环状RNAs帽独立的翻译蛋白及其在癌中的作用
环状RNA是一种共价封闭RNA,在真核生物中广泛表达。circRNA参与多种生理和病理过程,但其调控机制尚不完全清楚。随着RNA深度测序技术的发展和算法的改进,发现了一些circRNA通过cap-independent机制编码蛋白质,参与肿瘤发生发展的重要过程。本文在概述CircRNAs的基础上,总结了其翻译机制和研究方法,并回顾了近年来CircRNAs翻译在肿瘤学领域的研究进展。 此外,本文旨在通过CircRNAs的翻译为肿瘤的诊断和治疗提供新的思路。 根据世界卫生组织国际癌症研究机构2020年发布的最新全球癌症数据,2020年全球新增癌症病例1929万,死亡996万人。恶性肿瘤严重威胁着人们的健康。近年来生物技术的进步加深了人们对单个肿瘤中复杂的遗传和非遗传异质性的理解。蛋白质组学和基因组学的结合可能揭示单个基因活性状态的最准确信息。分子诊断和治疗有助于改善恶性肿瘤不良预后。因此,需要深入探讨恶性肿瘤发生发展的分子机制......阅读全文
T7RNA聚合酶系统基因表达实验(三)
实验方法原理VOTE是最近发展的痘苗病毒/T7 RNA聚合酶混合表达系统,将外源基因克隆到质粒 pVOTE. 1或 pVOTE. 2 中,通过同源重组将其整合到痘苗病毒 vT7lacOI 基因组中,制备重组病毒储液。在异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)存在的条件下,用重组病毒感染细胞,外源基因
关于基因表达的机制非编码RNA的成熟的介绍
多数生物体中的非编码基因(ncRNA)被转录为需要进一步加工的前体。核糖体RNA(rRNA)通常被转录为含有一个或多个rRNA的前体rRNA,前体rRNA后来在特定位点被大约150种不同的snoRNA切割和修饰。转移RNA(tRNA)的5'和3'端序列分别被RNase P和tRN
T7-RNA聚合酶/启动子表达实验
基本方案 备选方案 备选方案2 实验材料 载体 试剂、
T7RNA聚合酶系统基因表达实验(二)
单病毒感染OST7-1细胞实验方法原理OST7-1 细胞来源于鼠 L929 细胞,能在细胞质中持续表达噬菌体 T7 RNA 聚合酶,因此,应用此细胞系无需用 vTF7-3 感染细胞。实验材料贴壁培养的单层 OST7-1 细胞含有 pT7 控制的外源基因的重组病毒储液试剂、试剂盒完全 MEM-2.5
长非编码RNA调控癌基因MYC表达的综述文章
8月7日,中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所研究员陈玲玲受邀在国际学术期刊Current Opinion in Genetics & Development 发表题为The long noncoding RNA regulation at the MYC locus 的综述论
北京生科院建立单细胞环形RNA分析技术及表达图谱
环形RNA是一类在真核细胞中广泛存在的内源性非编码RNA分子,在生物体发育过程中发挥重要作用。之前研究已在不同物种中鉴定出数百万个环形RNA分子,并产生了大量用于揭示生物体组织表达模式的环形RNA数据资源。然而,由于大多数环形RNA表达量较低,传统的转录组测序方法无法表征单个细胞环形RNA表达谱
最准确的基因表达检测方法——RNA测序遭遇“信任”危机?
