SDSPAGE梯度胶怎么配置

操作步骤( 1 )在制板支架上置一专用有机玻璃槽,将固定好的玻璃板下部插入槽内,中部用两个文具夹固定在支架竖板上。在槽内倒入已充分溶化的琼脂,冷凝后封闭胶腔底部。( 2 )用直径约 2mm 的聚乙烯管连接好梯度混合器、恒流泵、凝胶模。( 3 ) 30% 胶液的配制取 50ml 烧杯一只,加凝胶贮液① 14ml ,水 14ml, 10 过硫酸铵 5 μ l ,减压抽气 10min 。( 4 ) 4% 胶液的配制 取 50ml 烧杯一只,加凝胶贮液② 14ml ,水 14ml, 10% 过硫酸铵 5 μ l ,减压抽气 10min 。( 5 )灌制梯度胶在两胶液中分别加入 TEMED 15 μ l ,摇匀,分别吸取 18ml 胶液于梯度混合器相应的混合杯中。打开磁力搅拌器和梯度混合器开关,接通恒流泵,将梯度混合器中的胶液缓缓输入胶腔中。事先应将输液管出口由胶腔上口中央伸向底部,随着胶腔内液面的升高逐渐提高输液管,使管口始终接近液面而......阅读全文

结构胶怎么清除干净

结构胶清除干净的方法为:用刀刮掉、用香蕉水、用酒精。1、用刀刮掉在操作的时候要小心一些,不要划伤了物品表面。2、用香蕉水将结构胶放入香蕉水中浸泡,一段时间后,可有效地溶解结构胶。3、用酒精将酒精涂抹在结构胶表面,可以将其溶解,最后再用清水洗净即可。结构胶选购注意事项有哪些1、对于这类产品的选择,不仅

什么情况下需要用梯度胶分离

根据沉淀颗粒大小或者说密度,以及你的实验目的来决定。 1、沉淀颗粒大,密度也大,稍微静置就能够自然沉降在容器底部,同时,你的目的也只是简单得将固液进行分离(不回收),那么可以选择倾析法。 2、你的目的是固液分离的同时,收集滤液

1%鲁哥氏怎么配置

商品名:鲁戈氏液 通用名:复方碘溶液 化学成分:本品为复方制剂,其组分为:碘50g碘化钾100g水适量全量1000ml 配置方法: 称取6g碘化钾(KI)溶于少量水中(10-20mL),待其完全溶解后,加入4g碘(I2)充分摇动,待碘完全溶解后定容到100mL即配

COD硫酸汞怎么配置

  硫酸汞(化bai学式HgSO4,式量297),白色晶体du,有毒。密度6470kg/m3。与少量水形成一水物zhi。与大量dao水(特别是在加热情况下)分解形成碱式盐和硫酸。溶于酸,不溶于乙醇。用于制甘汞、升汞和蓄电池组,并用作乙炔水化成乙醛的催化剂等。由汞和浓硫酸,或氧化汞与稀硫酸作用而制得。

COD标准使用液怎么配置

关于COD标准使用液配置方法如下:使用邻苯二甲酸氢钾标准溶液进行配置,由于每克邻苯二甲酸氢钾的理论CODcr值为1.176g,因此将0.4251g邻苯二甲酸氢钾溶解在重蒸馏水中,并将其转移到1000mL容量瓶中,用蒸馏水稀释至刻度,使其成为500mg / L CODcr标准溶液。然后将其稀释至100

温度梯度pcr怎么做

温度梯度pcr一般主要是指退火温度梯度。如果PCR仪支持的话,一次可以做好几个温度梯度,象AIB的可以做六个,而有些公司的是模仿梯度,比如一边高一边低,这样梯度温度可能误差大一点。如果仪器不支持,可能就麻烦了,想做六个温度就得做六次PCR了。每一次设成不同的温度。

走梯度,基线抬高怎么办

你的梯度方法写得不清楚。应该是:保留时间(min) 乙腈比例(%)0 75XXX XXX第一,其实梯度基线波动很正常很正常的。因为你有机相变了,你可以监控一下压力,肯定在流动相变化时压力也变了。所以基线是会有变动的。第二,你的基线波动没有影响到你色谱峰的积分。保留时间1.3min的色谱峰和2.6mi

梯度PCR仪怎么设置温度循环

PCR原理很简单,就是三个步骤的循环么,首先你要在纸上打一个草稿,设计好每个步骤什么温度,运行多久,然后几个循环。然后设置程序的时候,其实就是把你设计的步骤输进去就好了。循环的概念也很简单,就是告诉系统,我想让这三个步骤运行多少遍的意思,SEDI里面内置的是GOTO函数,也就是说,当系统从左到右一步

