SDSPAGE梯度胶怎么配置
操作步骤( 1 )在制板支架上置一专用有机玻璃槽,将固定好的玻璃板下部插入槽内,中部用两个文具夹固定在支架竖板上。在槽内倒入已充分溶化的琼脂,冷凝后封闭胶腔底部。( 2 )用直径约 2mm 的聚乙烯管连接好梯度混合器、恒流泵、凝胶模。( 3 ) 30% 胶液的配制取 50ml 烧杯一只,加凝胶贮液① 14ml ,水 14ml, 10 过硫酸铵 5 μ l ,减压抽气 10min 。( 4 ) 4% 胶液的配制 取 50ml 烧杯一只,加凝胶贮液② 14ml ,水 14ml, 10% 过硫酸铵 5 μ l ,减压抽气 10min 。( 5 )灌制梯度胶在两胶液中分别加入 TEMED 15 μ l ,摇匀,分别吸取 18ml 胶液于梯度混合器相应的混合杯中。打开磁力搅拌器和梯度混合器开关,接通恒流泵,将梯度混合器中的胶液缓缓输入胶腔中。事先应将输液管出口由胶腔上口中央伸向底部,随着胶腔内液面的升高逐渐提高输液管,使管口始终接近液面而......阅读全文
SDSPAGE梯度胶怎么配置
操作步骤( 1 )在制板支架上置一专用有机玻璃槽,将固定好的玻璃板下部插入槽内,中部用两个文具夹固定在支架竖板上。在槽内倒入已充分溶化的琼脂,冷凝后封闭胶腔底部。( 2 )用直径约 2mm 的聚乙烯管连接好梯度混合器、恒流泵、凝胶模。( 3 ) 30% 胶液的配制取 50ml 烧杯一只,加凝胶贮液①
如何配制sdspage梯度胶
操作步骤( 1 )在制板支架上置一专用有机玻璃槽,将固定好的玻璃板下部插入槽内,中部用两个文具夹固定在支架竖板上。在槽内倒入已充分溶化的琼脂,冷凝后封闭胶腔底部。( 2 )用直径约 2mm 的聚乙烯管连接好梯度混合器、恒流泵、凝胶模。( 3 ) 30% 胶液的配制取 50ml 烧杯一只,加凝胶贮液①
怎么配置1%琼脂糖胶
1、制备1%琼脂糖凝胶(大胶用70ml,小胶用50ml):称取0.7 g(0.5 g)琼脂糖置于锥形瓶中,加入70 ml(50ml)1×TAE,瓶口倒扣小烧杯.微波炉加热煮沸3次至琼脂糖全部融化,摇匀,即成1.0%琼脂糖凝胶液。2、胶板制备:取电泳槽内的有机玻璃内槽(制胶槽)洗干净,晾干,放入制胶玻
怎么配置1%琼脂糖胶
1、制备1%琼脂糖凝胶(大胶用70ml,小胶用50ml):称取0.7 g(0.5 g)琼脂糖置于锥形瓶中,加入70 ml(50ml)1×TAE,瓶口倒扣小烧杯.微波炉加热煮沸3次至琼脂糖全部融化,摇匀,即成1.0%琼脂糖凝胶液。2、胶板制备:取电泳槽内的有机玻璃内槽(制胶槽)洗干净,晾干,放入制胶玻
SDSPAGE胶制备
一. 实验原理: SDS-PAGE是对蛋白质进行量化,比较及特性鉴定的一种经济、快速、而且可重复的方法。该法是依据混合蛋白的分子量不同来进行分离的。 SDS是一种去垢剂,可与蛋白质的疏水部分相结合,破坏其折叠结构,并使其广泛存在于一个广泛均一的溶液中。SDS蛋白质复合物的长度与其分子量成正比。在样
SDSPAGE胶的干燥
凝胶干燥时遇到的主要问题是凝胶的变形和破裂。将凝胶放在Whatman 3MM滤纸上可防止干燥凝胶变形,但凝胶是否破裂取决于凝胶的厚度和干燥器的质量,因此,应尽量使用薄胶并使凝胶干燥器处于良好状态,使其真空压力波动极少。(1)试剂与配制:固定液:冰醋酸:甲醇:水(10:20:70)(2)电泳后的凝胶用
SDSPAGE胶的干燥方法
凝胶干燥时遇到的主要问题是凝胶的变形和破裂。将凝胶放在Whatman 3MM滤纸上可防止干燥凝胶变形,但凝胶是否破裂取决于凝胶的厚度和干燥器的质量,因此,应尽量使用薄胶并使凝胶干燥器处于良好状态,使其真空压力波动极少。(1)试剂与配制:固定液:冰醋酸:甲醇:水(10:20:70)(2)电泳后的凝胶用
电泳跑胶SDSPAGE的定义
SDS-PAGE即聚丙烯酰氨凝胶电泳详细资料如下:聚丙烯酰胺凝胶电泳是网状结构,具有分子筛效应,它有两种形式,一种是非变性聚丙烯酰胺凝胶,蛋白质在电泳中保持完整的状态,蛋白在其中依三种因素分开:蛋白大小,形状和电荷。而SDS-PAGE仅根据蛋白分子量亚基的不同而分离蛋白。这个技术首先是1967年由s
电泳跑胶SDSPAGE的定义
聚丙烯酰胺凝胶电泳是网状结构,具有分子筛效应,它有两种形式,一种是非变性聚丙烯酰胺凝胶,蛋白质在电泳中保持完整的状态,蛋白在其中依三种因素分开:蛋白大小,形状和电荷。而SDS-PAGE仅根据蛋白分子量亚基的不同而分离蛋白。这个技术首先是1967年由shapiro建立,他们发现在样品介质和丙烯酰胺凝胶
SDSPAGE凝胶-自配?配胶试剂盒?预制胶?