当前,RNA测序成为了一种常用工具。 利用RNA测序,研究人员能够定量地检测各种生物体的基因表达,从而更好地了解细胞中正在发生的事情以及特定基因的功能。 RNA测序的准确性 早在2014年,《Nature Biotechnology》上发表了三篇文章。它们属于RNA测序质量控制(SEQC)
Nature子刊:RNA测序鉴定小胶质细胞独特表达基因
马萨诸塞州综合医院(MGH)的研究者采用一种新的测序方法,鉴定了一组被脑免疫细胞——称为小胶质细胞—— 用来感知需要其做出反应的致病组织、毒素或损伤细胞的基因。这些基因的鉴定,能使我们更好地理解小胶质细胞在正常大脑和神经退行性疾病中的作用,为保护诸如阿尔茨海默氏病和帕金森氏综合症引起的损伤带
T7-RNA聚合酶/启动子表达实验
实验材料 载体试剂、试剂盒 氨苄青霉素卡那霉素pGP裂解缓冲液仪器、耗材 培养箱分光光度计离心机实验步骤 1. 将含有待表达基因的片段亚克隆于pT7-5、pT-6或pT7-7中,转化一种标准大肠杆菌菌株,此菌株不应带有可指导T7 RNA聚合酶合成的质粒。转化物涂布于氨苄青霉素平皿,于37℃温育培养
T7RNA聚合酶系统基因表达实验(一)
本节介绍依赖于在哺乳动物细胞质合成噬菌体T7 RNA聚合酶的瞬时细胞质表达系统。首先,将感兴趣的基因插入质粒中,使其位于T7 RNA聚合酶启动子(PT7)的控制下。在培养过程中,外源基因被高效的 T7 RNA聚合酶转录。这种转染方案适用于分析的目的,因为不需要构建新的重组病毒,所以比较简单。对于大规
RNAseq综述(八)
使用核糖体分析方法检测活跃的翻译RNA-seq的主要用途在于研究样本中的mRNA的种类与数量,但是mRNAs的存在与否并不直接关系到蛋白质的合成。现在有两种方法可以研究转录以外的翻译情况,可以让研究者们更好的理解翻译组(translatome):一种是多核糖体表达谱(polysomal pr
翻译后修饰
中文名翻译后修饰外文名Post-translational modification定义翻译后修饰是指蛋白质在翻译后的化学修饰。对于大部分的蛋白质来说,这是蛋白质生物合成的较后步骤。
翻译的起始
(一)原核细胞原核细胞的翻译起始过程大概可以分为以下几个过程:(1)翻译起始因子IF3结合到小亚基的E位点,同时也横跨至P位点;(这一过程在起始之初就已经完成)起始因子IF1结合至A位点;(2)起始因子IF2·GTP被IF3和IF1招募至P位点;(3)起始fMet·tRNA一方面被mRNA起始密码子
与肾癌相关的MIR2181基因编码功能描述
micrornas(micrornas)是短的(20-24nt)非编码RNAs,通过影响mRNas的稳定性和翻译,参与多细胞生物中基因表达的转录后调控。小RNA被RNA聚合酶II转录,作为可编码蛋白质或不编码的有帽和多聚腺苷酸化的初级转录物(pri-mirnas)的一部分。初级转录物被Drosha核
MIR2181基因编码功能及结构描述
micrornas(micrornas)是短的(20-24nt)非编码RNAs,通过影响mRNas的稳定性和翻译,参与多细胞生物中基因表达的转录后调控。小RNA被RNA聚合酶II转录,作为可编码蛋白质或不编码的有帽和多聚腺苷酸化的初级转录物(pri-mirnas)的一部分。初级转录物被Drosha核
与食管癌相关的MIR2181基因编码功能描述
micrornas(micrornas)是短的(20-24nt)非编码RNAs,通过影响mRNas的稳定性和翻译,参与多细胞生物中基因表达的转录后调控。小RNA被RNA聚合酶II转录,作为可编码蛋白质或不编码的有帽和多聚腺苷酸化的初级转录物(pri-mirnas)的一部分。初级转录物被Drosha核
MIR218基因突变与药物因子介绍
micrornas(micrornas)是短的(20-24nt)非编码RNAs,通过影响mRNas的稳定性和翻译,参与多细胞生物中基因表达的转录后调控。小RNA被RNA聚合酶II转录,作为可编码蛋白质或不编码的有帽和多聚腺苷酸化的初级转录物(pri-mirnas)的一部分。初级转录物被Drosha核
与结直肠癌相关的MIR2181基因编码功能描述
micrornas(micrornas)是短的(20-24nt)非编码RNAs,通过影响mRNas的稳定性和翻译,参与多细胞生物中基因表达的转录后调控。小RNA被RNA聚合酶II转录,作为可编码蛋白质或不编码的有帽和多聚腺苷酸化的初级转录物(pri-mirnas)的一部分。初级转录物被Drosha核
四环素控制系统诱导基因表达实验