空气干胶系统-GelAir凝胶干燥器具体配置

空气干胶系统是干燥聚丙烯酰胺和琼脂糖凝胶的选择。将凝胶置于两层玻璃纸之间干燥,取出来的凝胶完全透明且有光泽。干燥的凝胶可理想地用于光密度分析、图像处理、放射自显影、悬挂和长期储存。   GelAir? 空气干胶仪是一个加热的干燥箱,能在 45 分钟   完成小型胶,或在 60 分钟完成 20 x 2

密度梯度仪的特点及配置参数是怎样的

  密度梯度仪利用旋转混合的原理,用于快速制备完全线性的密度梯度介质溶液,能够有效提高样品后续密度梯度离心分离的效果。仪器在马达控制的喇叭状吸头的作用下,实现密度梯度离心后样品分离、检测、收集的自动化。密度梯度离心实验包括梯度制备、离心分离、样品收集三个主要步骤,其中离心分离部分由超速离心机完成。 

浊度仪标准溶液怎么配置

1、DIN/EN 27027 (ISO 7027)方法(欧洲水质浊度、国际标准化组织浊度方法)2、美国环保局EPA 180.1方法3、中欧啤酒酿造技术分析委员会MEBAK方法4、欧洲啤酒酿造业EBC方法5、美国啤酒酿造协会ASBC方法6、啤酒酿造研究院IOB方法以上6种标准方法规定的校准用的标准物质

变性凝胶电泳实验——电解质梯度测序胶

实验方法原理通过简单地提高下槽缓冲液的盐浓度,使凝胶底部的离子強度得以提高,在电泳过程中,盐离子可以电泳进入凝胶并产生重复性好的及有效的梯度。实验材料DNA试剂、试剂盒TBE乙酸钠仪器、耗材电泳仪实验步骤1.  按基本方案步骤1~22灌制凝胶及进行预电泳,但上槽缓冲液为0.5×TBE,下槽为1×TB

变性凝胶电泳实验——缓冲液梯度测序胶

实验方法原理在本实验方案,测序胶底部的缓冲液浓度大于其顶部浓度,使得短寡核苷酸片段(胶底部)的迁移率相对比长寡核苷酸(顶部)的迁移率要慢一些,这洋凝胶可电泳更长的时间而不至于短核苷醆从底部走失并改善了长核苷酸链的分离度。实验材料DNA试剂、试剂盒TEMEDSDSTBE仪器、耗材烧杯电泳仪实验步骤1.

western-blot-2%-的分离胶怎么配

哪里有2%这么低的分离胶哦?浓缩胶4%都是很低的啦,我见过人家跑400kd的蛋白,用的都是8%的分离胶。

western-blot电泳的胶怎么放平?

最近实验室western blot电泳的胶做出来不够平整,仔细思考一下实验步骤,总结有一下几个方面原因供大家参考1)实验用的玻璃板必须洗干净2)过硫酸铵和TEMED的加量不合适,加量较多时,凝胶凝固过快也会胶不平,最多按照分子克隆加倍3)加完试剂以后没有很好的摇匀,导致有些部位的聚合剂浓度过高,聚合

怎样根据蛋白质大小确定SDSPAGE电泳分离胶的浓度

按的是你丙烯酰胺和双丙烯酰胺的总质量与胶总体积的质量体积比(m/v)首先你要将上述药品粉末按照19:1或29:1的比例用水配置成母液(一般为30%,也是m/v)而10%,12%,16%你自然也就知道应该用多少的母液去配制了.相信如何配胶你是知道的.

怎样根据蛋白质大小确定SDSPAGE电泳分离胶的浓度

你可以用12%的胶浓度,如果marker是fermentas家的SDS非预染marker(批号SM0431)的话,可以看到116kd 66.2kd 45kd 35kd 25kd 18.4kd 14.4kd,这样你的目的条带20kd就差不多在整块胶的中间

做WB时SDSPAGE胶凝固后多长时间上样最好

配胶时,建议浓缩胶室温凝固20-30分钟后,再加分离胶,室温凝固2-3小时后再用效果佳,如果当天配完不用,需塑料薄膜手套之类的将其包好,放置 4°冰箱过夜,第二天即用,不建议时间过长使用!

日产300到500吨怎么配置方案?

