qPCR和qRTPCR各有什么优缺点
QRT PCR一般指以RNA为模板，先逆转成cDNA，再进行qPCR而qPCR一般是泛指，既可以当它是qRTPCR，也可以指他是专门定量检测DNA的比如检测细菌的16S，那不需要做RT，直接用qPCR检测定量即可。......阅读全文
基于epMotion－5075t系统与KPPA－HyperPlus试剂盒的全自动测序...2
Results and DiscussionThe post-ligation qPCR results were used to calculate the percentage of starting material that was successfully adapter ligate
DSF群体淬灭及调控机制研究获新进展
近日，华南农业大学群体微生物研究中心教授张炼辉团队在DSF（diffusible signal factor）群体淬灭及调控机制方面取得新进展。他们报道了一个关键的调控因子RdmA及其调控的代谢基因簇dmgA-H在DSF群体淬灭过程中的重要作用。相关研究发表于mBio。博士后研究员王惠杉为该论文
解读2020《中国药典》－耶拿举办生物药物研发及质控研讨会
分析测试百科网讯 2020年11月16-18日，慕尼黑上海分析生化展（analytica China）正式开展。德国耶拿携qTOWER3系列荧光定量PCR仪、UVP GelSolo独立型凝胶成像仪、UVP GelStudio PLUS 多功能凝胶成像仪、全能型自动液体处理工作站等明星产品亮相慕尼
TaqMan探针法的操作
在之前发表的文章《实时荧光定量PCR检测方法，你选对了吗?》中提到，实时荧光定量PCR常用的方法包括了SYBR Green染料法、TaqMan探针法、分子信标、荧光共振能量传递(FRET)和LUX Primers等。那么应用最为广泛的则是SYBR Green染料法和TaqMan探针法，两者各
定量方法知多少绝对定量
在做qPCR实验时，我们经常会问：“你是做绝对定量还是相对定量呢？”，而定量方法的选择是取决于实验的目标。绝对定量可测定目标核酸分子的实际拷贝数，但也是最费力、最复杂的定量形式。此方法要求周密的实验方案和高度准确的标准曲线，常用于确定病毒滴度。使用标准曲线进行绝对定量绝对定量是通过样品的Cq值和标准
多重荧光定量pcr最多检测多少种
这个看你自己的设置。qPCR仪一般是96孔板，最多有5个通道。理论上，你用一个通道作为内标，2个孔分别做阴阳性对照。那么可以做94*4=376个。当然这只是理论上的最大值，实际操作的时候受很多限制，如多重PCR之间的交叉反应导致无法合孔，样本量不足等。具体到肿瘤相关的突变检测试剂盒，目前拿到CFDA
microRNA检测的引物设计中颈环法同polyA加尾法有何区别？
行使功能的microRNA成熟形式一般仅18——25nt，因此在逆转录环节通过特定引物增加其长度，以便于qPCR过程正常进行。颈环法中的逆转录引物由自身可形成颈环结构的通用序列加上目的microRNA 3’端碱基的反向互补序列；polyA加尾法即在逆转录前先加polyA尾，然后通过oligo(dT)
circRNA抑制由DNA感受器cGAS介导的长期造血干细胞耗竭
中科院生物物理研究所的范祖森教授课题组主要从事肿瘤干细胞、免疫细胞发育分化及肿瘤靶标发现与肿瘤个体化治疗等领域的研究，近期其团队利用Arraystar Mouse CircRNA Array研究了小鼠骨髓细胞（BM）中分离的长期造血干细胞（LT-HSCs）和多能干细胞（MPPs）的circRN
BioTNT－mRNA－引物筛选，引物定制或specific－primers的使用说明1
BioTNT mRNA 引物筛选，引物定制或specific primers的使用说明版本号：20100001BioTNT qPCR Primer Assay for specific mRNA genes目录号：SER-PCR –编号（500T）;说明书 Part A 一、产品简介：本试剂盒是基于
武汉大学研发纳米孔靶向测序检测方法