pTet-tTAK 稳定转染(第一轮) pTet-tTAK 稳定转染(第二轮) 实验方法原理 tTA 是一种融合蛋白,它是由来自于大肠杆菌的四环素抑
四环素控制系统诱导基因表达实验
实验方法原理 tTA 是一种融合蛋白,它是由来自于大肠杆菌的四环素抑制蛋白和疱疹病毒的 VP16 蛋白的转录激活区域组成的。在缺乏四环素时,tTA 就结合到并激活位于基因前端的由 Tn10 和一个小的 CMV 启动子组成的七聚体结构的四环素抗性控制子(简称 Tet P)。当 tTA 结合
MicroRNA(miRNA)的概念
MicroRNA(miRNA):是含有茎环结构的miRNA前体,经过Dicer加工之后的一类非编码的小RNA分子(~21-23个核苷酸)。MiRNA,以及miRISCs(RNA-蛋白质复合物)在动物和植物中广泛表达。因之具有破坏目标特异性基因的转录产物或者诱导翻译抑制的功能,miRNA被认为在调控发
RNA干扰相关知识MicroRNA(miRNA)
MicroRNA(miRNA):是含有茎环结构的miRNA前体,经过Dicer加工之后的一类非编码的小RNA分子(~21-23个核苷酸)。MiRNA,以及miRISCs(RNA-蛋白质复合物)在动物和植物中广泛表达。因之具有破坏目标特异性基因的转录产物或者诱导翻译抑制的功能,miRNA被认为在调控发
MicroRNA(miRNA)的结构和用途
MicroRNA(miRNA):是含有茎环结构的miRNA前体,经过Dicer加工之后的一类非编码的小RNA分子(~21-23个核苷酸)。MiRNA,以及miRISCs(RNA-蛋白质复合物)在动物和植物中广泛表达。因之具有破坏目标特异性基因的转录产物或者诱导翻译抑制的功能,miRNA被认为在调控发
发现线粒体翻译与细胞质翻译协调机制
中科院生物物理所与中科院动物所、军事医学科学院以及天津科技大学等机构合作,揭示了线粒体翻译与细胞质翻译之间的“协调”机制。研究还揭示了一种全新的男性不育发病途径,对男性不育临床干预具有重要借鉴意义。相关成果4月11日在线发表于《自然—结构域分子生物学》期刊。生物物理所研究员秦燕为通讯作者,该所
2020年环状RNA高分文章怎么发?
环状RNA作为最新发现的RNA分子,从诞生之日起就是光环加身,屡屡登上Science、Nature、Cell等高分期刊。近期发表的《2019研究前沿》中,“环状RNA作为癌症新的生物标志物”成为生物科学领域6个新兴前沿之一。2019年环状RNA共发表SCI论文885篇,较2018年增长约20%,
2020年环状RNA高分文章怎么发?
环状RNA作为最新发现的RNA分子,从诞生之日起就是光环加身,屡屡登上Science、Nature、Cell等高分期刊。近期发表的《2019研究前沿》中,“环状RNA作为癌症新的生物标志物”成为生物科学领域6个新兴前沿之一。2019年环状RNA共发表SCI论文885篇,较2018年增长约20%,
中外学者Nature子刊发文:环状RNA翻译出抑癌蛋白质!
由中山大学、复旦大学、暨南大学、美国安德森癌症中心等多家单位发表一项发现:使用翻译组测序技术,在脑胶质瘤细胞中发现了数千种可能翻译的环状RNA(circRNA),其中320个有差异表达现象,并具体验证了一种名为LINC-PINT的环状RNA可编码长度为87个氨基酸的蛋白质PINT87aa。 近
精氨酸甲基化在RNA剪接和翻译全局调控中的关键作用
7月15日,中国科学院上海营养与健康研究所研究员王泽峰课题组在Science Bulletin上发表了题为A systematic survey of PRMT interactomes reveals the key roles of arginine methylation in the g
研究揭示环形RNA促进相分离调控肿瘤发展分子机制
环形RNA是由pre-mRNA通过反向剪接形成的闭合环状RNA分子,在生物体内可发挥miRNA海绵、结合蛋白以及翻译成短肽等分子功能来调控各种生理和病理过程。与线性mRNA相比,环形RNA独特的环状结构使其具有更高的稳定性,在细胞内可更稳定地存在。因此,环形RNA更适合作为肿瘤的分子标志物及治疗
液相法筛选cDNA表达文库中RNA结合蛋白实验
将 cDNA 文库表达的蛋白固定于硝酸纤维素膜或尼龙膜上,然后用标记的 RNA 对其进行筛选的方法是筛选 RNA 结合蛋白研究中最常用的技术。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编:郑晓飞。实验方法原理将 cDNA 文库表达的蛋白固定于硝酸纤维素膜或尼龙膜上,然后用标记的 RNA 对其进行筛选的方法