温度，指把DNA的双螺旋结构在热变性过程中紫外吸收值达到最大值的1/2时的温度。不同序列的DNA，Tm值不同。DNA中G－C含量越高，Tm值越高，成正比关系。核酸Tm值（解链温度）计算评价标准是核酸所吸收的光线量达到其所增加吸收260nm光线的量的两倍达到的温度，当核酸达到Tm值
如何计算引物的Tm值？
引物设计软件都可以给出Tm，与引物长度、碱基组成及所使用缓冲夜的离子强度有关。长度为25base以下的引物，Tm计算公式为：Tm = 4℃(G + C)+ 2℃(A + T)对于更长的寡聚核苷酸，Tm计算公式为：Tm = 81.5 + 16.6 x Log10[Na+] + 0.41 (GC%) –
引物TM值和PCR程序问题
tm值和引物中的GC含量有关 只要相差不是太大就行 设定时取平均值就可以；你可以根据引物的长度和GC的百分比来确定一下哪个更准确。不知道你用的那个公司的机器，一般是的在退火温度后面的空格里，输入你每个循环升或降的温度，后面还有加减号代表升或降。
引物Tm值与PCR产物Tm值有什么区别
引物TM是设值和合成引物时的Tm值,也就是理论值。而PCR产物tm值是在实际操作中摸索出来的温度值引物Tm值与PCR产物Tm值这两个不同的引物当然退火温度也不相同,一般在设计引物的时候,程序就会显示出Tm值是多少.在做PCR的时候,将退火温度设定的稍微低于Tm值一点,降低引物的特异性,可能会好点.当
引物的浓度和TM值的技术
引物浓度的计算:引物保存在高浓度的状况下比较稳定。引物一般配制成10-50pmol/ul。一般情况下，建议将引物的浓度配制成50pmol/ul，加水的体积(微升)按下列方式计算：V (微升)= OD数*(乘)33 *(乘)*(乘)20000 / (除) 引物的分子量。引物的分子量可以从合成报
引物的Tm值，到底有多少意义
Tm较低，而且熔解温度范围较宽；离子强度较高时，Tm较高，熔解温度范围较窄。DNA溶液中离子强度低时，Tm较低，而且熔解温度范围较宽；离子强度较高时，Tm较高，熔解温度范围较窄。因此，在表示某一来源DNA的Tm值时，必须指出其测定条件。在一定条件下Tm高低由DNA分子中的G-C含量所决定。G-C含量
退火温度与引物的TM值有什么联系
退火温度与引物的TM值的关系主要和DNA聚合酶与其buffer有关。有些退火温度要比TM低5度、3度，有些还会高3度，有些是一模一样的。主要参考不同公司所生产的DNA聚合酶的说明书。
如何确定引物二聚体和扩增产物的Tm值
最近在做qPCR，今天遇到个样品的浓度很低，想看看能不能做出样品10倍梯度稀释的曲线，于是照常做了。结果最后的溶解曲线发现，头三个的Tm是84，之后的5个样品时77。从Ct值来看，也是头三个还有点像样，后面的Ct都是33-34.很显然后面的5个应该不是扩增产物，应该是奈不住寂寞的引物二聚体之类的非目
Tm值的影响Tm值的因素
Tm值的影响因素如下：（1）G—C的含量：在一定条件下Tm高低由DNA分子中的G-C含量所决定。G-C含量高时，Tm值比较高，反之则低。这是因为G-C之间的氢键较A-T多，解链时需要较多的能量之故。Tm值和G-C的含量可用二一个经验公式表示：（G—C）%=（Tm-69.3）×2.44在一定条件下（p
怎么计算Tm值
引物长度，碱基组成，引物使用缓冲的离子强度有关。长度为25mer以下的引物，Tm计算公式为：Tm = 4℃(G + C)+ 2℃(A + T)对于更长的寡聚核苷酸，Tm计算公式为：Tm = 81.5 + 16.6 x Log10[Na+] + 0.41 (%GC) – 600/size公式中，Siz
怎么计算Tm值
公式：（G—C）%=（Tm-69.3）×2.44在一定条件下（pH7.0，0.165MNaCl中）Tm值与（GC）%含量呈正比关系。因此，通过测定Tm值，可以推算出DNA分子中的碱基百分组成。在一定条件下Tm高低由DNA分子中的G-C含量所决定。G-C含量高时，Tm值比较高，反之则低。这是因为G-C
引物溶解引物保存
1. 如何测定引物的OD值？用紫外分光光度计在260nm波长测定溶液的吸光度来定量，请注意紫外分光光度计的使用，测定时溶液的吸光度最好稀释到0.2~0.8之间（吸光度太高或太低会有较大的误差）。DNA干粉用一定体积的水充分振荡溶解以后，取部分溶液稀释到1 ml 并在1 ml 标准比色皿中测定其吸光度
引物溶解引物保存
1. 如何测定引物的OD值？ 用紫外分光光度计在260nm波长测定溶液的吸光度来定量，请注意紫外分光光度计的使用，测定时溶液的吸光度最好稀释到0.2~0.8之间（吸光度太高或太低会有较大的误差）。DNA干粉用一定体积的水充分振荡溶解以后，取部分溶液稀释到1 ml 并在1 ml 标准比色皿中测定其
日立台式电镜TM4000/TM4000Plus申报ANTOP奖
洒下的汗水是青春，埋下的种子叫理想。守在悉心耕耘的“大地”，用创新留下丰碑，静待收获的时节。2019 ANTOP奖正方兴未艾，多家科学仪器企业竞相参与申报，这里将为您介绍ANTOP奖项“打榜”产品。 日立台式电镜TM4000/TM4000Plus开始申报ANTOP奖！ 第一台台式电子显微镜可