  日产300-500吨配置方案四   【进料】:≤500mm 【生产能力】:30-50t/h   【装机功率】:112KW 【适用物料】:石灰石   【出料规格】:(1)0-8mm (2)8-15mm (3)15-40mm   【方案优势】:1.投资小2.省电3.能破大料4.配件损耗低

edta滴定中氯化铵怎么配置

要求的是4500ml,是体积数,应该用量筒量取,不应该用天平称量,因为不同温度下蒸馏水的密度不一样,需要换算.如果需要一定质量时,则应用天平称量.

icpms用的冷却水怎么配置

  ICP-MS是一种常用的质谱仪产品,主要由等离子体发生器、雾化室、矩管、四极质谱仪和一个快速通道电子倍增管等部件组成,在多个行业中都有一定的应用。一、开机  1、检查ICP-MS通风是否正常开启,要求稳定运行时的风速值为14。  2、打开氩气、氦气钢瓶,分压调至指定刻度(Ar:0.6~0.7Mp

1000毫摩尔的汞离子怎么配置

1000毫摩尔的汞离子配置:ρ(Hg)=10mg/L汞标准溶液:取汞标准溶液10.0mL置于100mL容量瓶中,用重铬酸钾-硝酸溶液稀释至刻度。ρ(Hg)=1mg/L汞标准溶液。四碘合汞离子的中心原子是汞,配位体是碘,配位数是4殺。汞是唯一一种常温下液态的金属,其原子的构成非常不稳定,容易发生氧化,

双向电泳仪分析中常出现的问题

双向电泳仪的*向是根据蛋白质的等电点不同在固相pH胶中进行等点聚焦,第二向是根据蛋白质的分子量不同在垂直或水平方向进行SDS-PAGE电泳。双向电泳仪分析中常出现的问题如下:一、*向等电聚焦的问题:1、固相pH梯度胶条在靠近电极附近处烧焦。2、电压太低,达不到zui高电压。3、电流为零或很低。4、脲

一维固相-pH-梯度等电聚焦-(IEF-with-IPG)——胶条处理

实验材料胶条实验步骤用于2-DE 时,胶条应该散于重泡胀池(图 3, ld) 中在含 5mol/L 尿素的溶液(或2mol/L 硫脲和 5mol/L 尿素)中泡胀。溶液其成分为 0,5% 到 4% 非离子(NP-40,Triton X-100) 或两性 (CHAPS) 去污剂、 15mmol/LDT

变性条件下的凝胶电泳实验——梯度胶凝胶电泳

实验方法原理在凝胶电泳中使用丙烯酰胺梯度胶比使用线性胶有两大优点。一是在高浓度丙烯酰胺条件下可以增加蛋白质的分子筛作用,从而使低分子量蛋白质形成淸晰的条带。另一是梯度胶可以在块胶内分离分子量范围更大的蛋白质(如 5%~20% 的凝胶可以分离 15 kDa~200 kDa 的蛋白质;而 3%~30%

8KDa蛋白在SDSPAGE电泳时分离胶的浓度该选择多大

聚丙烯酰胺凝胶浓度与蛋白质分离范围的关系:聚丙烯酰胺凝胶浓度/% 蛋白质分离范围/kd5 36—2007.5 24—20010 14—20012.5 14—10015 14—60浓缩胶浓度低;分离胶浓度高于浓缩胶,一般不小于5%。8KD的蛋白质可能就要用Tricine–SDS-PAGE系统,因为浓缩

SDSPAGE蛋白质电泳-配胶缓冲液系统对电泳的影响

在SDS-PAGE不连续电泳中,制胶缓冲液使用的是Tris-HCL缓冲系统,浓缩胶是pH6.7,分离胶pH8.9;而电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中,其pH环境呈弱酸性,因此甘氨酸解离很少,其在电场的作用下,泳动效率低;而CL离子却很高,两者之间形成导电性较低的区带,蛋白分子就介

蛋白电泳胶跑得不好怎么办

是不是发生在从压缩胶要进分离胶的时候?有没有发现“漏样”的现象?就是某一个或几个孔的样品在分离胶和压缩胶交界处漏了,可以看到横向的一条线不管是不是这种情况,我建议你把配胶的buffer换掉,如果还不行,上样缓冲液和lysis buffer都要换

1%琼脂凝胶电泳怎么制胶

操作步骤如下:1.制备1%琼脂糖凝胶(大胶用70ml,小胶用50ml):称取0.7 g(0.5 g)琼脂糖置于锥形瓶中,加入70 ml(50ml)1×TAE,瓶口倒扣小烧杯.微波炉加热煮沸3次至琼脂糖全部融化,摇匀,即成1.0%琼脂糖凝胶液.2.胶板制备:取电泳槽内的有机玻璃内槽(制胶槽)洗干净,晾

配胶时temed加多了怎么办

“TEMED是增速剂,加少了也不会不凝固.关键是AP的使用,AP只是起到引发反应的作用,加入极少量即可,一般是几个微升,千万不要加多,否则凝固速度过快,来不及灌胶就会凝固,即使能来得及灌胶,制出凝胶也是不均匀的.而且AP要在最后加入,如果配胶之后无法及时灌制,就不要加AP了,到灌胶之前再加入AP混匀