记者从武汉大学获悉：该校组建的联合团队创新性开发的纳米孔靶向测序检测方法，能够大幅提升病毒阳性检出率，并能实现当天同时检测新冠病毒和其他10类40种常见呼吸道病毒并监测病毒突变，有助于破解临床疑似病例难以确诊的问题。 据介绍，既往新冠病毒诊断依赖于qPCR核酸检测，但是该方法显示出较高的假阴性
基于数字PCR的单分子DNA定量技术研究进展（二）
2 qPCR与dPCR比较研究 qPCR是目前DNA定量研究的主要技术，该技术通过在PCR反应体系中加入荧光结合染料(SYBR green I) 或荧光标记的探针( 如TaqMan Probes) ，利用实时积累的荧光信号监测整个扩增过程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析，以此来评估
专家指南：如何开展基因表达研究（一）
众所周知，在不同的情况下，在不同的组织中，基因表达的水平也不同。如今，研究人员可利用多种技术来追踪基因表达水平的差异，如定量 PCR、芯片或测序。《Genome Technology》杂志这一次请来了几位科学家，让他们分享一下应如何选择这些技术。此外，研究人员也谈到了解决质量控制和数据分
Life－Tech－研制推出针对肠出血性大肠杆菌的检测试剂盒
during the E. coli breakout in Germany. 对肠出血性大肠杆菌O104的测序工作在3小时之内完成 针对该病
LUX引物：实时PCR检测的多面手
【摘要】 通过使用单一荧光标记的LUX引物，实时PCR能够检测到每次循环中所产生的扩增子。当累积到足够的检测数据后，根据起始模板拷贝数直接与时间点成比例的特性，我们可以精确地推算出模板DNA的起始拷贝数。LUX（Light Upon eXtension）的作用原理是基于一个位于一段特
数字PCR技术的发展与应用简介
数字PCR技术的原理数字PCR（Digital PCR-dPCR）技术是一种新的核酸检测和定量方法，与传统定量PCR（qPCR）技术不同，数字PCR采用绝对定量的方式，不依赖于标准曲线和参照样本，直接检测目标序列的拷贝数。由于这种检测方式具有比传统qPCR更加出色的灵敏度和特异性、精确性，dPCR迅
PNAS：端粒长度检测可筛查短端粒相关的疾病风险
“美国至少有5000-1000人患与短端粒有关的疾病。这些疾病影响的人数与特定类型的白血病一样多，我们认为患病率可能高于目前的估计。”论文第一作者、约翰霍普金斯Kimmel癌症中心肿瘤学教授Mary Armanios博士表示，“有一些遗传性疾病的特征是端粒极短，比如说肺纤维化或骨髓功能衰竭。”来
PNAS：端粒长度检测可筛查短端粒相关的疾病风险
“美国至少有5000-1000人患与短端粒有关的疾病。这些疾病影响的人数与特定类型的白血病一样多，我们认为患病率可能高于目前的估计。”论文第一作者、约翰霍普金斯Kimmel癌症中心肿瘤学教授Mary Armanios博士表示，“有一些遗传性疾病的特征是端粒极短，比如说肺纤维化或骨髓功能衰竭。”来
2020年自然研究热点——外泌体研究（三）
2．分子标志物分子标志物思路案例1外泌体分子标志物的研究是在表达谱的基础上进行更进一步的分析和筛选，并且通过扩大样本验证，来确认可以作为标志物的分子。这类研究与临床应用联系更紧密，近年来越来越受重视。2019年发表在Molecular Cancer（IF=10.679）上的文章Tumor-ori
去甲基化酶ALKBH5在胰腺癌中的应用（二）
4.ALKBH5抑 制胰腺ai细胞生长和转移将过表达ALKBH5的ai细胞移植到裸鼠体内，发现过表达ALKBH5的ai细胞生成的肿 瘤体积明显小于对照组，并且细胞生长的指示分子Ki-67的表达也明显降低。染色显示过表达ALKBH5的组织中侵袭和转移的指示分子MMP-2和MMP-9表达降低，敲
PNAS：端粒长度检测可筛查短端粒相关的疾病风险
“美国至少有5000-1000人患与短端粒有关的疾病。这些疾病影响的人数与特定类型的白血病一样多，我们认为患病率可能高于目前的估计。”论文第一作者、约翰霍普金斯Kimmel癌症中心肿瘤学教授Mary Armanios博士表示，“有一些遗传性疾病的特征是端粒极短，比如说肺纤维化或骨髓功能衰竭。”来