蛋白质印迹的发明者一般认为是美国斯坦福大学的乔治·斯塔克(George Stark)。在尼尔·伯奈特(Neal Burnette)于1981年所著的《分析生物化学》(Analytical Biochemistry)中首次被称为Western Blot。蛋白免疫印迹( Western Blot)
SDSPAGE蛋白电泳配胶不凝固
我分析原因是过硫酸胺失效,过硫酸氨最好是先用现配,如果怕麻烦而且跑胶的频率很高的话,那么用完之后ap要放在4℃保存,一周之后必须新配。另外可以适当的增加temed的量,从5μl提高到8μl并无大碍。如你所说,是不是就是ap失效呢,还有,我强烈建议你复查一边浓缩胶,分离胶各各buffer的组分是否配制
配制电解质梯度胶实验
试剂、试剂盒 本方法包括方案 8 中所有物品加上: 甲酰胺(100%)离子梯度胶醋酸钠实验步骤 材料本方法包括方案 8 中所有物品,加上:甲酰胺(100%)离子梯度胶用 1XTBE 配制,有无甲酰胺均可。关于含甲酰胺的聚丙烯酰胺凝胶,请见方案 9。醋酸钠(3mol/L,PH7.0)方法1. 依方案
配制电解质梯度胶实验
试剂、试剂盒 本方法包括方案 8 中所有物品 加上: 甲酰胺(100%) 离子梯度胶 醋酸钠 实验步骤
配制电解质梯度胶实验
Sheen 和 Seed(1980) 创造了一种既聪明又简单的改进方法,利用顶部和底部不同浓度的电泳缓冲液在胶中产生离子梯度,而胶本身的浓度是一定的。利用此法,从单块凝胶上可以读取的核苷酸总数可增加约 30%。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。
dna胶怎么配
就是琼脂糖凝胶,要是分子量大的DNA就配1%的胶,就是取1g琼脂糖+100ml的TAE缓冲液,微波炉高火加热至沸腾(沸腾2-3次),降温到50℃左右时加入EB,混匀后倒入制胶架中,一小时以后就可以使用了。琼脂糖凝胶是以琼脂糖为支持介质制备的凝胶。琼脂糖分为一般琼脂糖和经化学修饰后熔点降低的低熔点琼脂
咪唑溶液怎么配置
配置的时候你可以直接使用一个水,然后加点点盐或者加点点溶液,这样的话搅拌在一起就可以了,非常的简单。
梯度洗脱装置怎么分类
梯度洗脱装置分为两类:一类是外梯度装置(又称低压梯度),流动相在常温常压下混合,用高压泵压至柱系统,仅需一台泵即可。另一类是内梯度装置(又称高压梯度),将两种溶剂分别用泵增压后,按电器部件设置的程序,注入梯度混合室混合,再输至柱系统。
梯度PCR怎么做
温度梯度不是均匀分布,应该是两边变化慢,中间变化快,你可以设好梯度后查看一下。然后选5个接近的温度对应放置5个反应管
蛋白质SDSPAGE电泳分离胶和浓缩胶的浓度如何确定
1,看目的蛋白的大小一般actin以下的可以跑12胶红线左右可以用12或10跑几百的很大的用6的胶小蛋白12的10的一般都能跑如果不考虑效率的话...能跑多慢跑多慢,越慢跑的越好看2,看样品浓度多少,以及你想用几次通常我们是定到4微每微,总量100微,用10次如果浓度小的话定到2用5次
原子荧光测试项目配置浓度梯度
原子荧光测试项目配置浓度梯度 汞 Hg (标贮液1mg/ml标准液0.01ug/ml)还原剂配制0.5% 氢氧化钾(稳定剂)+2%硼氢化钾(先称取KOH放入水中,待溶解后加入称好的KBH4)。注:先后顺序不能颠倒) 载流液配制 5% HCL (量取50ml定容到1000ml)。
