蛋白质组实验全套流程方案2
聚丙烯酰胺凝胶的配制表1 配制Tris-甘氨酸SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳分离胶所用溶液溶液成分不同体积（ml）凝胶液中各成分所需体积（ml）5101520253040506% 水2.65.37.910.613.215.921.226.5 30%丙烯酰胺溶液123456810 1.5 mol/L Tris (pH8.8)1.32.53.856.37.51012.5 10% SDS0.050.10.150.20.250.30.40.5 10%过硫酸氨0.050.10.150.20.250.30.40.5 TEMED0.0040.0080.0120.0160.020.0240.0320.048% 水2.34.66.99.311.513.918.523.2&nbs......阅读全文
蛋白质组实验全套流程方案2
聚丙烯酰胺凝胶的配制表1 配制Tris-甘氨酸SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳分离胶所用溶液溶液成分不同体积（ml）凝胶液中各成分所需体积（ml）5101520253040506% 水2.65.37.910.613.215.921.226.5 30%丙烯酰胺溶液123456810 1.
蛋白质组实验全套流程方案1
蛋白质组实验流程双向电泳的样品的制备样品制备原则样品制备是双向电泳中最关键的一步，将直接影响2-DE结果好坏。目前并没有一个通用的样品制备方法，尽管处理方法多种多样，但都遵循几个基本的原则：1）尽可能的提高样品蛋白的溶解度，抽提最大量的总蛋白，减少蛋白质的损失；2）减少对蛋白质的人为修饰；3）破坏
cDNA文库组标准流程2
(二)动物组织totalRNA的提取 1．根据表1选择适当的组织量和相应的变性裂解液量，将变性裂解液分装到RNase-free的50ml无菌离心管中，冰浴5分钟。 2．将组织样品放入变性裂解液中，在高速下匀浆15-30秒/次，直到看不见组织和细胞碎片。 3．根据表1加入适量2M的乙酸钠（pH4.0）
年末机床全套保养方案
1.切断电源 保养时，必须切断电源，然后进行工作，以确保操作安全。 2.清理工作位置 清理工作区域，确保清洁过程中有整洁和足够的空间 3.拆下并清洗机床各罩壳 保持内外清洁，无锈蚀，无油污。【金属加工微信，内容不错，值得关注】 4.刀架和滑板部分的保养
全套抗体标记工具全套抗体和蛋白质标记试剂盒的使用2
方便的设计以取得最大的效果： ReadiLink™快速抗体标记试剂盒利用胺反应性标记来制备共价标记的结合物。这些反应性标记选择性地靶向并结合至目标抗体上的伯胺（例如赖氨酸残基）。要标记您的抗体，只需将您的抗体溶液（浓度约1 mg / mL）与ReadiLink™
酶联免疫吸附实验（ELISA）－全套解决方案
基本原理 1971年Engvall和Perlmann发表了酶联免疫吸附剂测定（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）用于IgG定量测定的文章，使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法。这一方法的基本原理是：①使抗原或抗
代谢组学全流程解决方案
赛默飞基于其超高分辨的静电场轨道阱（Orbitrap）质谱平台结合其功能强大的软件平台，提供代谢组学全流程解决方案。该方案不仅覆盖从极性代谢物到非极性代谢物的全面检测、峰提取与定量、统计学分析与可视化作图、代谢产物的全面鉴定、代谢通路分析等全流程的要求，而且还整合了从非靶标生物标记物发现到靶标生物标
蛋白质组学鉴定技术流程
蛋白质组（Proteome）的概念，蕞早由澳大利亚Macquarie大学的Wilkins和Williams于1994年首先提出的，是指一个基因组（Genome），或一个细胞、组织表达的所有蛋白质。蛋白质组学（Proteomics）以细胞、组织或生物体全体蛋白质为研究对象，通过高通量的色谱质谱联用技术
iTRAQ蛋白质组学研究原理、优势及实验流程（一）
