干湿上样法对柱色谱分析效果的影响
上样也有干法和湿法之分:干法就是把待分离的样品用少量溶剂溶解后,在加入少量硅胶,拌匀后再旋去溶剂。如此得到的粉末再小心加到柱子的顶层。干法上样较麻烦,但可以保证样品层很平整。湿法上样就是用少量溶剂(最好就是展开剂,如果展开剂的溶解度不好,则可以用一极性较大的溶剂,但必须少量)将样品溶解后,再用胶头滴管转移得到的溶液,沿着层析柱内壁均匀加入。然后用少量溶剂洗涤后,再加入。湿法较方便,熟手一般采用此法。 上样完毕后,接着即用淋洗剂淋洗。淋洗剂一般采用TLC分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂。由于层析柱和薄板的不同,即使两者使用的硅胶都相同,但是在把TLC分析得到的展开剂用在柱层析时,也显得极性偏大,所以要稀释一倍,但又不能稀释太多,否则成了靠扩散作用来分离,效果也不会好。......阅读全文
干湿上样法对柱色谱分析效果的影响
上样也有干法和湿法之分:干法就是把待分离的样品用少量溶剂溶解后,在加入少量硅胶,拌匀后再旋去溶剂。如此得到的粉末再小心加到柱子的顶层。干法上样较麻烦,但可以保证样品层很平整。湿法上样就是用少量溶剂(最好就是展开剂,如果展开剂的溶解度不好,则可以用一极性较大的溶剂,但必须少量)将样品溶解后,再用胶头滴
柱色谱法的上样方法分析
上样也有干法和湿法之分:干法就是把待分离的样品用少量溶剂溶解后,在加入少量硅胶,拌匀后再旋去溶剂。如此得到的粉末再小心加到柱子的顶层。干法上样较麻烦,但可以保证样品层很平整。湿法上样就是用少量溶剂(最好就是展开剂,如果展开剂的溶解度不好,则可以用一极性较大的溶剂,但必须少量)将样品溶解后,再用胶头滴
柱色谱法的上样方式对比
干法就是把待分离的样品用少量溶剂溶解后,在加入少量硅胶,拌匀后再旋去溶剂。如此得到的粉末再小心加到柱子的顶层。干法上样较麻烦,但可以保证样品层很平整。湿法上样就是用少量溶剂(最好就是展开剂,如果展开剂的溶解度不好,则可以用一极性较大的溶剂,但必须少量)将样品溶解后,再用胶头滴管转移得到的溶液,沿着层
柱色谱法的上样方法介绍
上样也有干法和湿法之分:干法就是把待分离的样品用少量溶剂溶解后,在加入少量硅胶,拌匀后再旋去溶剂。如此得到的粉末再小心加到柱子的顶层。干法上样较麻烦,但可以保证样品层很平整。湿法上样就是用少量溶剂(最好就是展开剂,如果展开剂的溶解度不好,则可以用一极性较大的溶剂,但必须少量)将样品溶解后,再用胶头滴
柱色谱法的上样方法的介绍
上样也有干法和湿法之分:干法就是把待分离的样品用少量溶剂溶解后,在加入少量硅胶,拌匀后再旋去溶剂。如此得到的粉末再小心加到柱子的顶层。干法上样较麻烦,但可以保证样品层很平整。湿法上样就是用少量溶剂(最好就是展开剂,如果展开剂的溶解度不好,则可以用一极性较大的溶剂,但必须少量)将样品溶解后,再用胶
柱温箱对色谱分析检测结果的影响
通常来说,色谱分析过程是利用流动相中的样品和固定相的结合-分离差异来使得分离物质的目的达到。结合-分离过程会受到温度的影响,因此温度会对分析过程产生影响。柱温的改变会影响分离度和峰形,然而影响不大。流动相的种类和流速,测定柱效所用物质的性质,固定相的种类、性质(粒度、粒径分布等),填充状况以及柱
装柱时如何确定上样液的浓度与上样量
上样量根据树脂饱和吸附量换算,上样液的浓度当然是自己算了
气相色谱分析中不同操作条件对色谱柱分离的影响
、柱长,柱内径:一般讲,柱管增长,可改善分离能力,短则组分馏出的快些:柱内径小分离效果好,柱内径大处理量大,但柱内径过大,将导致担体不能均匀地分布在色谱柱中。分析用柱管一般内径为3-6毫米,柱长为1-4米。2、柱温:是一个重要的操作变数,直接影响分离效能和分析速度。选择柱温的根据是混合物的沸点范围,