sdspage蛋白条带怎么分析
bandscan比较专业哦,可以用的。1.因为其他地方也有一定的灰度,所以条带所在区域灰度之和会小于100%。归一化嘛,就是把这四个值乘以一个系数,使它们之和等于100%就是了。2.这四个条带是斜的,分析起来很麻烦,要作较正的。普通的分析软件不知有没有这个校正功能。即使有,作起来也麻烦。
sdspage蛋白条带怎么分析
bandscan比较专业哦,可以用的。1.因为其他地方也有一定的灰度,所以条带所在区域灰度之和会小于100%。归一化嘛,就是把这四个值乘以一个系数,使它们之和等于100%就是了。2.这四个条带是斜的,分析起来很麻烦,要作较正的。普通的分析软件不知有没有这个校正功能。即使有,作起来也麻烦。
sdspage凝胶电泳怎么制备
SDS-PAGE电泳可用于分离蛋白质和核苷酸,这里综述了SDS-PAGE实验原理、试剂和器材、以及实验操作步骤。一.实验原理:SDS-PAGE是对蛋白质进行量化,比较及特性鉴定的一种经济、快速、而且可重复的方法。该法是依据混合蛋白的分子量不同来进行分离的。SDS是一种去垢剂,可与蛋白质的疏水部分相结
培养基怎么配置
(1)配制母液。把培养基m的必需元素按原配方量的50倍/100倍或1000倍称量后制成一种浓溶液,这种浓溶液叫母液在配制培养基时按比例分别量取母液稀释到所需的浓度即可母液配好后贴上标签,放在0~4℃的冰箱中可使用半年到1年,这样傲可节省许多时间可能产生化学反应的或溶解后产生沉淀的不能放在同一个容器m
怎么配置总磷标线
水中总磷标准曲线浓度(ppm)吸光度分别: 一般的标准曲线的做法是配置已知被测物浓度的标准物质5个或更多,用欲使用的测量方法,比如现在测P,(不知道你用什么方法,化学反应称重或者滴定什么的,反正就是你测未知物的方法),得到实验值,建立与已知关系(比如重量或者滴定体积等)的方程,即得到标准曲线。
培养基怎么配置
(1)配制母液。把培养基m的必需元素按原配方量的50倍/100倍或1000倍称量后制成一种浓溶液,这种浓溶液叫母液在配制培养基时按比例分别量取母液稀释到所需的浓度即可母液配好后贴上标签,放在0~4℃的冰箱中可使用半年到1年,这样傲可节省许多时间可能产生化学反应的或溶解后产生沉淀的不能放在同一个容器m
固相pH梯度等电聚焦实验——制胶
实验方法原理固相 pH 梯度凝胶是由固相 pH 梯度介质(丙烯酰胺衍生物)共价结合到聚丙烯酰胺凝胶中并形成 pH 梯度,所以制胶过程比载体两性电解质凝胶复杂。灌胶的方法与常规聚丙烯酰胺梯度凝胶和 SDS 梯度凝胶相似。高质量的凝胶介质和固相 pH 梯度介质,聚合过程以及漂洗对固相 pH 梯度凝胶是非
PCR-温度梯度怎么设
一般是设退火温度,在你做的PCR的温度上下加减2度,
电泳浓缩胶浓度怎么选取
1,看目的蛋白的大小 一般actin以下的可以跑12胶 红线左右可以用12或10跑 几百的很大的用6的胶 小蛋白12的10的一般都能跑 如果不考虑效率的话...能跑多慢跑多慢,越慢跑的越好看 2,看样品浓度多少,以及你想用几次 通常我们是定到4微每微,总量10...5919
请问胶头滴管怎么保存?
化学实验用的橡胶管、胶头滴管上的胶头放久了会粘在一起,破损甚至变得很粘稠,处理不掉,只能扔掉。有什么好的保存方法不使其变质吗? 硬化后可以泡在稀释后的盐酸里过一会儿就能软化,一定注意要稀释,要不容易漏...平时保存时要避免阳光长时间直射,实验使用后需要清理干净凉干后保存。