tm值与退火温度
我用primer 5设计出来的Tm值从来都是直接当退火温度用。用引物primer-blast的话我都是直接贴序列上去。有其他菌的匹配很正常，有些进化亲缘性很近的，只要在同一物种中没有匹配上的问题应该不大！
qPCR溶解曲线TM值
tm>80℃_芙馇叻治隹梢杂美慈范ú煌姆从Σ铮ǚ翘匾煨圆铩?_芙馇?(Dissociation curve)：随温度升高，DNA的双螺旋结构降解程度的曲线。全部DNA双螺旋结构降解一半的温度称为溶解温度（Tm）。不同序列的DNA，Tm值不同。DNA中G－C含量越高，Tm值越高，成正比关系。不排除极度
qPCR溶解曲线TM值
tm>80℃随温度升高，DNA的双螺旋结构降解程度的曲线。全部DNA双螺旋结构降解一半的温度称为溶解温度（Tm）。不同序列的DNA，Tm值不同。DNA中G－C含量越高，Tm值越高，成正比关系。不排除极度偶然的情况：1.两个序列的溶解曲线一样 2.没有目标产物，只有一种非特异产物。
引物设计的引物设计原则
1、引物长度一般为15-30bp，常用的为18-27bp，但不能大于38bp；2、引物GC含量一般为40%-60%，以45-55%为宜，上下游引物GC含量和Tm值要保持接近；3、引物所对应的模板序列的Tm值最好在72℃左右，至少要在55-80℃之间，Tm值曲线以选取72度附近为佳，5'到 3
引物设计的引物设计原则
1、引物长度一般为15-30bp，常用的为18-27bp，但不能大于38bp；2、引物GC含量一般为40%-60%，以45-55%为宜，上下游引物GC含量和Tm值要保持接近；3、引物所对应的模板序列的Tm值最好在72℃左右，至少要在55-80℃之间，Tm值曲线以选取72度附近为佳，5'到 3
引物设计的引物设计原则
1、引物长度一般为15-30bp，常用的为18-27bp，但不能大于38bp；2、引物GC含量一般为40%-60%，以45-55%为宜，上下游引物GC含量和Tm值要保持接近；3、引物所对应的模板序列的Tm值最好在72℃左右，至少要在55-80℃之间，Tm值曲线以选取72度附近为佳，5'到 3
引物设计的引物设计原则
1、长度：15—30bp，其有效长度[Ln=2(G十C)十(A十T)]一般不大于38，否则PCR的最适延伸温度会超过Taq酶的最佳作用温度(74度)，从而降低产物的特异性。2、G十C含量：应在40%一60%之间，PCR扩增中的复性温度一般较Tm值低等于引物的Tm值减去5—10度。引物长度小于20时，
LifeTechnologies推出GlobalFiler(TM)Exp...
全球身份鉴定解决方案领导者 Life Technologies Corporation(美国生命技术公司，NASDAQ: LIFE)今天推出了GlobalFiler™ Express 试剂盒，这种新的 DNA 试剂盒将为全球犯罪实验室进行法医鉴定的方式带来革命性变化 -- 使实验室可以更
DNA的Tm值测定实验
紫外分光光度法 实验方法原理 当DNA 的稀盐溶液加热到80～100 ℃ 时, 双螺旋结构即发生解体, 两条链分开, 形成无规线团。一系列物化性质也发生
什么是TE、TM、TEM－mode
TE叫做横电模，指的是电场方向与传播方向垂直。TM叫做横磁模，指的是磁场方向与传播方向垂直。TE和TM可以合称LP，线性偏振模。TEM叫做横电磁模，指的是电场、磁场方向都和传播方向垂直。
DNA的Tm值测定实验
实验方法原理 当DNA 的稀盐溶液加热到80～100 ℃ 时, 双螺旋结构即发生解体, 两条链分开, 形成无规线团。一系列物化性质也发生改变: 260 nm 区紫外吸收值增高(增色效应) , 粘度降低, 浮力密度降低等。DNA 的变性的特点是爆发式的, 变性作用发生在一个很窄的范围。通常把D
什么是上游引物和下游引物
虽然这个问题很简单，但我怎么发觉挺难回答的......上游引物就是和要扩增基因片断上游序列结合的引物（引物就是单链寡聚核苷酸，基因扩增需要从引物开始），同理，下游引物指与目的基因片断下游序列结合者。具体示意如下：（上下两条长线代表DNA模板）5'-----------------------
快速了解反转录引物随机引物
随机引物是指当特定mRNA由于含有使逆转录酶终止的序列而难于拷贝其全长序列时，可采用随机六聚体这一非特异的引物来拷贝全长mRNA。 1.特异性引物一般在增低丰度目的基因才选择使用，用得比较少。一般都推荐用Oligo(dT)或随机引物代替基因特异性引物。由于rna的二级结构破坏不完全，导致特异性
pcr退火温度是根据什么原则设计？
在模板变性后温度快速冷却至40℃～60℃(某个退火温度 )的时候，可使引物和模板发生结合。由于模板DNA 比引物复杂得多，引物和模板之间的碰撞结合机会远远高于模板互补链之间的碰撞，这就使PCR后期的过程成为可能。退火温度与时间，取决于引物的长度、碱基组成及其浓度，还有靶基序列的长度。对于20个核苷酸