时间对酶解效果的影响
中性蛋白酶水解豆粕产生氨基氮的量随水解时间延长而逐渐增大,但水解到5 h后,氨基氮产生速度减缓,水解6 h产生氨基氮的量极显著高于水解3 h产生氨基氮的量(P0.05),而且食糜在5 h后将进入大肠,不利于仔猪的消化吸收。
温度对酶解效果的影响
大多数化学反应的速率都和温度有关,酶的催化反应也不例外。每种酶在一定条件下都有其最适温度。实验结果表明,中性蛋白酶在反应的最初阶段,酶蛋白的变性尚未表现出来,因此产生氨基氮的量随温度升高而增加,但高于42 ℃时,酶蛋白变性逐渐突出,反应速率迅速随温度升高的效应逐渐被酶蛋白变性效应所抵消,氨基氮产生量
柱层析的装柱和上样方法
装柱子(添硅胶)时,有两种方法:即湿法装柱和干法装柱,二者各有优劣。不论干法还是湿法,硅胶(固定相)的上表面一定要平整,并且硅胶(固定相)的高度一般为15cm左右,太短了可能分离效果不好,太长了也会由于扩散或拖尾导致分离效果不好。湿法装柱是先把硅胶用适当的溶剂拌匀后,再填入柱子中,然后再加压用淋洗剂
影响色谱柱分离效果的因素有哪些
因素有色谱柱的固定相,色谱柱的规格。载气种类,载气流速。柱温及检查器结构。
凝胶柱洗脱速度对分离效果的影响
洗脱速度会影响凝胶过滤的分离效果,一般洗脱速度要恒定而且合适。保持洗脱速度恒定通常有两种方法,一种是使用恒流泵,另一种是恒压重力洗脱。洗脱速度取决于很多因素,包括柱长、凝胶种类、颗粒大小等,一般来讲,洗脱速度慢一些样品可以与凝胶基质充分平衡,分离效果好。但洗脱速度过慢会造成样品扩散加剧、区带变宽,反
吸附层析法分离效果的影响因素
吸附色谱的分离效果,决定于吸附剂、溶剂和被分离化合物的性质这三个因素。(1)吸附剂凡能够将其他物质聚集到自己表面上的物质,都称为吸附剂。能聚集于吸附剂表面的物质称为被吸附物。在吸附色谱中应用的吸附剂一般为固体。常用的吸附剂有硅胶、氧化铝、活性炭、硅酸镁、聚酰胺、硅藻土等。①硅胶色谱用硅胶为一多孔性物
哪些因素可以影响色谱柱的分离效果?
一、硅胶纯度: 硅胶纯度对峰形有很大液相,硅胶杂质和残留的金属离子会影响样品的峰形,如果硅胶表面的金属含量高会影响碱性化合物的峰形,易发生拖尾。 二、颗粒形状及粒径: 球形颗粒柱效高、重现性好、柱床结构均匀;不规则的颗粒柱床结构不均匀、流动相线速度不均匀,容易形成谱带展宽;平均颗粒直径,粒径
死体积对柱效的影响
我们可以设想这样一个场景,在一条湍急的河流中倒入一瓶墨水,墨水首先会是一个小小的点,渐渐顺水流而行一点点扩散,而到下游的时候肯定已不再是一个点,而是一个宽宽的谱带了。这个现象完全适用于HPLC的分析,试想样品由进样器起步为一个小小的点,流经输液管路和色谱柱,当到达检测池时必然也像墨水一样不可避免的有
色谱柱直径对柱效影响有哪些
色谱柱的分离效果取决于所选择的固定相,以及色谱柱的制备和操作条件。 柱效受柱内外因素影响,为使色谱柱达到最佳效率,除柱外死体积要小外,还要有合理的柱结构(尽可能减少填充床以外的死体积)及装填技术。 色谱柱直径对柱效影响有哪些呢? 色谱柱尺寸填料床的长度和内径,增加色谱柱长度,可以在一定程度
反向色谱法分离效果的影响因素
影响因素(1)柱长有机小分子和肽类的分辨率随柱长的增加而增加.但是柱长增加并不能使蛋白质和核酸等生物大分子的分辨率显著增加.它们在较短的柱子上往往也有很好的分离效果。(2)流动相的流速。有机小分子和肽类的分辨率对流动相流速非常敏感。而蛋白质和核酸等生物大分子的分辨率则不然。流速越小,柱子越长,色谱峰
色谱柱膜厚对柱流速的影响有哪些