大家好，我是黄博，吉凯一小兵，蛋白质组学实验狗。今天的故事是一个作文从没及格过的闷骚理科男（我一直是这么定位自己的）是如何被陈博内个大尾巴狼生生逼来写文章的故事，真的是有血、有泪、有shi！情节需要，中间可能会穿插一些技术方面的内容，请各位自动忽略。那是一个月黑风高的晚上，本人和大尾巴狼（我实在不想
iTRAQ蛋白质组学研究原理、优势及实验流程（二）
“那iTRAQ的原理是什么，有哪些优势？”“iTRAQ（Isobaric Tags for Relative and Absolute Quantitation）技术由美国AB SCIEX公司研发，最早于2004年美国质谱年会上被提出，是一种基于体外等重同位素标记的相对定量技术。该技术利用同
iTRAQ蛋白质组学研究原理、优势及实验流程介绍
大家好，我是黄博，吉凯一小兵，蛋白质组学实验狗。今天的故事是一个作文从没及格过的闷骚理科男（我一直是这么定位自己的）是如何被陈博内个大尾巴狼生生逼来写文章的故事，真的是有血、有泪、有shi！情节需要，中间可能会穿插一些技术方面的内容，请各位自动忽略。 那是一个月黑风高的晚上，本人和大尾巴狼
蛋白质组与蛋白质组学简介2
3 甲基化干扰实验用来检测蛋白质的结合位点。甲基化修饰的DNA探针可以干扰蛋白质的结合。结合位点上未被修饰的DNA片段才能与蛋白结合，然后将DNA从被修饰的碱基处切割，电泳分离，结合蛋白的DNA在结合位点上不能被修饰，不能切断，可确定结合位点的位置。 4 Dnase I 足纹分析 蛋白
北京胃癌蛋白质组全套检测时间缩短至1天
胃癌是我国高发的恶性肿瘤之一，晚期胃癌患者五年生存率不足5%。临床上治疗胃癌的一线用药多为广谱抗癌药，造成化疗毒副作用大、疗效不明显。2013年，北京市科委在“生命科学领域前沿技术培育”专项中设立“基于蛋白质组学的胃癌个体化治疗技术研究”课题，日前取得了重要进展，胃癌蛋白质组全套检测时间缩短至1
Thermo－Fisher收购蛋白质组学工作流程解决方案供应商Proxeon
服务科学、世界领先的赛默飞世尔科技，今天宣布收购了Proxeon A/S—一家总部位于丹麦欧登塞的创新蛋型白质组学分析产品的供应商。该公司被公认可提供简化蛋白质组学工作流程，包括纳升液相色谱系统、色谱柱、离子源和生物信息学软件等，以满足复杂的蛋白质组学应用中对耐用型高灵敏液相色谱/
酵母实验操作方案（2)
附录一 培养基 LB： Tryptone 10g 1% Yeast Extract 5g 0.5% NaCl 5g 0.5% 【Agar】 15g 1.5%（固体培养基另加） dH2O稀释至1L，高压灭菌 YPD： Yeast Extract 10g 1%
植物蛋白质组学和糖基化实验2
3. 糖基释放后的蛋白质分析1 ) 糖基释放的化学处理方法还原性氨化反可应选择性的解离糖蛋白上的 O-糖苷（见注释 10) 。去糖基化的蛋白用 1D SDS-PAGE 分析，将其迁移情况与其糖基化形式的蛋白进行比较，电泳迁移率的增加是 O-连糖苷出现在蛋白上的证据（见注释 11)。( 1 ) 将 1
蛋白质组样品制备程序2
2）在4℃条件下以20000g的离心力冷冻离心60分钟 （离心力务必达到或大于20000g）。3）移取上清溶液。若上清样品不立即使用，则须储存于-80℃（最佳条件）或-20℃的无霜冰箱中以防止蛋白质的降解。2、用初始缓冲液（Start buffer）交换处理细胞裂解液1）在上述细胞裂解液中，加入初始
2DE－蛋白质组学的－PROTICdb－数据库实验
仪器、耗材DBMS实验步骤3.1 PROTICdb 概述在输入或浏览数据时，每个最终用户需要一个 PROTICdb 账户（由您的管理员创建 ) 。作为一个新用户，首先要创建一个新的项目。一旦建立，该项目就属于这个用户，这个用户有权授予其他用户访问权限。为确保数据一致性的精确度，尽量不要用手动输入操作
2DE－蛋白质组学的－PROTICdb－数据库实验
实验步骤：3.1 PROTICdb 概述在输入或浏览数据时，每个最终用户需要一个 PROTICdb 账户（由您的管理员创建 ) 。作为一个新用户，首先要创建一个新的项目。一旦建立，该项目就属于这个用户，这个用户有权授予其他用户访问权限。为确保数据一致性的精确度，尽量不要用手动输入操作。因此，
免疫组化双染实验流程
