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temed打翻了怎么办

通常情况下,实验室常用的生物、化学试剂都带有一定的毒性,从职业健康角度来讲,大家在实验操作过程中应注意做好防护措施,以免危害人身安全。身体是革命的本钱,老拿生命做实验,实在不值得!来了解一下,生物、化学实验室中常用到的一些有毒物质吧!1. DNA电泳与溴化乙锭“DNA的琼脂糖凝胶电泳”是生物化学实验必开的基础型实验。“质粒DNA的分离、纯化和鉴定”在很多学校也是必开的综合性实验。1也。。这些涉及到DNA的提纯及鉴定的实验都会用到高度灵敏的荧光染色剂溴化乙锭(Ethidium bromide,EB)对DNA进行染色。EB是强诱变剂,具有高致癌性,会在60~70 cc蒸发,所以在学生实验中要特别注意其安全使用,严禁随便丢弃。在实验中使用及实验结束后处理应注意以下事项。使用中注意事项实验室涉及到EB的操作应统一固定在实验室的某一角落,称量固体时要带面罩和手套,使用含有EB的溶液务必带上手套。同时要告诉学生不要在胶太热的时候加EB,以防......阅读全文

蛋白质电泳技术

Serum Protein Electrophoresis Tricine/Polyacrylamide Gel ElectrophoresisUsed for pilin processing analysis but generally useful for resolution of

蛋白质的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳实验

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳技术首先在1967年由Shapiro建立,1969年由weber和Osborn进一步完善。主要用于(1)蛋白质的分离(2)蛋白质的纯化。实验方法原理蛋白质在十二烷基硫酸钠(SDS)和巯基乙醇的作用下,分子中的二硫键还原,氢键等打开,形成按1.4 g SDS/1 g蛋白质比例的

前剪接体和剪接体的分离及分析实验

剪接体是由 RNA 和蛋白质构成的核糖核蛋白体(RNP),它在前体 mRNA 的剪接过程中可去除前体 mRNA 的内含子。snRNP 是由 snRNA 及其结合蛋白组成,在前体 mRNA 的剪接过程起着重要作用。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编:郑晓飞。实验方法原理剪接体是由 RNA 和蛋白质

同功酶遗传标记分析

实验概要1. 掌握聚丙烯酰胺凝胶电泳技术 2. 同工酶遗传标记的分析实验原理同工酶是一类由具有不同分子结构和大小但具有相同催化功能的酶,其分子的多种形式是由基因决定的,即基因表达的直接产物。由同一基因座的不同等位基因编码的各种同工酶又称为等位酶,它们从分子水平上反映了等位基因的相对差异。因

鉴定分析植物蛋白复合物的蓝绿非变性凝胶电泳实验

试剂、试剂盒 十二烷基 β-D-麦芽糖苷增溶液TritonX-100 增溶液洋地黄阜苷增溶液考马斯亮蓝染色液丙烯酰胺溶液BN 凝胶缓冲液实验步骤 3.1 BN-PAGE 样品的制备所有样品制备步骤必须在 4°C 下操作,在开始制备样品前(见 26.3.1 节 1 和 26. 3.1 节 2

前剪接体和剪接体的分离及分析实验

实验方法原理 剪接体是由 RNA 和蛋白质构成的核糖核蛋白体(RNP),它在前体 mRNA 的剪接过程中可去除前体 mRNA 的内含子。snRNP 是由 snRNA 及其结合蛋白组成,在前体 mRNA 的剪接过程起着重要作用。实验材料 PIP 10 载体核苷酸焦磷酸酶RNasinT7 RNA 聚合酶

蛋白质SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳-2

(4)10% 过硫酸铵,5ml(0.5g过硫酸铵, 加5ml蒸馏水, 新鲜配置),-20℃保存一个月左右。(5)10% (w/v)SDS,10g SDS加蒸馏水100ml, 室温保存。(6)10% TEMED 0.1ml TEMED , 加0.9 ml蒸馏水。(7) 2×上样缓冲液(10ml):0.

Western Blot操作步骤

  背景:   蛋白质印迹的发明者是斯坦福大学George Stark。Neal Burnette于1981年所著的AnalyticalBiochemistry中首次被称为Western Blot。最开始做印迹的是一个叫Southern的科学家,但印迹的对象是DNA链,他把这种技术称为Southe

Western Blot操作步骤

背景:   蛋白质印迹的发明者是斯坦福大学George Stark。Neal Burnette于1981年所著的AnalyticalBiochemistry中首次被称为Western Blot。最开始做印迹的是一个叫Southern的科学家,但印迹的对象是DNA链,他把这种技术

变性聚丙烯酰胺凝胶的制备实验

测序中,4 个系列的 DNA 片段在变性的条件下在一个薄的聚丙烯酰胺凝胶上进行电泳分析。本方案介绍了制备均一缓冲液和丙烯酰胺浓度胶的方法。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。试剂、试剂盒丙烯酰胺溶液过硫酸铵水溶液去离子水去污剂乙醇KOH 甲醇溶

Western blot 标准操作规程(SOP)

关键词:western blot 聚丙烯酰胺 分离胶 积层胶 电泳目的:蛋白质的检测与分析【原理】一个基因表达终极结果是产生相应的蛋白质(或酶)。因此检测蛋白质是测定基因表达的主要标志,检测蛋白质的方法很多,除ELISA法外,也可用与检测DNA和RNA相类似的吸印方法。前两法有“南”和“北”之意,故

蛋白质的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳实验

SDS-PSGE             实验方法原理 蛋白质在十二烷基硫酸钠(SDS)和巯基乙醇的作用下,分子中的二硫

单链构象多态性和异源双链分析方法检测突变实验

险测突变的目的主要是为弄懂人类遗传性疾病的分子机制,以便有效的针对这些疾病进行预防、诊断和治疗,但更多的是用于分析不同生物体基因型与表型之间的关联。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。试剂、试剂盒扩增缓冲液dNTP 混合溶液甲酰胺上样缓冲液蔗糖