对于0.18-0.32mm内径的色谱柱,其平均或标准(即:不厚也不薄)膜厚为0.18-0.25µm,用于大多数分析。 对于0.45-0.53mm内径的色谱柱,其平均或标准(即:不厚也不薄)膜厚为0.8-1.5µm,用于大多数分析。 厚液膜色谱柱用于保留和分离挥发性溶质(如轻溶质、气体)。厚液
探究温度对液相色谱分析的影响
本期就温度对高效液相色谱分析的影响展开说明,重点介绍柱温和环境温度对分析的影响。一、柱温对高效液相色谱分析的影响,通过范特霍夫方程来表达。 原则上,范特霍夫方程是用于计算在不同温度下某反应平衡常数的方程:㏑K=-△H/RT+△S/R K:保留因子,描述色谱柱温度相关系数△H:流动相和固定相之间分
水分、烃类和氧气对色谱分析的影响
水分、烃类和氧气对色谱分析的影响在色谱分析过程中,存在气源管路及气瓶中的水分、烃类、氧会产生噪声、额外峰和基线毛刺,尤其对特殊检测器(如ECD\PID)影响更为明显,极端情况下还会破坏色谱柱。通常水分存在于气体容器的表面和气路管路内,其不仅影响组分的分离,还会使部分固定相或硅烷化担体(甚至包括某些
影响样品在色谱柱上凝结速度的因素
一、色谱柱柱温的初始温度1.基本是zui容易也是zui快做到的方法,一般来说初始温度越低的话,分析物凝结的越好2.初始温度如果设在比zui快出峰分析物的沸点低50℃左右,温度保持的时间基本就是非分流的保持时间二、色谱柱“固定相比例”越低的固定相比例,意味着越厚的膜厚,膜越厚样品和溶剂越容易溶解在固定
影响样品在色谱柱上凝结速度的因素
一、色谱柱柱温的初始温度1.基本是zui容易也是zui快做到的方法,一般来说初始温度越低的话,分析物凝结的越好2.初始温度如果设在比zui快出峰分析物的沸点低50℃左右,温度保持的时间基本就是非分流的保持时间二、色谱柱“固定相比例”越低的固定相比例,意味着越厚的膜厚,膜越厚样品和溶剂越容易溶解在固定
层析柱高径比对层析柱分离效果有什么影响
层析柱高径比是指层析柱的高度与内径之比。层析柱高径比对层析柱分离效果有着重要的影响,一般来说,高径比越大,分离效果越好。高径比的提高可以带来以下几个方面的优势:提高分离效率:高径比的提高可以增加层析柱的理论板数,提高分离效率。提高分离精度:高径比的提高可以减少色谱柱床颗粒的翻滚、流动等运动,从而减小
温度和时间对酶水解豆粕效果的影响
目前动物性蛋白原料价格上涨,导致了对高品质植物性蛋白质需求量的增加。在世界范围内,饲料中的绝大部分蛋白质来自油料种籽和豆科作物等植物性蛋白,豆粕又是应用最广泛的植物饲料蛋白质资源,其蛋白质含量高,除富含蛋氨酸外,其它氨基酸也较平衡,但是由于大豆中存在一些抗营养因子,如抗胰蛋白酶因子、抗原蛋白,严重影
色谱柱柱温的高低对色谱分离有什么影响
柱温越高,出峰越快,保留时间越短,有些组份可能分离度不够.无法完全分开.
色谱柱柱温的高低对色谱分离有什么影响
柱温越高,出峰越快,保留时间越短,有些组份可能分离度不够.无法完全分开.
色谱柱柱温的高低对色谱分离有什么影响
柱温越高,出峰越快,保留时间越短,有些组份可能分离度不够.无法完全分开.
气相色谱柱柱温变化对定性结果的影响
气相色谱柱温度不仅影响色谱过程的热力学因素,也影响传质过程的动力学因素。柱温变化,不仅影响柱前端压力、载气流速等,更重要的是对物质的分离、分析结果带来影响。而在色谱定性方法中,气相色谱柱柱温变化对定性结果的影响如下:①当采用保留值定性时,其他色谱条件不变,柱温变化时,保留时间就会发生变化,这样就直接
气相色谱柱柱温变化对定性结果的影响
气相色谱柱温度不仅影响色谱过程的热力学因素,也影响传质过程的动力学因素。柱温变化,不仅影响柱前端压力、载气流速等,更重要的是对物质的分离、分析结果带来影响。而在色谱定性方法中,气相色谱柱柱温变化对定性结果的影响如下:①当采用保留值定性时,其他色谱条件不变,柱温变化时,保留时间就会发生变化,这样就直接