PNAS：端粒长度检测可筛查短端粒相关的疾病风险
短端粒相关疾病 “美国至少有5000-1000人患与短端粒有关的疾病。这些疾病影响的人数与特定类型的白血病一样多，我们认为患病率可能高于目前的估计。”论文第一作者、约翰霍普金斯Kimmel癌症中心肿瘤学教授Mary Armanios博士表示，“有一些遗传性疾病的特征是端粒极短，比如说肺纤维化或
PNAS：端粒长度检测可筛查短端粒相关的疾病风险
短端粒相关疾病 “美国至少有5000-1000人患与短端粒有关的疾病。这些疾病影响的人数与特定类型的白血病一样多，我们认为患病率可能高于目前的估计。”论文第一作者、约翰霍普金斯Kimmel癌症中心肿瘤学教授Mary Armanios博士表示，“有一些遗传性疾病的特征是端粒极短，比如说肺纤维化或
康成tRF测序应用于Biomarker研究
南京医科大学第一附属医院肿瘤科副主任医师殷咏梅教授长期从事消化道肿瘤和乳腺肿瘤的内科治疗，近来，其实验室利用tRF&tiRNA测序，发现在曲妥单抗敏感和耐受的乳腺癌细胞中，tRNA来源的小非编码RNA分子tRF&tiRNA表达差异显著。其中tRF-30-JZOYJE22RR33和tRF-27-Z
tRF测序应用于Biomarker研究
南京医科大学第一附属医院肿瘤科副主任医师殷咏梅教授长期从事消化道肿瘤和乳腺肿瘤的内科治疗，近来，其实验室利用tRF&tiRNA测序，发现在曲妥单抗敏感和耐受的乳腺癌细胞中，tRNA来源的小非编码RNA分子tRF&tiRNA表达差异显著。其中tRF-30-JZOYJE22RR33和tRF-27-ZDX
circRNA机制研究汇总（一）
文章导读超强子调控circRNA-Nfix缺失诱导成年小鼠心肌梗死后再生circRNAs正在成为心脏发育和疾病强有力的调节因子，但其在心脏再生中的作用仍然未知。鉴于此，作者与他的团队探究了与超增强子(SEs)相关的circRNA-Nfix在小鼠心肌梗死后再生过程中的功能，并探究了其调节心脏重塑的分子
普通PCR、实时荧光定量PCR、数字PCR技术的功能区别
一、普通PCR技术 KARY MULLIS （1944.12.28-2019.8.7） Kary Mullis于1983年发明了聚合酶链式反应法（polymerase chain reaction ，PCR），据说是载着女友开车的时候，忽然灵光一闪，想到了PCR原理（论开车的好处）
数字PCR应用（三）
Fluidigm公司于2006年底推出了基于集成流体通路（IFC）芯片的Bio-Mark™ 高通量基因剖析系统。 其创新在于集成液体通路技术：应用集成电路制造工艺（光刻）在硅片或石英玻璃上刻上许多微管和微腔体，经过不同的控制阀门控制溶液在其中的活动来完成生物样品的分液、混合、PCR扩增。图8. Bi
DNA微阵列的常见类型
Stanford型由美国斯坦福大学开发的cDNA array的制作方法，将预先合成好的核酸探针布放于玻片载体上。 优点：设计较长的探针长度可增加专一性。 缺点：芯片密度较光罩法低，并须有良好的保存设计。这种方法又可分为点制法与印制法。点制法是小规模生产或实验室自制的低密度芯片，以机械手臂上带有毛细作
罗氏FFPET组织样本抽提RNA试剂盒实验结果分析
High Pure FFPET RNA Isolation Kit基于离心柱法的抽提原理，在柱上直接进行高效DNase消化，在整合的实验流程中方便地去除残留DNA。图1：抽提获得宽泛的RNA片段范围，FFPET RNA抽提物片段长度范围在100-4000bp 使用3中不同的方法从乳腺癌组织的5um
从体液中高效提取microRNA
谈到microRNA(miRNA)的提取，大部分试剂盒都是针对哺乳动物细胞和组织，血液的也有，但针对体液的产品，至今好像仍是空白。为此，丹麦 Exiqon公司近日推出了miRCURY™ RNA Isolation Kit C Biofluids，能够从血清、血浆、尿液及其他体液中提取小分