鉴定分析植物蛋白复合物的蓝绿非变性凝胶电泳实验

试剂、试剂盒:十二烷基 β-D-麦芽糖苷增溶液                                    

鉴定分析植物蛋白复合物的蓝绿非变性凝胶电泳实验

试剂、试剂盒十二烷基 β-D-麦芽糖苷增溶液TritonX-100 增溶液洋地黄阜苷增溶液考马斯亮蓝染色液丙烯酰胺溶液BN 凝胶缓冲液实验步骤3.1 BN-PAGE 样品的制备所有样品制备步骤必须在 4°C 下操作,在开始制备样品前(见 26.3.1 节 1 和 26. 3.1 节 2) ,要制备好

Western Blot操作步骤(一)

背景:蛋白质印迹的发明者是斯坦福大学George Stark。Neal Burnette于1981年所著的AnalyticalBiochemistry中首次被称为Western Blot。最开始做印迹的是一个叫Southern的科学家,但印迹的对象是DNA链,他把这种技术称为Southern

前剪接体和剪接体的分离及分析实验

            实验方法原理 剪接体是由 RNA 和蛋白质构成的核糖核蛋白体(RNP),它在前体 mRNA 的剪接过程中可去除前体 mRNA 的内含子。snRNP 是由 snRNA 及其结合蛋白组成

WB操作规程

一、设备和试剂1.设备① 电泳电源Mini-PROTEAN 3 Elecreophoresis Cell,Mini Teans-Blot Module,and PowerPac Basic Power Supply (BIO-RAD,Catalog#165-3323)② 电泳仪及附件Mini-PRO

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测外源蛋白的表达

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测外源蛋白的表达             实验方法原理 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—P

变性聚丙烯酰胺凝胶的制备实验

            试剂、试剂盒 丙烯酰胺溶液 过硫酸铵水溶液 去离子水 去污剂 乙醇 KOH 甲醇溶

聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳分离血清蛋白

掌握一种聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质的方法,并用此法进一步分析血清蛋白的组成。1、聚丙烯酰胺凝胶聚丙烯酰胺是由丙烯酰胺(Acr)、NN′-甲叉双丙烯酰胺(Bis),在催化剂过硫酸铵[ammonium persulfate (NH4)2S2O8 简称AP)或核黄素(ribofavin 即vit

SDS-PAGE常见问题分析

  1. 配胶缓冲液系统对电泳的影响?   在SDS-PAGE不连续电泳中,制胶缓冲液使用的是Tris-HCL缓冲系统,浓缩胶是pH6.7,分离胶pH8.9;而电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中,其pH环境呈弱酸性,因此甘氨酸解离很少,其在电场的作用下,泳动效率低;而CL离子却很

知识分享:SDS-PAGE的配制及电泳

  实验原理   SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳技术首先在1967年由Shapir0建立,其原理:聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺(简称Acr)和交联剂N,N’一亚甲基双丙烯酰胺(简称Bis)在催化剂过硫酸铵(APS),N,N,N’,N’四甲基乙二胺(TEMED)作用下,聚合交联形成的具有网状立体结构的凝胶,

凝胶迁移实验(EMSA)——凝胶迁移

凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA)可以:(1)研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用;(2)可用于DNA定性和定量分析;(3)用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。实验方法原理一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术最初

分子生物学常用实验技术(page 3)

分子杂交技术    互补的核苷酸序列通过Walson-Crick 碱基配对形成稳定的杂合双链分子DNA 分子的过程称为杂交。杂交过程是高度特异性的,可以根据所使用的探针已知序列进行特异性的靶序列检测。杂交的双方是所使用探针和要检测的核酸。该检测对象可以是克隆化的基因组DNA,也可以是细胞总DN

聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳分离血清蛋白(serum proteins)-1

目的与原理] 掌握一种聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质的方法,并用此法进一步分析血清蛋白的组成。 1、聚丙烯酰胺凝胶 聚丙烯酰胺是由丙烯酰胺(Acr)、NN′—甲叉双丙烯酰胺(Bis),在催化剂过硫酸铵(ammonium persulfate  (NH4)2S2O8 简称AP)或核黄素(rib

聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis,PAGE)

配制 Tris- 甘氨酸 SDS-PAGE 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离胶所用溶液   溶液成分 不同体积( ml )凝胶液中各成分所需体积( ml ) 5 10 15 20 25 30

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测外源蛋白的表达

实验方法原理SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)是蛋白分析中最经常使用的一种方法。它是将蛋白样品同离子型去垢剂十二烷基硫酸钠(SDS)以及巯基乙醇一起加热,使蛋白变性,多肽链内部的和肽链之间的二硫键被还原,肽链被打开。打开的肽链靠疏水作用与SDS结合而带负电荷,电泳时在电场作用下,肽链在凝

单链构象多态性和异源双链分析方法检测突变实验

            试剂、试剂盒 扩增缓冲液 dNTP 混合溶液 甲酰胺上样缓冲液 蔗糖凝胶缓冲液 TBE 电泳缓冲液

蛋白质的表达、分离、纯化和鉴定(2)

二、氯霉素酰基转移酶重组蛋白的分离,纯化 1. NTA层析柱的准备:在层析柱中加入1mL NTA介质,并分别用8mL 去离子水,8mL上样缓冲液洗涤。 2. 重组蛋白的变性裂解:在冰浴中冻融菌体沉淀,加入5mL上样缓冲液, 用吸管抽吸重悬,超声波破裂菌体,用振荡器等轻