一、脱蜡和水化方法同SP法。二、第一抗体的染色1、将切片浸在3%H2O2甲醇溶液（新鲜配制）中10 min，PBS冲洗3 min×3次；2、加100 ul（2滴）血清封闭溶液（试剂1）到切片上，室温孵育10 min，倒掉（不能冲洗）；3、加入一抗（按照说明书推荐浓度和孵育条件）；4、使用含有0.05
百灵威海面溢油检测全套方案
随着海洋经济的不断发展，海洋溢油事件也频频发生。海洋溢油具有突发性、偶然性和瞬时性，且危害极大，因此被称为海洋生态环境的超级杀手。我国为应对溢油事故频发，建立了海面溢油鉴别系统规范，HY 043-1997。 该标准首先进行可疑溢油源样品的筛选，采用荧光光谱法或红外光谱法作为可选方法进行初步筛选
方案10－定量蛋白质组学的体内蛋白质同位素标记实验
实验材料酿酒酵母试剂、试剂盒丙酮乙腈NH4HCO3细胞生长培养基干冰冰水2-巯基乙醇甲醇铁氰化钾蛋白提取试剂组合蛋白酶抑制剂硫代硫酸钠仪器、耗材离心蒸发仪离心管血细胞计数器孵育器MALDI- TOF 质谱仪和 LC-MS MS 系统超声波破碎仪分光光度计实验步骤一、培养细胞二、提取蛋白的细胞准备三、
1000平米组培室全套组培仪器设备
1000平米组培室全套组培仪器设备 文章链接：仪器设备网 https://www.instrumentsinfo.com/technology/show-1265.html
2DE－蛋白质组学的－PROTICdb－数据库实验（二）
4. 梅拉尼生成的输出文件的上传( 1 ) 由梅拉尼软件生成一个检测报告，并把它输出到一制表分隔的文本格式文件 ( 见注释 9)。 文件扩展名为 “ txt. ” 。 本演示中，使用 PROTICdb Demo, zip 中的 detections /DV02121001. txt 文件
2DE－蛋白质组学的－PROTICdb－数据库实验（三）
2. 质谱鉴定命令单个蛋白质点可能被命名为几个名称或代码，如检测点数、匹配数、采集数等。因此，用一个质谱图去关联一个适当的蛋白点没有多大意义。为了避免错误， PROTICdb 的工作流程之一是生成一个携带单一的，送去做质谱鉴定的蛋白点质谱仪 ID 的文件 ( 相当于一个命令)。质谱仪就可以将
2DE－蛋白质组学的－PROTICdb－数据库实验（六）
( 18 ) 当移动鼠标到两个链接的蛋白点之一上时，与这个点链接的每个点的十字标记的颜色都变成橙色 （在另一块胶上有一个匹配的蛋白点）。当鼠标点到这些点中的一个时，只有包括在同一个网络中的点显示橙色（ 图 23-12)。你可以通过声明一个新的关系，确认这些数据，这样就可以扩大点的网络。( 1
2DE－蛋白质组学的－PROTICdb－数据库实验（一）
仪器、耗材 DBMS实验步骤 3.1 PROTICdb 概述在输入或浏览数据时，每个最终用户需要一个 PROTICdb 账户（由您的管理员创建 ) 。作为一个新用户，首先要创建一个新的项目。一旦建立，该项目就属于这个用户，这个用户有权授予其他用户访问权限。为确保数据一致性的精确度，尽量不要用手动
2DE－蛋白质组学的－PROTICdb－数据库实验（四）
4. 质谱鉴定报告文件上传PROTICdb 兼容以制表分隔的文本格式输出的 Sequest 鉴定报告（见注释 13) 。( 1 ) 为演示，访问 http: //location 一 of/your/proticdb/home/demo. php。点击 “formto obtain the
2DE－蛋白质组学的－PROTICdb－数据库实验（五）
( 10 ) 鼠标左键点击同一个点（342 号）（见注释 20) ，激活蛋白点信息框。蛋白点的数据按以下 4 个条目排列：概要、关系、鉴定和量化。每个条目对应的信息可被不断充实。其中鉴定包括质谱的详细数据。( 11 ) 开发鉴定、质谱详细数据和下一个子目录。从质谱数据分析得到了每个匹配结果，首先得到
Southern－Blot－实验流程（包括原理/细节）2
）标记探针检测取标记产物和普通PCR扩增产物各1μl，1.0%的琼脂糖凝胶电泳。由于大分子量的DIG掺入，标记产物泳动速度比普通PCR产物要慢。所以根据电泳图就可以判断是否标记上和有没有非特异标记！其余标记产物-20℃保存。如果要准确检测标记效率（一般不必），取标记产物1μl和Dig标记的对照DNA